免疫荧光操作流程
@钮军1277：免疫荧光检查法的过程是怎样的呢?
红永17079611549…… 免疫学中的免疫荧光检查法:对抗体进行荧光标记,从而可以根据荧光的分布和形态确定抗原的部位和性质
@钮军1277：免疫荧光显微技术的检测流程是怎样的呢?
红永17079611549…… (一)标本的制作 荧光显微技术主要靠观察切片标本上荧光抗体的染色结果作为抗原的鉴定和定位.因此标本制作的好坏直接影响到检测的结果.在制作标本过程中应力求...
@钮军1277：跪求:悬浮细胞免疫组化和免疫荧光的具体步骤! - 作业帮
红永17079611549…… [答案] 我做过悬浮细胞的免疫组化,是固定后涂片的,防脱载玻片,晾干后,先破膜,再开始按照石蜡切片脱水后的步骤进行,不同试剂盒要求不同,所以就按照说明书来吧,免疫荧光和免疫组化大致相同,就是二抗和显色剂不同,也可参照说明说,唯一...
@钮军1277：细胞免疫荧光怎么封片 -
红永17079611549…… 细胞免疫荧光的详细操作步骤 1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍.注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心. 2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍. 3,0.2%Triton X 100通透10分钟,PBS洗三遍. 4, 与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,PBS洗三遍. 5.,一抗4度湿盒内过夜,也可37度2小时,感觉前者效果好,PBS洗三遍. 6,二抗室温2小时,或者37度1半小时,PBS洗三遍. 7,最好用DAPI染核,然后直接照荧光片. 8,蒸馏水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周.
@钮军1277：免疫荧光的方法有什么注意环节 -
红永17079611549…… 1、冰冻切片制备:建议用新鲜组织,否则组织细胞内部结构破坏,易使抗原弥散.选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等,防止裂片和脱片严重. 2、组织切片固定:切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定 5-10 min,尤其要较长...
@钮军1277：PI 染色操作步骤 -
红永17079611549…… 去百度文库,查看完整内容> 内容来自用户:唐韵茹sharon PI 染色操作步骤 1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中,离心,1500rpm , 5min,弃上清液. 2、加入PBS 1ml离心洗涤1次,弃上清. 3、加入2ml预冷的70%酒精,4℃固定30min,...
@钮军1277：L - 多聚赖氨酸包被细胞爬片免疫荧光步骤 -
红永17079611549…… 第一天:1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min;3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤);4. PBS浸洗...
@钮军1277：心肌细胞免疫荧光一定要做细胞爬片吗 -
红永17079611549…… 细胞免疫荧光步骤:1.细胞爬片;首先是玻片的处理,普通的盖玻片用砂轮划成自己要的大小的小方块,先用洗衣粉洗干净,用水冲静烤干,然后泡酸过夜,捞酸后流水洗净,烤干,置于器皿中高压灭菌,然后再烤箱中大约8小时烤干备用.爬...
@钮军1277：荧光色染发操作方法 -
红永17079611549…… 免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合来显示目的蛋白,主要包括蛋白和一抗结合,其次是带有荧光基团的二抗识别并结合一抗,荧光显微镜下即可观察到荧光,下文主要列举了三种细胞免疫荧光染色的实验步骤.一、zo-1...
@钮军1277：细胞免疫荧光阳性表达一定要定量的吗 -
红永17079611549…… 要看阳性对照和阴性对照,阴性对照没有荧光,阳性对照有荧光,重复一次结果稳定的话就可以说是阳性了.样品的稀释度要看蛋白的表达量,用你们实验室的标准protocol先做一遍,结果不好再优化条件.定量是可以的,要做western blot和ELISA,但也只是相对定量,不是绝对定量,把你检测的结果保存一张比较好的图片,背景清晰,结果稳定的.用图像软件处理,把你空白对照组所出现的结果明暗度设置为1,在比较实验组的结果,得出的百分比就是半定量的结果.
红永17079611549…… 免疫学中的免疫荧光检查法:对抗体进行荧光标记,从而可以根据荧光的分布和形态确定抗原的部位和性质
@钮军1277：免疫荧光显微技术的检测流程是怎样的呢?
红永17079611549…… (一)标本的制作 荧光显微技术主要靠观察切片标本上荧光抗体的染色结果作为抗原的鉴定和定位.因此标本制作的好坏直接影响到检测的结果.在制作标本过程中应力求...
@钮军1277：跪求:悬浮细胞免疫组化和免疫荧光的具体步骤! - 作业帮
红永17079611549…… [答案] 我做过悬浮细胞的免疫组化,是固定后涂片的,防脱载玻片,晾干后,先破膜,再开始按照石蜡切片脱水后的步骤进行,不同试剂盒要求不同,所以就按照说明书来吧,免疫荧光和免疫组化大致相同,就是二抗和显色剂不同,也可参照说明说,唯一...
@钮军1277：细胞免疫荧光怎么封片 -
红永17079611549…… 细胞免疫荧光的详细操作步骤 1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍.注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心. 2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍. 3,0.2%Triton X 100通透10分钟,PBS洗三遍. 4, 与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,PBS洗三遍. 5.,一抗4度湿盒内过夜,也可37度2小时,感觉前者效果好,PBS洗三遍. 6,二抗室温2小时,或者37度1半小时,PBS洗三遍. 7,最好用DAPI染核,然后直接照荧光片. 8,蒸馏水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周.
@钮军1277：免疫荧光的方法有什么注意环节 -
红永17079611549…… 1、冰冻切片制备:建议用新鲜组织,否则组织细胞内部结构破坏,易使抗原弥散.选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等,防止裂片和脱片严重. 2、组织切片固定:切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定 5-10 min,尤其要较长...
@钮军1277：PI 染色操作步骤 -
红永17079611549…… 去百度文库,查看完整内容> 内容来自用户:唐韵茹sharon PI 染色操作步骤 1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中,离心,1500rpm , 5min,弃上清液. 2、加入PBS 1ml离心洗涤1次,弃上清. 3、加入2ml预冷的70%酒精,4℃固定30min,...
@钮军1277：L - 多聚赖氨酸包被细胞爬片免疫荧光步骤 -
红永17079611549…… 第一天:1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min;3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤);4. PBS浸洗...
@钮军1277：心肌细胞免疫荧光一定要做细胞爬片吗 -
红永17079611549…… 细胞免疫荧光步骤:1.细胞爬片;首先是玻片的处理,普通的盖玻片用砂轮划成自己要的大小的小方块,先用洗衣粉洗干净,用水冲静烤干,然后泡酸过夜,捞酸后流水洗净,烤干,置于器皿中高压灭菌,然后再烤箱中大约8小时烤干备用.爬...
@钮军1277：荧光色染发操作方法 -
红永17079611549…… 免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合来显示目的蛋白,主要包括蛋白和一抗结合,其次是带有荧光基团的二抗识别并结合一抗,荧光显微镜下即可观察到荧光,下文主要列举了三种细胞免疫荧光染色的实验步骤.一、zo-1...
@钮军1277：细胞免疫荧光阳性表达一定要定量的吗 -
红永17079611549…… 要看阳性对照和阴性对照,阴性对照没有荧光,阳性对照有荧光,重复一次结果稳定的话就可以说是阳性了.样品的稀释度要看蛋白的表达量,用你们实验室的标准protocol先做一遍,结果不好再优化条件.定量是可以的,要做western blot和ELISA,但也只是相对定量,不是绝对定量,把你检测的结果保存一张比较好的图片,背景清晰,结果稳定的.用图像软件处理,把你空白对照组所出现的结果明暗度设置为1,在比较实验组的结果,得出的百分比就是半定量的结果.
