雅酶+marker
@哈通4461：DNA限制酶切和琼脂糖凝胶电泳中常说的Marker是什么?还有Loading Dye 在实验中起到什么作用? - 作业帮
朱芬15884465567…… [答案] 1.marker是分子量标准 你要知道电泳时 分子量越小的跑得越快 这样的你的酶切产物电泳后形成的条带 就可以对照marker知道是多大分子量的了 2.loading dye 一般用溴酚蓝或二甲苯青 和混在上样缓冲液里 和 样品一起点到点样孔中,dye也会往前移...
@哈通4461：琼脂糖凝胶电泳检测dna怎么加marker -
朱芬15884465567…… 你的意思是DNA ladder Marker,还是DNA染色用的EB或gelgreen. 如果是前者的话,那么在点样时加到点样孔里就可以了; 如果是后者的话,那么在制胶时加也可以,在最后染色也可以. 对EB来说,制胶时加要等琼脂糖溶解以后,稍冷却再加;最后染色就不必多说了. 对gelgreen来说,好像只有制胶时加一种方式,方法同上.
@哈通4461：PCR扩增的试验中MARK指的是什么 -
朱芬15884465567…… 标记(Marker),染色体上一个可以被识别的区域(比如限制性内切酶的酶切点,基因的位置等).标记的遗传能够被检测出来.标记可以是染色体上有表达功能的部分(比如基因),也可以是没有编码蛋白质功能但遗传特性能够被检测出来的部分.
@哈通4461：双酶切时如何根据marker估算dna分子量 -
朱芬15884465567…… 先确定你所购买maker是否有说明书,如果有就参考说明书就能查到自上到下的分子量是多少;如果没有就根据你购买的maker的公司和型号,上公司网上查他条带对应的分子量.知道分子量后,你就根据条带所对应的maker的位置,就可以确定目的条带的分子量的区间.
@哈通4461：怎样计算电泳中蛋白分子量 -
朱芬15884465567…… 1.首先要选择一款未经过染色的蛋白Marker,和你所要确定分子量大小的蛋白一起电泳. 2.在电泳过程中尽量选择靠中间的泳道,避免边缘效应引起条带歪斜,没有样的孔用loading填满. 3.电泳结束后,考马斯亮蓝染色. 4.如果有凝胶成像系统,可以直接先拍照,然后用系统带的软件,根据Marker每一个条带的位置,分析目标蛋白分子量. 5.如果没有这种系统,就只能用土一点的办法,量每一个Marker条带相对于加样孔的迁移量,对应每个条带的分子量做标准曲线(excel可以),通过标准曲线得到的方程和目标蛋白的迁移率计算目标蛋白的分子量大小就可以了.
@哈通4461：做蛋白质免疫印迹时一抗和marker怎么选择? -
朱芬15884465567…… 一抗要针对你的目的蛋白选择特异性很强的相应抗体就可以了的,一般选择抗体说明书上说专门针对WB使用的抗体,而且一般应选择效价较高的抗体. 而MARKER则要取决于你的目的蛋白的分子大小了,选择相应的marker,marker最好要能比较容易的区分条带是否为目的蛋白,即在目的蛋白这一分子大小附近最好是能区分度较大,相应的分子大小的梯度要便于区分.
@哈通4461：有些文章中WB结果中有Marker,是怎么做到的 -
朱芬15884465567…… 可能可以通过下面几个方法实现(仅供参考): 1. 使用预染 Marker,不过分子量不是特别准; 2. 所使用的 Marker 条带与待测蛋白质带有相同的抗原表位,比如都带有 His 融合标签; 3. 可以使用普通的 Marker 转膜使用 丽春红 等染色,然后在膜上标记出 Marker 各条带的位置.
@哈通4461：用什么分子marker来标记细胞凋亡 -
朱芬15884465567…… 从文字上说,标记(Marker),染色体上一个可以被识别的区域(比如限制性内切酶的酶切点,基因的位置等).标记的遗传能够被检测出来.标记可以是染色体上有表达功能的部分(比如基因),也可以是没有编码蛋白质功能但遗传特性能够...
@哈通4461：什么叫 预染蛋白marker
朱芬15884465567…… 预染蛋白marker为一些纯化好的蛋白的混合物.这些蛋白混合物与一种蓝色染料共价偶联.可在凝胶电泳时出现强度均匀的8条带.同未预染的蛋白marker相比,预染蛋白marker因与染料共价偶联而在SDS-PAGE电泳时的迁移特性发生某些改变.
@哈通4461：检测提取的基因组dna和扩增的pcr产物时为什么要加dna marker -
朱芬15884465567…… DNA maker是一种分子量已知的几种片段的混合物,在电泳时可以标定目标片段的分子量大小.常用于PCR产物的标记,当出现一条带并且大小与预期一致时可认为片段正确,反之,当大小不一致或者有多条片段时,需优化PCR条件.当DNA maker用于标定基因组DNA时常用于原核生物基因组或质粒等单一组分的分子量预测
朱芬15884465567…… [答案] 1.marker是分子量标准 你要知道电泳时 分子量越小的跑得越快 这样的你的酶切产物电泳后形成的条带 就可以对照marker知道是多大分子量的了 2.loading dye 一般用溴酚蓝或二甲苯青 和混在上样缓冲液里 和 样品一起点到点样孔中,dye也会往前移...
@哈通4461：琼脂糖凝胶电泳检测dna怎么加marker -
朱芬15884465567…… 你的意思是DNA ladder Marker,还是DNA染色用的EB或gelgreen. 如果是前者的话,那么在点样时加到点样孔里就可以了; 如果是后者的话,那么在制胶时加也可以,在最后染色也可以. 对EB来说,制胶时加要等琼脂糖溶解以后,稍冷却再加;最后染色就不必多说了. 对gelgreen来说,好像只有制胶时加一种方式,方法同上.
@哈通4461：PCR扩增的试验中MARK指的是什么 -
朱芬15884465567…… 标记(Marker),染色体上一个可以被识别的区域(比如限制性内切酶的酶切点,基因的位置等).标记的遗传能够被检测出来.标记可以是染色体上有表达功能的部分(比如基因),也可以是没有编码蛋白质功能但遗传特性能够被检测出来的部分.
@哈通4461：双酶切时如何根据marker估算dna分子量 -
朱芬15884465567…… 先确定你所购买maker是否有说明书,如果有就参考说明书就能查到自上到下的分子量是多少;如果没有就根据你购买的maker的公司和型号,上公司网上查他条带对应的分子量.知道分子量后,你就根据条带所对应的maker的位置,就可以确定目的条带的分子量的区间.
@哈通4461：怎样计算电泳中蛋白分子量 -
朱芬15884465567…… 1.首先要选择一款未经过染色的蛋白Marker,和你所要确定分子量大小的蛋白一起电泳. 2.在电泳过程中尽量选择靠中间的泳道,避免边缘效应引起条带歪斜,没有样的孔用loading填满. 3.电泳结束后,考马斯亮蓝染色. 4.如果有凝胶成像系统,可以直接先拍照,然后用系统带的软件,根据Marker每一个条带的位置,分析目标蛋白分子量. 5.如果没有这种系统,就只能用土一点的办法,量每一个Marker条带相对于加样孔的迁移量,对应每个条带的分子量做标准曲线(excel可以),通过标准曲线得到的方程和目标蛋白的迁移率计算目标蛋白的分子量大小就可以了.
@哈通4461：做蛋白质免疫印迹时一抗和marker怎么选择? -
朱芬15884465567…… 一抗要针对你的目的蛋白选择特异性很强的相应抗体就可以了的,一般选择抗体说明书上说专门针对WB使用的抗体,而且一般应选择效价较高的抗体. 而MARKER则要取决于你的目的蛋白的分子大小了,选择相应的marker,marker最好要能比较容易的区分条带是否为目的蛋白,即在目的蛋白这一分子大小附近最好是能区分度较大,相应的分子大小的梯度要便于区分.
@哈通4461：有些文章中WB结果中有Marker,是怎么做到的 -
朱芬15884465567…… 可能可以通过下面几个方法实现(仅供参考): 1. 使用预染 Marker,不过分子量不是特别准; 2. 所使用的 Marker 条带与待测蛋白质带有相同的抗原表位,比如都带有 His 融合标签; 3. 可以使用普通的 Marker 转膜使用 丽春红 等染色,然后在膜上标记出 Marker 各条带的位置.
@哈通4461：用什么分子marker来标记细胞凋亡 -
朱芬15884465567…… 从文字上说,标记(Marker),染色体上一个可以被识别的区域(比如限制性内切酶的酶切点,基因的位置等).标记的遗传能够被检测出来.标记可以是染色体上有表达功能的部分(比如基因),也可以是没有编码蛋白质功能但遗传特性能够...
@哈通4461：什么叫 预染蛋白marker
朱芬15884465567…… 预染蛋白marker为一些纯化好的蛋白的混合物.这些蛋白混合物与一种蓝色染料共价偶联.可在凝胶电泳时出现强度均匀的8条带.同未预染的蛋白marker相比,预染蛋白marker因与染料共价偶联而在SDS-PAGE电泳时的迁移特性发生某些改变.
@哈通4461：检测提取的基因组dna和扩增的pcr产物时为什么要加dna marker -
朱芬15884465567…… DNA maker是一种分子量已知的几种片段的混合物,在电泳时可以标定目标片段的分子量大小.常用于PCR产物的标记,当出现一条带并且大小与预期一致时可认为片段正确,反之,当大小不一致或者有多条片段时,需优化PCR条件.当DNA maker用于标定基因组DNA时常用于原核生物基因组或质粒等单一组分的分子量预测
