180蛋白条带marker分布图
@蒯蓝6677：为什么我跑western蛋白marker最上面180kd和130kd的条带会消失 -
宰芳15858629538…… 条带弥散~这个marker原先跑没问题么~也可能是分离胶的问题~
@蒯蓝6677：做蛋白质免疫印迹时一抗和marker怎么选择? -
宰芳15858629538…… 一抗要针对你的目的蛋白选择特异性很强的相应抗体就可以了的,一般选择抗体说明书上说专门针对WB使用的抗体,而且一般应选择效价较高的抗体. 而MARKER则要取决于你的目的蛋白的分子大小了,选择相应的marker,marker最好要能比较容易的区分条带是否为目的蛋白,即在目的蛋白这一分子大小附近最好是能区分度较大,相应的分子大小的梯度要便于区分.
@蒯蓝6677：琼脂糖凝胶电泳marker的作用 -
宰芳15858629538…… 你好,琼脂糖凝胶电泳marker是用来做参考的,类似于标尺的作用.marker会跑出很多条带,对应带的片段长度是一定的(不同的marker,不同,可以查询);通过找到与样品平齐的带,可以间接地判定样品的片段长度.这是我个人的理解,不知道描述清楚了没.
@蒯蓝6677：蛋白marker分子量都是10 - 180的绿色条带为什么有高有低
宰芳15858629538…… 标记你看到的效果,如果比较明显的标记跑了出来,这意味着坏蛋白提取,或者根本就没有提取的蛋白质!如果你标记的效果并不好,可能是因为你胶制备过程中的一个问题!
@蒯蓝6677：电泳时marker是如何选择的?100bp DNA ladder是指什么 -
宰芳15858629538…… 电泳时marker选择方法: 如果是核酸marker比较简单吧,就是看marker条带的大小和你的目标条带的关系,尽量选择目标条带接近分子量的marker,或是在目标分子量附近条带较多的marker. 另外就是,如果目标分子量很小,凝胶通常选择的浓...
@蒯蓝6677：western blot里面的marker是什么物质 -
宰芳15858629538…… 大小已知的蛋白的混合物,一般是预染的.胶上直接能看到蛋白条带.目的蛋白和marker对比就能知道目的蛋白的大小.
@蒯蓝6677：western blot 的marker是怎么定的 -
宰芳15858629538…… 电泳后会显示一个条带,这个散开的条带可以: 1 在SDS-PAGE中监测蛋白的迁移; 2 确认转膜效率; 3 根据marker的条带估计分子量; 4 确定目的蛋白位置.
@蒯蓝6677：什么叫 预染蛋白marker -
宰芳15858629538…… 预染蛋白marker为一些纯化好的蛋白的混合物.这些蛋白混合物与一种蓝色染料共价偶联.可在凝胶电泳时出现强度均匀的8条带.同未预染的蛋白marker相比,预染蛋白marker因与染料共价偶联而在SDS-PAGE电泳时的迁移特性发生某些改变.
@蒯蓝6677：mark含什么蛋白质 -
宰芳15858629538…… 常用的蛋白marker从117KD到17KD,不同的条带是由不同大小的蛋白组成的.一般pre-stained的marker有这样的组成 蛋白质 来源 分子量计算 MW (Da) MBP-b-牛乳糖1 E. coli 175,000 MBP-副肌球蛋白1 E. coli 83,000 谷氨酸脱氢酶 牛肝 62,000 醛缩酶 兔子肌肉 32,500 b-乳球蛋白 A 牛奶 25,000 溶解酵素 鸡蛋白 16,500 抑肽酶 牛肺 6,5001MBP = 麦芽糖结合蛋白, MBP-b-牛乳糖 = MBP 和b-牛乳糖的融合蛋白, MBP-副肌球蛋白 = MBP 和副肌球蛋白的融合蛋白.
@蒯蓝6677：蛋白marker的单位t是什么意思 -
宰芳15858629538…… 蛋白marker是用于蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳中衡量样品分子量大小的标尺,其中混合有已知分子量的蛋白,通过电泳条带所对应的蛋白marker的区间来判断分子量.同理DNA Ladder是用于核酸琼脂糖凝胶电泳衡量样品分子量大小的标尺,用法同蛋白marker.
宰芳15858629538…… 条带弥散~这个marker原先跑没问题么~也可能是分离胶的问题~
@蒯蓝6677：做蛋白质免疫印迹时一抗和marker怎么选择? -
宰芳15858629538…… 一抗要针对你的目的蛋白选择特异性很强的相应抗体就可以了的,一般选择抗体说明书上说专门针对WB使用的抗体,而且一般应选择效价较高的抗体. 而MARKER则要取决于你的目的蛋白的分子大小了,选择相应的marker,marker最好要能比较容易的区分条带是否为目的蛋白,即在目的蛋白这一分子大小附近最好是能区分度较大,相应的分子大小的梯度要便于区分.
@蒯蓝6677：琼脂糖凝胶电泳marker的作用 -
宰芳15858629538…… 你好,琼脂糖凝胶电泳marker是用来做参考的,类似于标尺的作用.marker会跑出很多条带,对应带的片段长度是一定的(不同的marker,不同,可以查询);通过找到与样品平齐的带,可以间接地判定样品的片段长度.这是我个人的理解,不知道描述清楚了没.
@蒯蓝6677：蛋白marker分子量都是10 - 180的绿色条带为什么有高有低
宰芳15858629538…… 标记你看到的效果,如果比较明显的标记跑了出来,这意味着坏蛋白提取,或者根本就没有提取的蛋白质!如果你标记的效果并不好,可能是因为你胶制备过程中的一个问题!
@蒯蓝6677：电泳时marker是如何选择的?100bp DNA ladder是指什么 -
宰芳15858629538…… 电泳时marker选择方法: 如果是核酸marker比较简单吧,就是看marker条带的大小和你的目标条带的关系,尽量选择目标条带接近分子量的marker,或是在目标分子量附近条带较多的marker. 另外就是,如果目标分子量很小,凝胶通常选择的浓...
@蒯蓝6677：western blot里面的marker是什么物质 -
宰芳15858629538…… 大小已知的蛋白的混合物,一般是预染的.胶上直接能看到蛋白条带.目的蛋白和marker对比就能知道目的蛋白的大小.
@蒯蓝6677：western blot 的marker是怎么定的 -
宰芳15858629538…… 电泳后会显示一个条带,这个散开的条带可以: 1 在SDS-PAGE中监测蛋白的迁移; 2 确认转膜效率; 3 根据marker的条带估计分子量; 4 确定目的蛋白位置.
@蒯蓝6677：什么叫 预染蛋白marker -
宰芳15858629538…… 预染蛋白marker为一些纯化好的蛋白的混合物.这些蛋白混合物与一种蓝色染料共价偶联.可在凝胶电泳时出现强度均匀的8条带.同未预染的蛋白marker相比,预染蛋白marker因与染料共价偶联而在SDS-PAGE电泳时的迁移特性发生某些改变.
@蒯蓝6677：mark含什么蛋白质 -
宰芳15858629538…… 常用的蛋白marker从117KD到17KD,不同的条带是由不同大小的蛋白组成的.一般pre-stained的marker有这样的组成 蛋白质 来源 分子量计算 MW (Da) MBP-b-牛乳糖1 E. coli 175,000 MBP-副肌球蛋白1 E. coli 83,000 谷氨酸脱氢酶 牛肝 62,000 醛缩酶 兔子肌肉 32,500 b-乳球蛋白 A 牛奶 25,000 溶解酵素 鸡蛋白 16,500 抑肽酶 牛肺 6,5001MBP = 麦芽糖结合蛋白, MBP-b-牛乳糖 = MBP 和b-牛乳糖的融合蛋白, MBP-副肌球蛋白 = MBP 和副肌球蛋白的融合蛋白.
@蒯蓝6677：蛋白marker的单位t是什么意思 -
宰芳15858629538…… 蛋白marker是用于蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳中衡量样品分子量大小的标尺,其中混合有已知分子量的蛋白,通过电泳条带所对应的蛋白marker的区间来判断分子量.同理DNA Ladder是用于核酸琼脂糖凝胶电泳衡量样品分子量大小的标尺,用法同蛋白marker.
