western+hemlock
@广朗5110：为什么有western的方法还要做PCR -
严寇13452975751…… 三组实验的实验目的不同.简单来说就是免疫组化既可以定位,也可以定量(半定量),而western主要是用来定量,这两个都是从蛋白水平上对目的物的检测.而pcr主要是从mRNA水平检测目的表达的量.
@广朗5110：如何用western来检测基因的磷酸化水平? -
严寇13452975751…… western一般是用来检测蛋白质的 蛋白质的磷酸化水平在western上可以通过分子量来区分 有时也可以用只识别磷酸化蛋白的抗体来区分
@广朗5110：做western上样前样品要混匀吗 -
严寇13452975751…… Western Blot Quick Guide(以及一天跑完Western的时间规划) 前期准备:蛋白已经定量,各样本已经稀释到某固定浓度,已经和SDS loading buffer混合,已经分装好,保存与-20°.头天下午或晚上配胶,分离胶和浓缩胶一起配好,带上梳子...
@广朗5110：western杂交出现分子量大于和小于预期蛋白的条带'原因是什么啊'? -
严寇13452975751…… 实际上来说,Western并不能对蛋白质的分子量进行测定,它只是利用一抗二抗显色的步骤从凝胶上定性找到某一蛋白质.所以分子量大小还是在于电泳的过程. 首先,从电泳的原理上讲,它通过带电基团在电场中的移动来测定分子量,蛋白质的构象(空间形态)对这个影响很大,球蛋白就会比线形蛋白显的分子量小.而且marker同样有这个问题. 另外,对于western来说,多数都是从生物体中(细胞裂解液)做全蛋白电泳,然后特异性检测某一蛋白的存在,正因如此,蛋白质的一级结构就显的很重要了,毕竟你的预期蛋白是唯一的,而生物表达的蛋白可能就会存在或多或少的差异,分子量自然也就不会完全匹配预期.
@广朗5110：细胞培养用二巯基乙醇和western用二巯基乙醇的区别 -
严寇13452975751…… 最主要的作用:抗氧化.巯基乙醇能够提供还原力,保护二硫键,从而使蛋白质不被氧化掉而失活. 此外在骨髓间充质干细胞向神经细胞诱导培养时使用2-巯基乙醇可以进行预诱导.
@广朗5110：做Western时如何判断蛋白是否降解? -
严寇13452975751…… 恩..如果蛋白样品比较多...可以将电泳后的胶用考马斯亮蓝染色观察染色后胶上的条带形状以判断蛋白降解情况.如果蛋白样品比较稀少也可以经电泳、转膜后将胶进行考马斯亮蓝染...
@广朗5110：the western chamber和hamlet是什么意思? -
严寇13452975751…… 简单来说是 西方小房子 和 哈姆雷特~~
@广朗5110：Western+用汉语怎么读
严寇13452975751…… western [ˈwestərn] 汉语读做 为思藤adj. 西方的; 欧美的; n. 西方人; 西部电影,西部小说; [例句]Mexico had the support of the big western governments墨西哥拥有西方大国的支持.
@广朗5110：western的图和SDS - PAGE图有什么区别 -
严寇13452975751…… SDS-PAGE 的图是依据蛋白质分子量的大小进行区分的蛋白质电泳结果,图中自上而下依据蛋白分子量大小分布着不同大小的蛋白分子条带(但如果是特殊情况,如:纯化后的蛋白,就可能只...
@广朗5110：western什么时候小写,是不是一般都大写?还有be engaged with 与be occupied in有什么区别? -
严寇13452975751…… 通常而言,指南针上的方位(如north, southeast等)和形容词(如western, central, upper, lower等)不需要大写.be engaged with sth.be occupied in doing sth/with sth.用法不同.
严寇13452975751…… 三组实验的实验目的不同.简单来说就是免疫组化既可以定位,也可以定量(半定量),而western主要是用来定量,这两个都是从蛋白水平上对目的物的检测.而pcr主要是从mRNA水平检测目的表达的量.
@广朗5110：如何用western来检测基因的磷酸化水平? -
严寇13452975751…… western一般是用来检测蛋白质的 蛋白质的磷酸化水平在western上可以通过分子量来区分 有时也可以用只识别磷酸化蛋白的抗体来区分
@广朗5110：做western上样前样品要混匀吗 -
严寇13452975751…… Western Blot Quick Guide(以及一天跑完Western的时间规划) 前期准备:蛋白已经定量,各样本已经稀释到某固定浓度,已经和SDS loading buffer混合,已经分装好,保存与-20°.头天下午或晚上配胶,分离胶和浓缩胶一起配好,带上梳子...
@广朗5110：western杂交出现分子量大于和小于预期蛋白的条带'原因是什么啊'? -
严寇13452975751…… 实际上来说,Western并不能对蛋白质的分子量进行测定,它只是利用一抗二抗显色的步骤从凝胶上定性找到某一蛋白质.所以分子量大小还是在于电泳的过程. 首先,从电泳的原理上讲,它通过带电基团在电场中的移动来测定分子量,蛋白质的构象(空间形态)对这个影响很大,球蛋白就会比线形蛋白显的分子量小.而且marker同样有这个问题. 另外,对于western来说,多数都是从生物体中(细胞裂解液)做全蛋白电泳,然后特异性检测某一蛋白的存在,正因如此,蛋白质的一级结构就显的很重要了,毕竟你的预期蛋白是唯一的,而生物表达的蛋白可能就会存在或多或少的差异,分子量自然也就不会完全匹配预期.
@广朗5110：细胞培养用二巯基乙醇和western用二巯基乙醇的区别 -
严寇13452975751…… 最主要的作用:抗氧化.巯基乙醇能够提供还原力,保护二硫键,从而使蛋白质不被氧化掉而失活. 此外在骨髓间充质干细胞向神经细胞诱导培养时使用2-巯基乙醇可以进行预诱导.
@广朗5110：做Western时如何判断蛋白是否降解? -
严寇13452975751…… 恩..如果蛋白样品比较多...可以将电泳后的胶用考马斯亮蓝染色观察染色后胶上的条带形状以判断蛋白降解情况.如果蛋白样品比较稀少也可以经电泳、转膜后将胶进行考马斯亮蓝染...
@广朗5110：the western chamber和hamlet是什么意思? -
严寇13452975751…… 简单来说是 西方小房子 和 哈姆雷特~~
@广朗5110：Western+用汉语怎么读
严寇13452975751…… western [ˈwestərn] 汉语读做 为思藤adj. 西方的; 欧美的; n. 西方人; 西部电影,西部小说; [例句]Mexico had the support of the big western governments墨西哥拥有西方大国的支持.
@广朗5110：western的图和SDS - PAGE图有什么区别 -
严寇13452975751…… SDS-PAGE 的图是依据蛋白质分子量的大小进行区分的蛋白质电泳结果,图中自上而下依据蛋白分子量大小分布着不同大小的蛋白分子条带(但如果是特殊情况,如:纯化后的蛋白,就可能只...
@广朗5110：western什么时候小写,是不是一般都大写?还有be engaged with 与be occupied in有什么区别? -
严寇13452975751…… 通常而言,指南针上的方位(如north, southeast等)和形容词(如western, central, upper, lower等)不需要大写.be engaged with sth.be occupied in doing sth/with sth.用法不同.
