酶标仪参考波长的选择标准
@台清243:酶标仪 怎么测不出来数值大于3吗 -
庄菁17818108328…… 实验中波长的选择主要依赖于你要测的样品.样品在不同的波长下,对光的吸收值也不同,但都有一个吸收峰,一般选择吸收峰时的波长进行实验.比如同样是mtt法做细胞毒性实验,就有使用490nm和570nm两种波长选择,如果使用了dmso作为试剂,在溶解后呈紫(红)色,在490nm有最大吸收值;而对于sds和酸化异丙醇,则选用570nm(655nm作为参考波长). 酶标仪波长设定还要看你用的是什么酶标仪,如果是光栅式单色器(可以1nm步进调节),就可以直接设定吸收峰的波长;如果是滤光片式单色器,因为受滤光片波长限制,有时你就需要选接近使用波长的滤光片,比如655nm,你就可能选用650nm的滤光片.
@台清243:普通酶标仪测定时为什么选择双波长测定 -
庄菁17818108328…… 酶标仪判读结果是每个孔吸光度的值,所以一般可以分为单波长和双波长测量,用单波长测量时,96孔微板会留一个空白孔.因为孔的吸光度值包括了孔壁+实验体,为了得出实验体的值,必须留一个空白孔测试出孔壁值,结果扣减.但由于每个孔不可能完全一样,科学来讲不能用一个孔吸光度值代表所有的,所以酶标仪才有了双波长.双波长的意思是,会有两次不同波长来测总值,第二个波长只测孔壁吸光度值,结果每个孔各自扣减得出结果.理论上结果更为科学和准确.市面上单波长仪器有Hebe酶标仪,进口的有sunrise酶标仪.
@台清243:用MTT法作细胞的生长曲线的几个问题 -
庄菁17818108328…… 博凌科为解答:(1)OD值转换为细胞数似乎不太好操作,就像楼上战友说的那样,影响因素比较多,单个细胞活性与MTT转化量是有关系的,所以需要有一个标准细胞 活性的参照才能计算细胞数.(2)OD应该在0.2~1之间线性度最好,2-3就不太好了,有时候1.5也凑合了.(3)标准的MTT,DMSO溶的话,吸光度峰值应该在570nm,线性度最高,但是多数实验室酶标仪的滤光片配置都没有这个数值,所以似乎大家就 用490nm来替代了,理论上说线性度不如570nm,但是因为相差不算太多,也可以代用.
@台清243:紧急求助,关于ELISA空白对照的OD值 -
庄菁17818108328…… 当然是去掉空白的OD值了!!不过我还是建议你不用设空白,因为每次甚至每孔的空白都不一样,误差很大,就别说批件差了.建议用双波长测,一般中档以上的酶标仪基本上都同时具有单波长和双波长比色功能.所谓的单波长比色即是通常...
@台清243:酶标仪的波长是紫外光还是可见光 -
庄菁17818108328…… 应该是都有吧
@台清243:如何选择酶标仪 -
庄菁17818108328…… 荧光酶标仪(Fluorence microplate reader)是用来进行荧光检测的酶标仪.通过激发光栅分光后的特定波长的光照射到被荧光物质标定的样品上,会发出波长更长的发射光,通过发射光栅后到达检测器,荧光的强度与样品的浓度呈一定的比例...
@台清243:急,关于MTT测细胞活性实验中的酶标仪的波长问题 -
庄菁17818108328…… 你使用什么波长,跟你测什么东西没有关系,只跟你最后一步显色所使用的底物有关系.波长是同底物显色的颜色相对应的. 到这个网站看下吧http://www.yhyg.com/articleview/2007-6-13/article_view_4488.htm 酶标仪:即酶联免疫检测仪(ELISA Reader)是酶联免疫吸附试验的专用仪器.可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来分析抗原或抗体的含量.
@台清243:选择波长对的原则是什么?选择参比波长为什么比选择测量波长更重要 -
庄菁17818108328…… 波长对的选择是这样,对于待测成分两波长处的吸收存在差值而对于被排除影响的杂质在两波长的吸收相等. 测量波长一般选择在待测成分具有吸收的峰或谷处,而参比波长则选择在杂质在的吸收与测量波长相等的波长处,如果该波长处待测成分无吸收或者也处于吸收的峰或谷处则可以减小仪器测量误差.
@台清243:酶标仪上的OD值有两个450nm是什么意思?3ABC - ELISA实验中用到的OD值到底应该是多少? -
庄菁17818108328…… 是450nm和630nm,一个是检测波长,一个是参比波长.
@台清243:多功能酶标仪的用途 -
庄菁17818108328…… 酶标仪是一种用途广泛的生物检验医疗设备,利用酶联免疫分析法,根据酶标记原理,根据呈色物的有、无和呈色深浅进行定性或定量分析.这是一种极具生命力的免疫学技术.可用于单克隆抗体筛分、凝血分、抗生素灵敏度检验,以及其它需...
庄菁17818108328…… 实验中波长的选择主要依赖于你要测的样品.样品在不同的波长下,对光的吸收值也不同,但都有一个吸收峰,一般选择吸收峰时的波长进行实验.比如同样是mtt法做细胞毒性实验,就有使用490nm和570nm两种波长选择,如果使用了dmso作为试剂,在溶解后呈紫(红)色,在490nm有最大吸收值;而对于sds和酸化异丙醇,则选用570nm(655nm作为参考波长). 酶标仪波长设定还要看你用的是什么酶标仪,如果是光栅式单色器(可以1nm步进调节),就可以直接设定吸收峰的波长;如果是滤光片式单色器,因为受滤光片波长限制,有时你就需要选接近使用波长的滤光片,比如655nm,你就可能选用650nm的滤光片.
@台清243:普通酶标仪测定时为什么选择双波长测定 -
庄菁17818108328…… 酶标仪判读结果是每个孔吸光度的值,所以一般可以分为单波长和双波长测量,用单波长测量时,96孔微板会留一个空白孔.因为孔的吸光度值包括了孔壁+实验体,为了得出实验体的值,必须留一个空白孔测试出孔壁值,结果扣减.但由于每个孔不可能完全一样,科学来讲不能用一个孔吸光度值代表所有的,所以酶标仪才有了双波长.双波长的意思是,会有两次不同波长来测总值,第二个波长只测孔壁吸光度值,结果每个孔各自扣减得出结果.理论上结果更为科学和准确.市面上单波长仪器有Hebe酶标仪,进口的有sunrise酶标仪.
@台清243:用MTT法作细胞的生长曲线的几个问题 -
庄菁17818108328…… 博凌科为解答:(1)OD值转换为细胞数似乎不太好操作,就像楼上战友说的那样,影响因素比较多,单个细胞活性与MTT转化量是有关系的,所以需要有一个标准细胞 活性的参照才能计算细胞数.(2)OD应该在0.2~1之间线性度最好,2-3就不太好了,有时候1.5也凑合了.(3)标准的MTT,DMSO溶的话,吸光度峰值应该在570nm,线性度最高,但是多数实验室酶标仪的滤光片配置都没有这个数值,所以似乎大家就 用490nm来替代了,理论上说线性度不如570nm,但是因为相差不算太多,也可以代用.
@台清243:紧急求助,关于ELISA空白对照的OD值 -
庄菁17818108328…… 当然是去掉空白的OD值了!!不过我还是建议你不用设空白,因为每次甚至每孔的空白都不一样,误差很大,就别说批件差了.建议用双波长测,一般中档以上的酶标仪基本上都同时具有单波长和双波长比色功能.所谓的单波长比色即是通常...
@台清243:酶标仪的波长是紫外光还是可见光 -
庄菁17818108328…… 应该是都有吧
@台清243:如何选择酶标仪 -
庄菁17818108328…… 荧光酶标仪(Fluorence microplate reader)是用来进行荧光检测的酶标仪.通过激发光栅分光后的特定波长的光照射到被荧光物质标定的样品上,会发出波长更长的发射光,通过发射光栅后到达检测器,荧光的强度与样品的浓度呈一定的比例...
@台清243:急,关于MTT测细胞活性实验中的酶标仪的波长问题 -
庄菁17818108328…… 你使用什么波长,跟你测什么东西没有关系,只跟你最后一步显色所使用的底物有关系.波长是同底物显色的颜色相对应的. 到这个网站看下吧http://www.yhyg.com/articleview/2007-6-13/article_view_4488.htm 酶标仪:即酶联免疫检测仪(ELISA Reader)是酶联免疫吸附试验的专用仪器.可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来分析抗原或抗体的含量.
@台清243:选择波长对的原则是什么?选择参比波长为什么比选择测量波长更重要 -
庄菁17818108328…… 波长对的选择是这样,对于待测成分两波长处的吸收存在差值而对于被排除影响的杂质在两波长的吸收相等. 测量波长一般选择在待测成分具有吸收的峰或谷处,而参比波长则选择在杂质在的吸收与测量波长相等的波长处,如果该波长处待测成分无吸收或者也处于吸收的峰或谷处则可以减小仪器测量误差.
@台清243:酶标仪上的OD值有两个450nm是什么意思?3ABC - ELISA实验中用到的OD值到底应该是多少? -
庄菁17818108328…… 是450nm和630nm,一个是检测波长,一个是参比波长.
@台清243:多功能酶标仪的用途 -
庄菁17818108328…… 酶标仪是一种用途广泛的生物检验医疗设备,利用酶联免疫分析法,根据酶标记原理,根据呈色物的有、无和呈色深浅进行定性或定量分析.这是一种极具生命力的免疫学技术.可用于单克隆抗体筛分、凝血分、抗生素灵敏度检验,以及其它需...