转染可以不用opti-mem吗
@山姚273：转染的时候除了要加opti - mem还要加培养液吗 -
詹夜18754757918…… 转染用opti-mem选无血清培养基在做转染时,我们用无血清培养基Opti-MEMreg;.这类培养基本身是不含有血清的,同时因为添加了化学成分有替代血清的作用.该培基用于细胞培养时,可以减小血清的添加量,因此叫做“Reduced Serum Medium”,即减血清培养基.
@山姚273：请提供稳定转染的protocol转染了几次,都没成功
詹夜18754757918…… 1. 转染前一天,将细胞用胰酶消化、计数并铺板,使转染日细胞融合度为70-90%.在铺板和转染期间避免使用抗生素. 2. 对每孔细胞,在100μl无血清培养基(如OPTI-...
@山姚273：lipofectamine 2000脂质体转染 -
詹夜18754757918…… 博凌科为生物科技-为你解答:这应该是一种贴壁细胞,先按说明书提供的比例计算要用的lipofectamine 2000和DNA的量,分别用无血清培养液稀释lipofectamine 2000和要转染的DNA,按说明书要求的时间混合两种稀释液,在等待的时间里用无血清培养液洗2两遍细胞,加入适量的无血清培养液,再将lipofectamine 2000和DNA的混合液加入培养板或培养瓶,放细胞培养箱就行了,过4~6小时换含血清的培养液.洗细胞和加液的时候动作要轻.
@山姚273：不用转染试剂的细胞转染有哪些方法 -
詹夜18754757918…… 不用转染试剂的细胞转染有哪些方法1. 试验准备:200ul/1mlTip头各一盒(以上物品均需高压灭菌),酒精棉球,废液缸,试管架,微量移液器,记号笔,培养皿,离心管.2. 弃掉培养皿中的培养基,用1ml的PBS溶液洗涤两次.
@山姚273：opti - mem03 medium配转染试剂可用普通培养基替代吗 -
詹夜18754757918…… MEM完全培养基用DMEM完全培养基替代 DMEM dulbecco's modified eagle medium缩写,种含各种氨基酸葡萄糖培养基MEM培养基基础研制与MEM比较增加各种用量同高糖型(低于4500mg/L)低糖型(低于1000mg/L)高糖型利于细胞停泊于位置适于较快、附着较困难肿瘤细胞等
@山姚273：opti - mem 是什么培养液?有什么特点? -
詹夜18754757918…… Opti-MEM® I 减血清培养基是 EMEM 的改良型,其中使用了 HEPES 和碳酸氢钠进行缓冲,并添加次黄嘌呤、胸苷、丙酮酸钠、L-谷氨酰胺、痕量元素和生长因子.在含血清培养基中...
@山姚273：哪些因素影响RNA转染的效率? -
詹夜18754757918…… 既然都是核酸,传统的DNA转染方法都可以用来转染RNA,不过最头疼的就是RNA容易降解和防止RNAse污染.RNA 操作要注意的事项我们就不用罗嗦了,转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒...
@山姚273：质粒转染的转染试剂可不可以用lip2000呢 -
詹夜18754757918…… 可以的,很常用的.lip2000、effectene都是常用的.这里有个详细转染的方法,见链接.希望能帮到你!
@山姚273：悬浮细胞NB4用哪种转染试剂比较好 -
詹夜18754757918…… 悬浮细胞NB4用哪种转染试剂比较好 DXY721认为:悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了.其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有...
@山姚273：fu - gene hd试剂转染好还是脂质体转染好 -
詹夜18754757918…… 6kb以上的确有点大,会影响转染效果1.用脂质体和阳离子转染试剂.现在很多公司都有卖转染试剂的,你可以直接买转染试剂来进行转染.比如说最经典的lip2000,或者吉满生物的效果还行,主要是便宜.2.可以尝试使用电转,但是对细胞伤害较大,需要专门的仪器.3.慢病毒和腺病毒包装现在价钱在一万不到一些,主要还是看公司报价,你可以谈价钱.
詹夜18754757918…… 转染用opti-mem选无血清培养基在做转染时,我们用无血清培养基Opti-MEMreg;.这类培养基本身是不含有血清的,同时因为添加了化学成分有替代血清的作用.该培基用于细胞培养时,可以减小血清的添加量,因此叫做“Reduced Serum Medium”,即减血清培养基.
@山姚273：请提供稳定转染的protocol转染了几次,都没成功
詹夜18754757918…… 1. 转染前一天,将细胞用胰酶消化、计数并铺板,使转染日细胞融合度为70-90%.在铺板和转染期间避免使用抗生素. 2. 对每孔细胞,在100μl无血清培养基(如OPTI-...
@山姚273：lipofectamine 2000脂质体转染 -
詹夜18754757918…… 博凌科为生物科技-为你解答:这应该是一种贴壁细胞,先按说明书提供的比例计算要用的lipofectamine 2000和DNA的量,分别用无血清培养液稀释lipofectamine 2000和要转染的DNA,按说明书要求的时间混合两种稀释液,在等待的时间里用无血清培养液洗2两遍细胞,加入适量的无血清培养液,再将lipofectamine 2000和DNA的混合液加入培养板或培养瓶,放细胞培养箱就行了,过4~6小时换含血清的培养液.洗细胞和加液的时候动作要轻.
@山姚273：不用转染试剂的细胞转染有哪些方法 -
詹夜18754757918…… 不用转染试剂的细胞转染有哪些方法1. 试验准备:200ul/1mlTip头各一盒(以上物品均需高压灭菌),酒精棉球,废液缸,试管架,微量移液器,记号笔,培养皿,离心管.2. 弃掉培养皿中的培养基,用1ml的PBS溶液洗涤两次.
@山姚273：opti - mem03 medium配转染试剂可用普通培养基替代吗 -
詹夜18754757918…… MEM完全培养基用DMEM完全培养基替代 DMEM dulbecco's modified eagle medium缩写,种含各种氨基酸葡萄糖培养基MEM培养基基础研制与MEM比较增加各种用量同高糖型(低于4500mg/L)低糖型(低于1000mg/L)高糖型利于细胞停泊于位置适于较快、附着较困难肿瘤细胞等
@山姚273：opti - mem 是什么培养液?有什么特点? -
詹夜18754757918…… Opti-MEM® I 减血清培养基是 EMEM 的改良型,其中使用了 HEPES 和碳酸氢钠进行缓冲,并添加次黄嘌呤、胸苷、丙酮酸钠、L-谷氨酰胺、痕量元素和生长因子.在含血清培养基中...
@山姚273：哪些因素影响RNA转染的效率? -
詹夜18754757918…… 既然都是核酸,传统的DNA转染方法都可以用来转染RNA,不过最头疼的就是RNA容易降解和防止RNAse污染.RNA 操作要注意的事项我们就不用罗嗦了,转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒...
@山姚273：质粒转染的转染试剂可不可以用lip2000呢 -
詹夜18754757918…… 可以的,很常用的.lip2000、effectene都是常用的.这里有个详细转染的方法,见链接.希望能帮到你!
@山姚273：悬浮细胞NB4用哪种转染试剂比较好 -
詹夜18754757918…… 悬浮细胞NB4用哪种转染试剂比较好 DXY721认为:悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了.其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有...
@山姚273：fu - gene hd试剂转染好还是脂质体转染好 -
詹夜18754757918…… 6kb以上的确有点大,会影响转染效果1.用脂质体和阳离子转染试剂.现在很多公司都有卖转染试剂的,你可以直接买转染试剂来进行转染.比如说最经典的lip2000,或者吉满生物的效果还行,主要是便宜.2.可以尝试使用电转,但是对细胞伤害较大,需要专门的仪器.3.慢病毒和腺病毒包装现在价钱在一万不到一些,主要还是看公司报价,你可以谈价钱.
