10000bp+marker
@盛拜3495：电泳时marker是如何选择的?100bp DNA ladder是指什么?
麻畅19797814910…… DNA分子梯度:指从1-100bp的DNA标准片段,可作为marker.但是条带数可能还不一样,有的marker范围广,但是条带少,分辨率就低;有的marker分子量范围窄,但是条带多,分辨率就高 选择需要注意:1目的分子大小,如果你的目的分子在100bp以内,你可以选择100bp的marker 2当然如果你目的分子不止一条DNA,而且对分辨率要求高,那你就最好选择marker条带多的.
@盛拜3495：大质粒的大小(bp)通常如何检测 -
麻畅19797814910…… 一般检测质粒的方法就是酶切和通用引物测序了,如果一切都是未知还真挺不好办的...如果只是想知道片段大小的话,可以试试用一到两种常用限制酶酶切,然后根据片段大小估算...这个不是办法的办法...
@盛拜3495：实验室采购100bp Plus DNA Ladder Marker ?求推荐? -
麻畅19797814910…… 博凌科为的1kb Plus DNA Ladder Marker为已含有1*loading Buffer的DNA溶液,可取5μl直接电泳,使用方便.1kb Plus DNA Ladder Marker由DNA片段10000bp、8000bp、6000bp、5000bp、4000bp、3000bp、2000bp、1500bp、1000bp、...
@盛拜3495：我想麻烦问下,我想看一微升质粒有多少微克DNA,用电泳跑完了,不知道应该怎么估算,想请教一下,谢谢 -
麻畅19797814910…… 点5ulMARKer(其实最好用超螺旋Marker),1ul 质粒(松弛型,如果是严谨性质粒浓度比较低要多点几ul).电泳后比较条带亮度,如果和4kb条带一样亮则为100ng/ul, 如果和其他条带一样亮为50ng/ul
@盛拜3495：DNA marker跑不开的原因 -
麻畅19797814910…… 我的dl10000的marker前面较大的部分也跑不开,当然其原因好像是因为它太大,很难分,我用的1%的胶,但是换成0.7%的就完全模糊了,降电压长时间跑也适于不容易分的条带,但是由于我跑的是基因组dna,就降低了胶浓度,也很痛苦,为什么总是不漂亮
@盛拜3495：PCR扩增1000bp左右的产物反应体系和温度一般怎样设定? -
麻畅19797814910…… 反应体系要看你引物和模板的量、性状,一般反应总体积为25微升的话,引物各1微升,10*buffer 2.5微升即可,DNA聚合酶参照其说明书加量,一般0.3-0.5微升. 循环参数:94°变性30-45s足够,72°延伸也可设45s-1min,复性温度很关键,要看引物的特性(G+C%、是否容易形成发卡、二聚体等)和特异性(与模板DNA的同源性)等,一般在50°左右. 此外,要根据出带与否以及带的亮度、性状(sharp与否)不断调整退火温度和Mg的浓度.
@盛拜3495：...双酶切质粒pgl 6.24(5882bp)无共同buffer kPN I 2.5小时 bgl II 3.5小时 之后电泳 为什么出来1万多的带?跑的比原来质粒还有10000bp的marker还慢……怎么... - 作业帮
麻畅19797814910…… [答案] 很显然是质粒发生了自连啦.切开的2个质粒连起来了,因此相当于2个质粒的大小.你需采用磷酸化避免自连发生.
@盛拜3495：dna扩增时的marker怎么使用 -
麻畅19797814910…… 你说的是分子量DNA marker吧,主要是用来指示扩增产物片段的大小,用的比较多的是200bp DL,就是200bp到2000bp,共10个条带.你上样的时候单独加在样品旁边的孔里.
@盛拜3495：请告诉我100bp DNA Ladder Marker 选择谁家的好?
麻畅19797814910…… 当然是博凌科为的100bp DNA Ladder Marker 了,我们实验室一直在用呢,反应很好 使用注意: 1. 电泳时的加样孔宽度小于6mm时,每次取5μl 制品电泳便可得到清晰条带.如果加样孔增宽,须适当增加Marker制品的加样量.2. 对DNA电泳而...
@盛拜3495：可以用线性DNA Marker判断质粒片段大小吗 -
麻畅19797814910…… 第一,我的经验就是不要用线性的MARKER去判断质粒的大小,是灰常不准滴. 第二,你的电泳图中handIII的marker跑得有问题,条带根本对应不上,无论跟1道还是5道的marker比都有不小的误差. 第三,如果我的理解没有问题的话,1道的marker是一个质粒marker,从条带上来看除了比例貌似有些问题,大小方面问题倒是不大,可以作为你判断样品大小的对照. 第四,你的样品这两条带大小我判断应该是8k和5k左右. 顶锅盖,走人~
麻畅19797814910…… DNA分子梯度:指从1-100bp的DNA标准片段,可作为marker.但是条带数可能还不一样,有的marker范围广,但是条带少,分辨率就低;有的marker分子量范围窄,但是条带多,分辨率就高 选择需要注意:1目的分子大小,如果你的目的分子在100bp以内,你可以选择100bp的marker 2当然如果你目的分子不止一条DNA,而且对分辨率要求高,那你就最好选择marker条带多的.
@盛拜3495：大质粒的大小(bp)通常如何检测 -
麻畅19797814910…… 一般检测质粒的方法就是酶切和通用引物测序了,如果一切都是未知还真挺不好办的...如果只是想知道片段大小的话,可以试试用一到两种常用限制酶酶切,然后根据片段大小估算...这个不是办法的办法...
@盛拜3495：实验室采购100bp Plus DNA Ladder Marker ?求推荐? -
麻畅19797814910…… 博凌科为的1kb Plus DNA Ladder Marker为已含有1*loading Buffer的DNA溶液,可取5μl直接电泳,使用方便.1kb Plus DNA Ladder Marker由DNA片段10000bp、8000bp、6000bp、5000bp、4000bp、3000bp、2000bp、1500bp、1000bp、...
@盛拜3495：我想麻烦问下,我想看一微升质粒有多少微克DNA,用电泳跑完了,不知道应该怎么估算,想请教一下,谢谢 -
麻畅19797814910…… 点5ulMARKer(其实最好用超螺旋Marker),1ul 质粒(松弛型,如果是严谨性质粒浓度比较低要多点几ul).电泳后比较条带亮度,如果和4kb条带一样亮则为100ng/ul, 如果和其他条带一样亮为50ng/ul
@盛拜3495：DNA marker跑不开的原因 -
麻畅19797814910…… 我的dl10000的marker前面较大的部分也跑不开,当然其原因好像是因为它太大,很难分,我用的1%的胶,但是换成0.7%的就完全模糊了,降电压长时间跑也适于不容易分的条带,但是由于我跑的是基因组dna,就降低了胶浓度,也很痛苦,为什么总是不漂亮
@盛拜3495：PCR扩增1000bp左右的产物反应体系和温度一般怎样设定? -
麻畅19797814910…… 反应体系要看你引物和模板的量、性状,一般反应总体积为25微升的话,引物各1微升,10*buffer 2.5微升即可,DNA聚合酶参照其说明书加量,一般0.3-0.5微升. 循环参数:94°变性30-45s足够,72°延伸也可设45s-1min,复性温度很关键,要看引物的特性(G+C%、是否容易形成发卡、二聚体等)和特异性(与模板DNA的同源性)等,一般在50°左右. 此外,要根据出带与否以及带的亮度、性状(sharp与否)不断调整退火温度和Mg的浓度.
@盛拜3495：...双酶切质粒pgl 6.24(5882bp)无共同buffer kPN I 2.5小时 bgl II 3.5小时 之后电泳 为什么出来1万多的带?跑的比原来质粒还有10000bp的marker还慢……怎么... - 作业帮
麻畅19797814910…… [答案] 很显然是质粒发生了自连啦.切开的2个质粒连起来了,因此相当于2个质粒的大小.你需采用磷酸化避免自连发生.
@盛拜3495：dna扩增时的marker怎么使用 -
麻畅19797814910…… 你说的是分子量DNA marker吧,主要是用来指示扩增产物片段的大小,用的比较多的是200bp DL,就是200bp到2000bp,共10个条带.你上样的时候单独加在样品旁边的孔里.
@盛拜3495：请告诉我100bp DNA Ladder Marker 选择谁家的好?
麻畅19797814910…… 当然是博凌科为的100bp DNA Ladder Marker 了,我们实验室一直在用呢,反应很好 使用注意: 1. 电泳时的加样孔宽度小于6mm时,每次取5μl 制品电泳便可得到清晰条带.如果加样孔增宽,须适当增加Marker制品的加样量.2. 对DNA电泳而...
@盛拜3495：可以用线性DNA Marker判断质粒片段大小吗 -
麻畅19797814910…… 第一,我的经验就是不要用线性的MARKER去判断质粒的大小,是灰常不准滴. 第二,你的电泳图中handIII的marker跑得有问题,条带根本对应不上,无论跟1道还是5道的marker比都有不小的误差. 第三,如果我的理解没有问题的话,1道的marker是一个质粒marker,从条带上来看除了比例貌似有些问题,大小方面问题倒是不大,可以作为你判断样品大小的对照. 第四,你的样品这两条带大小我判断应该是8k和5k左右. 顶锅盖,走人~
