pcr中的内参是干什么用的
@连苏1413：什么是内参,内参的作用是什么?如果pcr检测中内参曲线未起该如何?
章雅13351641386…… 您好,内参就是取在一般细胞当中表达量较为稳定的基因,你的目的基因要与其进行比较.因为你每次的样品不一定一样,所以必须要有内参进行校正.要是内参没有起峰,那这个数据基本没用.
@连苏1413：什么是内参基因?常用内参基因有哪些? - 作业帮
章雅13351641386…… [答案] 这个概念一般是用在定量PCR中.定量PCR是要检测某个基因的表达,降低或者提高,但是当你得出结果以后,你并不知道是它本身的表达降低/提高了,还是你操作过程中造成的误差(比如提RNA时的损失),所以这个时候需要同时检测另外的基因...
@连苏1413：做RT - PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊? -
章雅13351641386…… 内参的选择:普通PCR内参的大小没有多大要求,但real time一般选择300bp以下 它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时,加入的浓度可能会不一致,即使用分光广度计测其浓度,也会有仪器误差.PCR时,每个标本都要做对应的内参,...
@连苏1413：qRT - PCR中内参是什么?
章雅13351641386…… 内参基因也称为管家基因.理论上,其表达一直都很恒定,很少受外界影响.这种基因的表达也称之为组成性表达.
@连苏1413：做RT - PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 - 作业帮
章雅13351641386…… [答案] 你说的应该是real time PCR吧,注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写,和real time一定要分开来. 常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时(real time)的方法,测定样品中某个模版的起始量ct值 但是呢,由于之前RNA提取、反转等步骤,...
@连苏1413：请问PCR电泳分析是内参和marker有什么区别么,前者和后者的作用区别在哪儿呢,谢谢 -
章雅13351641386…… 不太一样.内参是相对定量用的,marker是定大小的. 内参一般是RT-PCR用的,当底物是cDNA文库这种混合物时,除了扩增目的片段,往往还要扩增一个内参.内参一般选择细胞内的管家基因,表达量不会随着细胞状态而变化的,如U6,GAPDH等.由于PCR定量结果受底物影响较大,枪不准或者操作不当带来的很大误差,所以用目的片段的定量结果除以内参的定量结果,就能得到一个相对准确的比值,即相对定量. marker一般是用在普通pcr之后的跑电泳过程中.marker是一系列确定大小的DNA片段,跑出一个ladder,然后你的扩增片段与ladder比较,就可以知道片段的大概长度,然后判断是不是你要的片段,还是杂带.
@连苏1413：pcr中阴参,阳参的作用 -
章雅13351641386…… 阴参是监控核酸提取和PCR加样,扩增,是否有阳性样本的交叉污染.阳参是监控PCR试剂是否失效,以及作为标准品作定量功能的.阳性内参就是一定会P出来条带,阴性内参就是一定不会P出来条带.阳性没结果一般是实验体系、实验参数不对,阴性有结果一般是有污染.
@连苏1413：请问“内参”是什么呀?我是指生物学里的“内参” -
章雅13351641386…… 做定量PCR中用到的 是一段表达量比较稳定的基因 一般作为对照 就是说您在做RT-PCR事 为了去除不同标准本再RNA得产量,质量,以及逆转录效率上可能纯在的差别而获得目标基因特异性表达的真正差异,通常选择内参来进行校正和标准化.内参基因的扩增可以反映RNA产量,质量和CDNA合成效率的变化.
@连苏1413：qRT - PCR中内参是什么?一个内参够不够 -
章雅13351641386…… 有些内参在某些细胞株中有比较大的变化,所以你要查文献,看别人在做这些细胞的时候,用的是什么内参.
@连苏1413：pcr实验中类参,阴参,阳参的的作用
章雅13351641386…… 应该是内参,阴参,阳参吧? 内参是监控核酸提取是否成功,PCR扩增是否受到不明物质干扰,抑制 阴参是监控核酸提取和PCR加样,扩增,是否有阳性样本的交叉污染 阳参是监控PCR试剂是否失效,以及作为标准品作定量功能的
章雅13351641386…… 您好,内参就是取在一般细胞当中表达量较为稳定的基因,你的目的基因要与其进行比较.因为你每次的样品不一定一样,所以必须要有内参进行校正.要是内参没有起峰,那这个数据基本没用.
@连苏1413：什么是内参基因?常用内参基因有哪些? - 作业帮
章雅13351641386…… [答案] 这个概念一般是用在定量PCR中.定量PCR是要检测某个基因的表达,降低或者提高,但是当你得出结果以后,你并不知道是它本身的表达降低/提高了,还是你操作过程中造成的误差(比如提RNA时的损失),所以这个时候需要同时检测另外的基因...
@连苏1413：做RT - PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊? -
章雅13351641386…… 内参的选择:普通PCR内参的大小没有多大要求,但real time一般选择300bp以下 它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时,加入的浓度可能会不一致,即使用分光广度计测其浓度,也会有仪器误差.PCR时,每个标本都要做对应的内参,...
@连苏1413：qRT - PCR中内参是什么?
章雅13351641386…… 内参基因也称为管家基因.理论上,其表达一直都很恒定,很少受外界影响.这种基因的表达也称之为组成性表达.
@连苏1413：做RT - PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 - 作业帮
章雅13351641386…… [答案] 你说的应该是real time PCR吧,注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写,和real time一定要分开来. 常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时(real time)的方法,测定样品中某个模版的起始量ct值 但是呢,由于之前RNA提取、反转等步骤,...
@连苏1413：请问PCR电泳分析是内参和marker有什么区别么,前者和后者的作用区别在哪儿呢,谢谢 -
章雅13351641386…… 不太一样.内参是相对定量用的,marker是定大小的. 内参一般是RT-PCR用的,当底物是cDNA文库这种混合物时,除了扩增目的片段,往往还要扩增一个内参.内参一般选择细胞内的管家基因,表达量不会随着细胞状态而变化的,如U6,GAPDH等.由于PCR定量结果受底物影响较大,枪不准或者操作不当带来的很大误差,所以用目的片段的定量结果除以内参的定量结果,就能得到一个相对准确的比值,即相对定量. marker一般是用在普通pcr之后的跑电泳过程中.marker是一系列确定大小的DNA片段,跑出一个ladder,然后你的扩增片段与ladder比较,就可以知道片段的大概长度,然后判断是不是你要的片段,还是杂带.
@连苏1413：pcr中阴参,阳参的作用 -
章雅13351641386…… 阴参是监控核酸提取和PCR加样,扩增,是否有阳性样本的交叉污染.阳参是监控PCR试剂是否失效,以及作为标准品作定量功能的.阳性内参就是一定会P出来条带,阴性内参就是一定不会P出来条带.阳性没结果一般是实验体系、实验参数不对,阴性有结果一般是有污染.
@连苏1413：请问“内参”是什么呀?我是指生物学里的“内参” -
章雅13351641386…… 做定量PCR中用到的 是一段表达量比较稳定的基因 一般作为对照 就是说您在做RT-PCR事 为了去除不同标准本再RNA得产量,质量,以及逆转录效率上可能纯在的差别而获得目标基因特异性表达的真正差异,通常选择内参来进行校正和标准化.内参基因的扩增可以反映RNA产量,质量和CDNA合成效率的变化.
@连苏1413：qRT - PCR中内参是什么?一个内参够不够 -
章雅13351641386…… 有些内参在某些细胞株中有比较大的变化,所以你要查文献,看别人在做这些细胞的时候,用的是什么内参.
@连苏1413：pcr实验中类参,阴参,阳参的的作用
章雅13351641386…… 应该是内参,阴参,阳参吧? 内参是监控核酸提取是否成功,PCR扩增是否受到不明物质干扰,抑制 阴参是监控核酸提取和PCR加样,扩增,是否有阳性样本的交叉污染 阳参是监控PCR试剂是否失效,以及作为标准品作定量功能的
