western+blot的marker
@夔房214：western blot 的marker是怎么定的 -
文钟13565033926…… 电泳后会显示一个条带,这个散开的条带可以: 1 在SDS-PAGE中监测蛋白的迁移; 2 确认转膜效率; 3 根据marker的条带估计分子量; 4 确定目的蛋白位置.
@夔房214：什么是Westernblot? -
文钟13565033926…… Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测. 一、原理 与Southern或Northern杂交方法类似,但...
@夔房214：western blot的实验原理(详细的) -
文钟13565033926…… Western Blot与Southern印迹杂交或Northern印迹杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗. 经过PAGE分离的蛋白质样品(跑PAGE 胶的原理你懂吧~~~),转移到固相载体(硝酸纤维素膜NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变(这个过程就是转膜). 以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分.该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达.
@夔房214：请教western blot转膜的原理 -
文钟13565033926…… 原理: 1. 电场力作用条件下,带电粒子(PAGE胶中的蛋白)会发生定向迁移; 2. 蛋白大小如果超过膜孔径(0.22μm or 0.45μm),不会透过膜; 3. WB用的膜具有蛋白吸附作用;
@夔房214：western blot 步骤是什么? -
文钟13565033926…… 简单的说的话,可以大致分为8点:1. 收集蛋白样品2. 电泳3.转膜4.封闭5.一抗孵育 6.二抗孵育7.蛋白检测8.膜的重复利用,希望可以帮到你哦,你可以到网上找找啊
@夔房214：做western blot 的时候怎样选择抗体浓度? -
文钟13565033926…… 这个需要自己摸索,每个公司和每个蛋白都不一样,我的做法,先从1:500开始,如果在其他条件都没问题得情况下(比如上样量、二抗背景),如果荧光很强,你可以稀释,如果条带淡或者白板,那么你就得增加,比如1:100.一般CST1:500就可以了.Abcam的我用到1:100
@夔房214：蛋白质印迹为什么叫western blot -
文钟13565033926…… 印迹法(blotting)是指将样品转移到固相载体上, 而后利用相应的探测反应来检测样品的一种方法. 1975年,Southern建立了将DNA转移到硝酸纤维素膜(NC膜)上, 并利用DNA-DNA杂交检测特定的DNA片段的方法, 随后人们用这位发现...
@夔房214：mtt和western blot加药浓度是以细胞量计算吗 -
文钟13565033926…… mtt和western blot加药浓度是以细胞量计算 做western blot需要多少细胞并不是一个固定的值 这主要取决于蛋白的表达量,没有一个绝对的量 如果做细胞总蛋白的话,至少10的4次方细胞每微升蛋白裂解液.一般可以每泳道取10的5次方细胞每微...
@夔房214：蛋白质印迹法为什么叫Westernblot法? -
文钟13565033926…… 一开始的时候是叫Southern blot的,后来又出现了两个过程相似但对象不同的印迹方法,一个针对RNA,一个针对蛋白质,这两种技术分别被称为Northern和Western,才最终确定下来叫Westernblot法.通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息.(如:伯乐生命的印迹膜上总蛋白检测). 希望采纳
@夔房214：Western blot 与Western blotting一样吗一个小白的提问 -
文钟13565033926…… Western blot 与 Western blotting 是一样的 都是指蛋白质印迹法,具体怎么用好像也没有什么强制的要求,可以写成 Western blot 也可以写成Western blotting.简单一点写成 Western 也没有关系,或者缩写成 WB 也可以
文钟13565033926…… 电泳后会显示一个条带,这个散开的条带可以: 1 在SDS-PAGE中监测蛋白的迁移; 2 确认转膜效率; 3 根据marker的条带估计分子量; 4 确定目的蛋白位置.
@夔房214：什么是Westernblot? -
文钟13565033926…… Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测. 一、原理 与Southern或Northern杂交方法类似,但...
@夔房214：western blot的实验原理(详细的) -
文钟13565033926…… Western Blot与Southern印迹杂交或Northern印迹杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗. 经过PAGE分离的蛋白质样品(跑PAGE 胶的原理你懂吧~~~),转移到固相载体(硝酸纤维素膜NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变(这个过程就是转膜). 以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分.该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达.
@夔房214：请教western blot转膜的原理 -
文钟13565033926…… 原理: 1. 电场力作用条件下,带电粒子(PAGE胶中的蛋白)会发生定向迁移; 2. 蛋白大小如果超过膜孔径(0.22μm or 0.45μm),不会透过膜; 3. WB用的膜具有蛋白吸附作用;
@夔房214：western blot 步骤是什么? -
文钟13565033926…… 简单的说的话,可以大致分为8点:1. 收集蛋白样品2. 电泳3.转膜4.封闭5.一抗孵育 6.二抗孵育7.蛋白检测8.膜的重复利用,希望可以帮到你哦,你可以到网上找找啊
@夔房214：做western blot 的时候怎样选择抗体浓度? -
文钟13565033926…… 这个需要自己摸索,每个公司和每个蛋白都不一样,我的做法,先从1:500开始,如果在其他条件都没问题得情况下(比如上样量、二抗背景),如果荧光很强,你可以稀释,如果条带淡或者白板,那么你就得增加,比如1:100.一般CST1:500就可以了.Abcam的我用到1:100
@夔房214：蛋白质印迹为什么叫western blot -
文钟13565033926…… 印迹法(blotting)是指将样品转移到固相载体上, 而后利用相应的探测反应来检测样品的一种方法. 1975年,Southern建立了将DNA转移到硝酸纤维素膜(NC膜)上, 并利用DNA-DNA杂交检测特定的DNA片段的方法, 随后人们用这位发现...
@夔房214：mtt和western blot加药浓度是以细胞量计算吗 -
文钟13565033926…… mtt和western blot加药浓度是以细胞量计算 做western blot需要多少细胞并不是一个固定的值 这主要取决于蛋白的表达量,没有一个绝对的量 如果做细胞总蛋白的话,至少10的4次方细胞每微升蛋白裂解液.一般可以每泳道取10的5次方细胞每微...
@夔房214：蛋白质印迹法为什么叫Westernblot法? -
文钟13565033926…… 一开始的时候是叫Southern blot的,后来又出现了两个过程相似但对象不同的印迹方法,一个针对RNA,一个针对蛋白质,这两种技术分别被称为Northern和Western,才最终确定下来叫Westernblot法.通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息.(如:伯乐生命的印迹膜上总蛋白检测). 希望采纳
@夔房214：Western blot 与Western blotting一样吗一个小白的提问 -
文钟13565033926…… Western blot 与 Western blotting 是一样的 都是指蛋白质印迹法,具体怎么用好像也没有什么强制的要求,可以写成 Western blot 也可以写成Western blotting.简单一点写成 Western 也没有关系,或者缩写成 WB 也可以
