180蛋白marker条带
@亓钟863：为什么我跑western蛋白marker最上面180kd和130kd的条带会消失 -
松易15551536957…… 条带弥散~这个marker原先跑没问题么~也可能是分离胶的问题~
@亓钟863：蛋白marker分子量都是10 - 180的绿色条带为什么有高有低
松易15551536957…… 标记你看到的效果,如果比较明显的标记跑了出来,这意味着坏蛋白提取,或者根本就没有提取的蛋白质!如果你标记的效果并不好,可能是因为你胶制备过程中的一个问题!
@亓钟863：什么叫 预染蛋白marker -
松易15551536957…… 预染蛋白marker为一些纯化好的蛋白的混合物.这些蛋白混合物与一种蓝色染料共价偶联.可在凝胶电泳时出现强度均匀的8条带.同未预染的蛋白marker相比,预染蛋白marker因与染料共价偶联而在SDS-PAGE电泳时的迁移特性发生某些改变.
@亓钟863：mark含什么蛋白质 -
松易15551536957…… 常用的蛋白marker从117KD到17KD,不同的条带是由不同大小的蛋白组成的.一般pre-stained的marker有这样的组成 蛋白质 来源 分子量计算 MW (Da) MBP-b-牛乳糖1 E. coli 175,000 MBP-副肌球蛋白1 E. coli 83,000 谷氨酸脱氢酶 牛肝 62,000 醛缩酶 兔子肌肉 32,500 b-乳球蛋白 A 牛奶 25,000 溶解酵素 鸡蛋白 16,500 抑肽酶 牛肺 6,5001MBP = 麦芽糖结合蛋白, MBP-b-牛乳糖 = MBP 和b-牛乳糖的融合蛋白, MBP-副肌球蛋白 = MBP 和副肌球蛋白的融合蛋白.
@亓钟863：琼脂糖凝胶电泳marker的作用 -
松易15551536957…… 你好,琼脂糖凝胶电泳marker是用来做参考的,类似于标尺的作用.marker会跑出很多条带,对应带的片段长度是一定的(不同的marker,不同,可以查询);通过找到与样品平齐的带,可以间接地判定样品的片段长度.这是我个人的理解,不知道描述清楚了没.
@亓钟863：western blot里面的marker是什么物质 -
松易15551536957…… 大小已知的蛋白的混合物,一般是预染的.胶上直接能看到蛋白条带.目的蛋白和marker对比就能知道目的蛋白的大小.
@亓钟863：电泳maker条带依次大小都是多少啊 -
松易15551536957…… 什么marker啊,是DNA的电泳marker还是蛋白电泳的marker呢?常用的DNA电泳marker:DL2000 plus的条带大小依次为5000、3000、2000、1000、750、500、250、100bp共8条带.DL2000的就是少了5000的那条,一共7条带.如果要是D1...
@亓钟863：做蛋白质免疫印迹时一抗和marker怎么选择? -
松易15551536957…… 一抗要针对你的目的蛋白选择特异性很强的相应抗体就可以了的,一般选择抗体说明书上说专门针对WB使用的抗体,而且一般应选择效价较高的抗体. 而MARKER则要取决于你的目的蛋白的分子大小了,选择相应的marker,marker最好要能比较容易的区分条带是否为目的蛋白,即在目的蛋白这一分子大小附近最好是能区分度较大,相应的分子大小的梯度要便于区分.
@亓钟863：western blot 的marker是怎么定的 -
松易15551536957…… 电泳后会显示一个条带,这个散开的条带可以: 1 在SDS-PAGE中监测蛋白的迁移; 2 确认转膜效率; 3 根据marker的条带估计分子量; 4 确定目的蛋白位置.
@亓钟863：怎样计算电泳中蛋白分子量 -
松易15551536957…… 1.首先要选择一款未经过染色的蛋白Marker,和你所要确定分子量大小的蛋白一起电泳. 2.在电泳过程中尽量选择靠中间的泳道,避免边缘效应引起条带歪斜,没有样的孔用loading填满. 3.电泳结束后,考马斯亮蓝染色. 4.如果有凝胶成像系统,可以直接先拍照,然后用系统带的软件,根据Marker每一个条带的位置,分析目标蛋白分子量. 5.如果没有这种系统,就只能用土一点的办法,量每一个Marker条带相对于加样孔的迁移量,对应每个条带的分子量做标准曲线(excel可以),通过标准曲线得到的方程和目标蛋白的迁移率计算目标蛋白的分子量大小就可以了.
松易15551536957…… 条带弥散~这个marker原先跑没问题么~也可能是分离胶的问题~
@亓钟863：蛋白marker分子量都是10 - 180的绿色条带为什么有高有低
松易15551536957…… 标记你看到的效果,如果比较明显的标记跑了出来,这意味着坏蛋白提取,或者根本就没有提取的蛋白质!如果你标记的效果并不好,可能是因为你胶制备过程中的一个问题!
@亓钟863：什么叫 预染蛋白marker -
松易15551536957…… 预染蛋白marker为一些纯化好的蛋白的混合物.这些蛋白混合物与一种蓝色染料共价偶联.可在凝胶电泳时出现强度均匀的8条带.同未预染的蛋白marker相比,预染蛋白marker因与染料共价偶联而在SDS-PAGE电泳时的迁移特性发生某些改变.
@亓钟863：mark含什么蛋白质 -
松易15551536957…… 常用的蛋白marker从117KD到17KD,不同的条带是由不同大小的蛋白组成的.一般pre-stained的marker有这样的组成 蛋白质 来源 分子量计算 MW (Da) MBP-b-牛乳糖1 E. coli 175,000 MBP-副肌球蛋白1 E. coli 83,000 谷氨酸脱氢酶 牛肝 62,000 醛缩酶 兔子肌肉 32,500 b-乳球蛋白 A 牛奶 25,000 溶解酵素 鸡蛋白 16,500 抑肽酶 牛肺 6,5001MBP = 麦芽糖结合蛋白, MBP-b-牛乳糖 = MBP 和b-牛乳糖的融合蛋白, MBP-副肌球蛋白 = MBP 和副肌球蛋白的融合蛋白.
@亓钟863：琼脂糖凝胶电泳marker的作用 -
松易15551536957…… 你好,琼脂糖凝胶电泳marker是用来做参考的,类似于标尺的作用.marker会跑出很多条带,对应带的片段长度是一定的(不同的marker,不同,可以查询);通过找到与样品平齐的带,可以间接地判定样品的片段长度.这是我个人的理解,不知道描述清楚了没.
@亓钟863：western blot里面的marker是什么物质 -
松易15551536957…… 大小已知的蛋白的混合物,一般是预染的.胶上直接能看到蛋白条带.目的蛋白和marker对比就能知道目的蛋白的大小.
@亓钟863：电泳maker条带依次大小都是多少啊 -
松易15551536957…… 什么marker啊,是DNA的电泳marker还是蛋白电泳的marker呢?常用的DNA电泳marker:DL2000 plus的条带大小依次为5000、3000、2000、1000、750、500、250、100bp共8条带.DL2000的就是少了5000的那条,一共7条带.如果要是D1...
@亓钟863：做蛋白质免疫印迹时一抗和marker怎么选择? -
松易15551536957…… 一抗要针对你的目的蛋白选择特异性很强的相应抗体就可以了的,一般选择抗体说明书上说专门针对WB使用的抗体,而且一般应选择效价较高的抗体. 而MARKER则要取决于你的目的蛋白的分子大小了,选择相应的marker,marker最好要能比较容易的区分条带是否为目的蛋白,即在目的蛋白这一分子大小附近最好是能区分度较大,相应的分子大小的梯度要便于区分.
@亓钟863：western blot 的marker是怎么定的 -
松易15551536957…… 电泳后会显示一个条带,这个散开的条带可以: 1 在SDS-PAGE中监测蛋白的迁移; 2 确认转膜效率; 3 根据marker的条带估计分子量; 4 确定目的蛋白位置.
@亓钟863：怎样计算电泳中蛋白分子量 -
松易15551536957…… 1.首先要选择一款未经过染色的蛋白Marker,和你所要确定分子量大小的蛋白一起电泳. 2.在电泳过程中尽量选择靠中间的泳道,避免边缘效应引起条带歪斜,没有样的孔用loading填满. 3.电泳结束后,考马斯亮蓝染色. 4.如果有凝胶成像系统,可以直接先拍照,然后用系统带的软件,根据Marker每一个条带的位置,分析目标蛋白分子量. 5.如果没有这种系统,就只能用土一点的办法,量每一个Marker条带相对于加样孔的迁移量,对应每个条带的分子量做标准曲线(excel可以),通过标准曲线得到的方程和目标蛋白的迁移率计算目标蛋白的分子量大小就可以了.
