引物与3端还是5端结合

@蒋杭1265:引物和模板链的哪一端结合 -
皮元15096448979…… 5'端和3'端结合.在PCR反应中,引物和模板链结合的方式是通过引物的两端与模板链的两端互补配对而实现的.引物在PCR反应开始时,会与模板链的两端分别形成互补配对,这样就可以在PCR扩增的过程中引导DNA的复制.引物的5'端和3'端都可以与模板链的两端进行互补配对,这取决于引物的设计和PCR反应的需求.

@蒋杭1265:引物是从5到3吗? -
皮元15096448979…… 下面是我对引物是从3到5还是从5到3的图解:引物是PCR反应中不可或缺的重要物质,而引物的方向性也是PCR反应成功隐培与否的关键.在PCR反应中,DNA模板的两端分别被引物所特异性地识别并结合,然后通过PCR循环扩增,最终得到...

@蒋杭1265:书上说PCR中引物与游离的碱基结合,游离怎么解释(引物从5′'端→3′ 端延)是不是DNA末端,如果是,怎么PCR产生长链和短链 - 作业帮
皮元15096448979…… [答案] 准确说是游离的核苷酸,游离的意思就是单独存在,没有和其他东西或者自身结合的意思 开始的时候以长链为模板时候能扩出长链,以产生的长链为模板延伸的时候就产生短链了

@蒋杭1265:什么是上、下游引物,什么是5'端引物和3'端引物? -
皮元15096448979…… 虽然这个问题很简单,但我怎么发觉挺难回答的......上游引物就是和要扩增基因片断上游序列结合的引物(引物就是单链寡聚核苷酸,基因扩增需要从引物开始),同理,下游引物指与目的基因片断下游序列结合者.具体示意如下:(上下两条...

@蒋杭1265:PCR中,"引物2是3'端与反义链互补的寡核苷酸"?
皮元15096448979…… 1.PCR复制方向是从新链的5'到3',模版的3'到5' 2.你把这句话的意思理解错误,他说的是反义链,因此还是引物与模版的3'端结合的,他说的意思是引物2的5'可以不完全配对,但是3'必须配对,这是PCR的一个基本性质,因此还是引物与模版的3'端结合的.建议你多看看图就明白了 3.DNA自然复制时的复制方向也是从新链的5'到3'

@蒋杭1265:mRNA反转录引物的问题? -
皮元15096448979…… 与3'端结合,因为新链的生成(不管是DNA复制、转录还是反转录)都是由5'端向3'端进行的,只有引物与模板的3'端结合,才能保证新链由5'端向3'端生成.

@蒋杭1265:DNA序列的PCR引物设计 -
皮元15096448979…… 1,PCR引物是利用碱基互补原则,通过找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列. 2,首先要找到你用来设计引物的目的基因全序列,一般NCBI、Genebank上都能找得到. 3,引物的长度一般为15-30 bp,常用的是18-27 ...

@蒋杭1265:pcr技术中是从子链的5端向3端延伸 引物的3端向5端延伸 那母链呢 - 作业帮
皮元15096448979…… [答案] lz的提问有问题,“引物的3向5延伸”,PCR中任何一条链的合成都是从5端向3端进行的. 解链时,母链变为两条DNA单链,上下游引物分别和两条单链结合,然后,从引物的3端开始,以从5端到3端的方向合成子链.

@蒋杭1265:PCR反应中是从引物的3'端开始合成新DNA链的.所以新合成的DNA链中,原来的引物在5'端,新加入的碱基在3'端.请问后面那句话什么意思 原引物是上... - 作业帮
皮元15096448979…… [答案] 哈,这句话我怎么看着这么眼熟呢.是我没说清楚.大概解释一下吧.引物是PCR前就加进去的.PCR反应就是从已经存在的引物3'端接着向后延伸.引物3'端和新合成DNA链的5'端是连在一起的.

@蒋杭1265:关于PCR引物与模板互补的问题. -
皮元15096448979…… 这个问题涉及两个方面:一、DNA的两条链的方向是相反的,一条是5'-3',互补链是3'-5';二、引物退火后,新合成链的方向是5'-3'.PCR用的酶有一个特性,只有在检测到上一个碱基配对完成后才能向下延伸,设计的引物5'端无论修饰与否,只要3'端的碱基能和DNA单链配对就能顺利进行延伸.PCR的引物不是要求完全互补,只要3'端能配对十几个碱基就能发生反应,而且在第一个循环完成后,由上游引物扩增出来的链会和下游引物结合,把你修饰的位点也进行了扩增. 希望对你有帮助.

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