26619蛋白marker条带

@郑青3271:预染蛋白marker26616有什么作用 -
姓生19865119390…… 非预染蛋白marker和预染蛋白marker有很多区别不过其中最重要和明显的区别就是非预染蛋白marker跑完胶之后一定要染色脱色才能在胶上看见预染蛋白marker跑完胶之后不需要染色脱色直接就可以在胶上看见 至于其他都是些细节上的区别,比如有些预染蛋白marker会做成彩虹色的,以便区别分子量大小有些预染蛋白marker的条带比较多等等

@郑青3271:sds - page电泳 -
姓生19865119390…… 可能有以下几个原因: 一:上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?) 二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的 三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是共轭双键的吸收波长,很多物质都会有吸收,如果做亲和层析时咪唑也有吸收,RNA在280下也有吸收,可能你测得的是RNA? 最后,想问问你的蛋白质Marker有没有显示条带?

@郑青3271:什么叫 预染蛋白marker -
姓生19865119390…… 预染蛋白marker为一些纯化好的蛋白的混合物.这些蛋白混合物与一种蓝色染料共价偶联.可在凝胶电泳时出现强度均匀的8条带.同未预染的蛋白marker相比,预染蛋白marker因与染料共价偶联而在SDS-PAGE电泳时的迁移特性发生某些改变.

@郑青3271:哪种预染低分子量蛋白Marker好 -
姓生19865119390…… 合适的就好.一般看Marker条带是否清晰锐利,是否均匀,纯化不够的Marker会成“团”而不利于判断大小.厚百holdbio上的彩色预染超低分子蛋白质分子量标准(AR1117),表观分子量范围1.7 - 40 kDa,颜色锐利稳定,不妨看看(百度一下holdbio).

@郑青3271:非预染蛋白MAKER和预染蛋白MARKER有什么区别 -
姓生19865119390…… 简单讲,就是非预染蛋白MAKER电泳时看不到条带,染色后才能看到,而预染蛋白MARKER会有特定的某些蛋白条带带有颜色,电泳过程中可以观察到,还有在WB过程中也起到转膜是否成功的指示作用

@郑青3271:做蛋白质免疫印迹时一抗和marker怎么选择? -
姓生19865119390…… 一抗要针对你的目的蛋白选择特异性很强的相应抗体就可以了的,一般选择抗体说明书上说专门针对WB使用的抗体,而且一般应选择效价较高的抗体. 而MARKER则要取决于你的目的蛋白的分子大小了,选择相应的marker,marker最好要能比较容易的区分条带是否为目的蛋白,即在目的蛋白这一分子大小附近最好是能区分度较大,相应的分子大小的梯度要便于区分.

@郑青3271:重组蛋白的检测 -
姓生19865119390…… 后者比较好,因为特异性强. SDS-PAGE是检测所有的蛋白,有可能你看见的一个条带不止一种蛋白(相同片段的多种蛋白).

@郑青3271:western blot 的marker是怎么定的 -
姓生19865119390…… 电泳后会显示一个条带,这个散开的条带可以: 1 在SDS-PAGE中监测蛋白的迁移; 2 确认转膜效率; 3 根据marker的条带估计分子量; 4 确定目的蛋白位置.

@郑青3271:蓝色预染分子量Marker、彩色预染蛋白质分子量标准品以及非预染区别 -
姓生19865119390…… 一般电泳,染色,看分子量,非预染就行.便宜 做Western用预染的,电泳后不用染色就能看到分子量分布,可以按照marker裁剪膜.彩色的更容易分辨,但比蓝色的稍贵一些.

@郑青3271:mark含什么蛋白质 -
姓生19865119390…… 常用的蛋白marker从117KD到17KD,不同的条带是由不同大小的蛋白组成的.一般pre-stained的marker有这样的组成 蛋白质 来源 分子量计算 MW (Da) MBP-b-牛乳糖1 E. coli 175,000 MBP-副肌球蛋白1 E. coli 83,000 谷氨酸脱氢酶 牛肝 62,000 醛缩酶 兔子肌肉 32,500 b-乳球蛋白 A 牛奶 25,000 溶解酵素 鸡蛋白 16,500 抑肽酶 牛肺 6,5001MBP = 麦芽糖结合蛋白, MBP-b-牛乳糖 = MBP 和b-牛乳糖的融合蛋白, MBP-副肌球蛋白 = MBP 和副肌球蛋白的融合蛋白.

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