gapdh和actin蛋白条带
@吕成601：我想做PCR内参选beta - actin还是GAPDH好 -
壤司13559228443…… 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD.一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上 另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参
@吕成601：以actin为内参,同种细胞不同处理,蛋白会产生变化吗 -
壤司13559228443…… 用内参照是为了评价你的各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致,通常使用一些看家蛋白,比如β-actin、GAPDH等等.这些蛋白在所有细胞中的表达量基本一致,所以用他们来作为你加样量的对照.这样western结果中你的目的蛋白经过处理后...
@吕成601：western blot 的内参不一致,急求助 -
壤司13559228443…… 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候Western Blot做起来...
@吕成601：Western Blot为什么必须要用内参 -
壤司13559228443…… 内参作为一个参考物选用一个表达量相对稳定的蛋白,如actin,GAPDH等.不同方法处理细胞时内参的表达量不变,目的蛋白有可能会有变化.western中各泳道的内参的条带一样,那说明蛋白浓度一样.总蛋白浓度一样,目的蛋白条带宽度差异才能体现出目的蛋白表达量的差别.
@吕成601：GADPH是什么 -
壤司13559228443…… GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa.GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参.因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者...
@吕成601：beta Tubulin Antibody 的亚型beta I ,beta II ,beta III Tubulin Antibody 有什么不同? -
壤司13559228443…… Actin即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白.同时Actin在细胞分泌、吞噬、移动、胞质流动和胞质分离等过程中起重要作用.Actin在不同物种之间高度保守,以至于很难获得较好的针对actin的抗血清.Actin大致可分为六种,其中四种是不同...
@吕成601：RT - PCR中内参蛋白GAPDH和b - actin人和小鼠的可以用同一对引物吗 -
壤司13559228443…… 要看你设计的时候,是不是设计在小鼠和人的同源序列上了,是的话,就可以通用.
@吕成601：请帮忙解释一下,PCR,RT - PCR,GAPDH.real time之间的联系. -
壤司13559228443…… 看来是做RT-PCR的, PCR是聚合酶链式反应,也就是体外特异性扩增DNA片段,是所有PCR技术的基础; RT-PCR有2种理解,即反转录RCR(reverse transcription PCR,以RNA为模板扩增DNA)或实时PCR(real time PCR),很显然,您指的...
@吕成601：看家基因GApDHmRNA引物是什么东西?有什么用?成分 -
壤司13559228443…… 有,GAPDH是三磷酸甘油醛脱氢酶,是糖酵解途径中的关键酶.糖酵解途径就是将葡萄糖转化为ATP的过程,负责为生物体提供能量,几乎所有的生物都有该途径.因此GAPDH常常被用来作为内参基因,另外还有β-actin、Ubqutin等由于其广泛存在,也可作为内参基因.
壤司13559228443…… 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD.一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上 另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参
@吕成601：以actin为内参,同种细胞不同处理,蛋白会产生变化吗 -
壤司13559228443…… 用内参照是为了评价你的各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致,通常使用一些看家蛋白,比如β-actin、GAPDH等等.这些蛋白在所有细胞中的表达量基本一致,所以用他们来作为你加样量的对照.这样western结果中你的目的蛋白经过处理后...
@吕成601：western blot 的内参不一致,急求助 -
壤司13559228443…… 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候Western Blot做起来...
@吕成601：Western Blot为什么必须要用内参 -
壤司13559228443…… 内参作为一个参考物选用一个表达量相对稳定的蛋白,如actin,GAPDH等.不同方法处理细胞时内参的表达量不变,目的蛋白有可能会有变化.western中各泳道的内参的条带一样,那说明蛋白浓度一样.总蛋白浓度一样,目的蛋白条带宽度差异才能体现出目的蛋白表达量的差别.
@吕成601：GADPH是什么 -
壤司13559228443…… GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa.GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参.因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者...
@吕成601：beta Tubulin Antibody 的亚型beta I ,beta II ,beta III Tubulin Antibody 有什么不同? -
壤司13559228443…… Actin即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白.同时Actin在细胞分泌、吞噬、移动、胞质流动和胞质分离等过程中起重要作用.Actin在不同物种之间高度保守,以至于很难获得较好的针对actin的抗血清.Actin大致可分为六种,其中四种是不同...
@吕成601：RT - PCR中内参蛋白GAPDH和b - actin人和小鼠的可以用同一对引物吗 -
壤司13559228443…… 要看你设计的时候,是不是设计在小鼠和人的同源序列上了,是的话,就可以通用.
@吕成601：请帮忙解释一下,PCR,RT - PCR,GAPDH.real time之间的联系. -
壤司13559228443…… 看来是做RT-PCR的, PCR是聚合酶链式反应,也就是体外特异性扩增DNA片段,是所有PCR技术的基础; RT-PCR有2种理解,即反转录RCR(reverse transcription PCR,以RNA为模板扩增DNA)或实时PCR(real time PCR),很显然,您指的...
@吕成601：看家基因GApDHmRNA引物是什么东西?有什么用?成分 -
壤司13559228443…… 有,GAPDH是三磷酸甘油醛脱氢酶,是糖酵解途径中的关键酶.糖酵解途径就是将葡萄糖转化为ATP的过程,负责为生物体提供能量,几乎所有的生物都有该途径.因此GAPDH常常被用来作为内参基因,另外还有β-actin、Ubqutin等由于其广泛存在,也可作为内参基因.
