a-tubulin内参
@甘刻4294：如何设计内参tubulin引物 -
计寇17763924776…… 建立茶树α-tubulin基因实时荧光定量RT-PCR方法.方法:根据GenBank中茶树α-tubulin基因保守区域设计一对特异性引物,将PCR扩增得到的α-tubulin基因克隆到pTG19-T载体上,构建的重组质粒标准品经1/10梯度稀释后,用SYBR GreenⅠ染料法绘制标准曲线,并进行融解曲线分析.结果:标准曲线Ct值检测范围为14.56~27.09,相关系数为0.991,溶解曲线分析显示产物为特异的单峰,其Tm值为81±0.3℃.结论:建立了茶树α-tu bulin基因实时荧光定量RT-PCR法,为以α-tubulin作为茶树内参基因进行功能基因表达差异研究奠定了基础.
@甘刻4294：一抗内参tubulin是a还是b -
计寇17763924776…… 微管蛋白 组成微管的蛋白质称为微管蛋白.微管蛋白是球形分子,有两种类型:α微管蛋白(α-tubulin)和β微管蛋白(β-tubulin),这两种微管蛋白具有相似的三维结构,能够紧密地结合成二聚体,作为微管组装的亚基.α亚基由450个氨基酸组成,...
@甘刻4294：14 - 3 - 3蛋白western选用什么内参 -
计寇17763924776…… 要检测蛋白分子量是在28~33kD之间?那内参可以选用a-tubulin(56kD)或者β-actin(42kD)GAPDH(36kD)可能稍微小了的
@甘刻4294：tubulin是什么蛋白 -
计寇17763924776…… 微管蛋白 组成微管的蛋白质称为微管蛋白.微管蛋白是球形分子, 有两种类型:α微管蛋白(α-tubulin)和改侍伏β微管蛋白(β-tubulin), 这两种微管蛋白具有相似的三维结构, 能够紧密地结合成二聚体, 作为微管组装的亚基.α亚基由450个...
@甘刻4294：western blot 的内参不一致,急求助 -
计寇17763924776…… 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候Western Blot做起来...
@甘刻4294：Abbkine抗体质量如何? -
计寇17763924776…… 内参抗体(Internal Control Antibody)是对内参蛋白进行检测,以校正蛋白定量过程中的实验误差以及验证转膜、显色等步骤是否正常!常用的内参包含 GAPDH、β-actin和 β-tubulin;及线粒体内参 COX IV和核内参 Histone H3和 PCNA等 内参...
@甘刻4294：求助选择什么作为内参 -
计寇17763924776…… 搞不太清楚你想说什么.内参抗体一般选择 β-actin,GAPDH.hsp90也OK.一般内参抗体都是鼠源的埃既然一抗是鼠源,二抗是接HRP的羊抗鼠就很好理解埃
@甘刻4294：GADPH是什么 -
计寇17763924776…… GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa.GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参.因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者...
@甘刻4294：实时荧光定量PCR的内参选择 -
计寇17763924776…… 现在大多数实验室定量检测BCR-ABL1时都是采用ABL1做内参,这时候理论上讲本来实验室直接的数据应该有可比性的.
@甘刻4294：α - 珠蛋白可以做内参吗 -
计寇17763924776…… α-平滑肌肌动蛋白是23kD.1、如果是提取的总蛋白,然后2113做WB,用β-actin或者GAPDH做内参肯定是没有问题的,这是公5261认的东西.2、如果用膜蛋白提取试剂盒提取蛋白,再用β-actin作为内参似乎不妥,因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的.WB能做出β-actin来是因为膜4102蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了.然而,如果我们试验目的是用药物处理1653细胞,比较处理前后某种膜蛋专白的表达情况,此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做内参似乎就不妥了,因为你根本不知道药物处理前后混属杂了多少的胞质蛋白进来.如果没有胞质蛋白混进去的话,β-actin就是检测不到的.
计寇17763924776…… 建立茶树α-tubulin基因实时荧光定量RT-PCR方法.方法:根据GenBank中茶树α-tubulin基因保守区域设计一对特异性引物,将PCR扩增得到的α-tubulin基因克隆到pTG19-T载体上,构建的重组质粒标准品经1/10梯度稀释后,用SYBR GreenⅠ染料法绘制标准曲线,并进行融解曲线分析.结果:标准曲线Ct值检测范围为14.56~27.09,相关系数为0.991,溶解曲线分析显示产物为特异的单峰,其Tm值为81±0.3℃.结论:建立了茶树α-tu bulin基因实时荧光定量RT-PCR法,为以α-tubulin作为茶树内参基因进行功能基因表达差异研究奠定了基础.
@甘刻4294：一抗内参tubulin是a还是b -
计寇17763924776…… 微管蛋白 组成微管的蛋白质称为微管蛋白.微管蛋白是球形分子,有两种类型:α微管蛋白(α-tubulin)和β微管蛋白(β-tubulin),这两种微管蛋白具有相似的三维结构,能够紧密地结合成二聚体,作为微管组装的亚基.α亚基由450个氨基酸组成,...
@甘刻4294：14 - 3 - 3蛋白western选用什么内参 -
计寇17763924776…… 要检测蛋白分子量是在28~33kD之间?那内参可以选用a-tubulin(56kD)或者β-actin(42kD)GAPDH(36kD)可能稍微小了的
@甘刻4294：tubulin是什么蛋白 -
计寇17763924776…… 微管蛋白 组成微管的蛋白质称为微管蛋白.微管蛋白是球形分子, 有两种类型:α微管蛋白(α-tubulin)和改侍伏β微管蛋白(β-tubulin), 这两种微管蛋白具有相似的三维结构, 能够紧密地结合成二聚体, 作为微管组装的亚基.α亚基由450个...
@甘刻4294：western blot 的内参不一致,急求助 -
计寇17763924776…… 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候Western Blot做起来...
@甘刻4294：Abbkine抗体质量如何? -
计寇17763924776…… 内参抗体(Internal Control Antibody)是对内参蛋白进行检测,以校正蛋白定量过程中的实验误差以及验证转膜、显色等步骤是否正常!常用的内参包含 GAPDH、β-actin和 β-tubulin;及线粒体内参 COX IV和核内参 Histone H3和 PCNA等 内参...
@甘刻4294：求助选择什么作为内参 -
计寇17763924776…… 搞不太清楚你想说什么.内参抗体一般选择 β-actin,GAPDH.hsp90也OK.一般内参抗体都是鼠源的埃既然一抗是鼠源,二抗是接HRP的羊抗鼠就很好理解埃
@甘刻4294：GADPH是什么 -
计寇17763924776…… GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa.GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参.因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者...
@甘刻4294：实时荧光定量PCR的内参选择 -
计寇17763924776…… 现在大多数实验室定量检测BCR-ABL1时都是采用ABL1做内参,这时候理论上讲本来实验室直接的数据应该有可比性的.
@甘刻4294：α - 珠蛋白可以做内参吗 -
计寇17763924776…… α-平滑肌肌动蛋白是23kD.1、如果是提取的总蛋白,然后2113做WB,用β-actin或者GAPDH做内参肯定是没有问题的,这是公5261认的东西.2、如果用膜蛋白提取试剂盒提取蛋白,再用β-actin作为内参似乎不妥,因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的.WB能做出β-actin来是因为膜4102蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了.然而,如果我们试验目的是用药物处理1653细胞,比较处理前后某种膜蛋专白的表达情况,此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做内参似乎就不妥了,因为你根本不知道药物处理前后混属杂了多少的胞质蛋白进来.如果没有胞质蛋白混进去的话,β-actin就是检测不到的.
