2x+loading+buffer+配方
@冀蔡5659：电泳时loading buffer和样品DNA比例多少 -
澹桂13869857270…… 主要决定loading buffer的浓度,DNA样品上样buffer(商品化或者是实验室自己配置的)主要是6X的,如果你上样DNA的体积是10ul的话,你只需要加入2ul的6X loading buffer后,混匀上样即可.
@冀蔡5659：WESTERN BLOT煮蛋白用得是几乘的loading buffer ,样品100ul, 5 乘的加多少? -
澹桂13869857270…… 一般用1乘的终浓度,那么: 1如果你最终样品溶液希望是100ul,那就是:样品+20(ul)5乘原液+80(ul)ddH2O 2如果你的样品已经有100ul,那就看你拿多大的管子来煮了.如果用2ml管子煮,最好配1ml终液,那就是:样品液(100ul)+200(ul)5乘原液+700(ul)ddH2O 总之,记住5乘原液的话是1:4的关系,即1份5乘原液+4份其他.
@冀蔡5659：rna凝胶检测上样 加多少loading buffer -
澹桂13869857270…… 和琼脂糖凝胶电泳的上样缓冲液一样 6*loading buffer 或10*loading buffer
@冀蔡5659：SDS - PAGE 5Xloading buffer 配制过程,注意,问的不是配方,高手进 -
澹桂13869857270…… 我想说以下几点: 1.SDS-PAGE loading buffer一般配成2X 的,5X loading buffer确实过于粘稠,且SDS在低温下难溶于水,这就导致你配的buffer“摇都摇不动”了 2.不知你为何要配那么多loading buffer(况且是5X的),这些东西都是用量很...
@冀蔡5659：PCR产物进行凝胶电泳电压、时间各是多少好 还有溴酚蓝的量 已知PCR产物制取2ul
澹桂13869857270…… 先说溴酚蓝,先搞搞清楚,你加的溴酚蓝,还是含有溴酚蓝的loading buffer?? loading buffer在管子上有写明用量,比如5X的loading buffer就是5μl上样量中占1μl,也就是1μl loading buffer+4μl待测PCR产物混合上样. 电压80-150V都可以用,效果也都不错,其他电压不推荐,电压太高可能熔胶,电压太低跑太慢. 时间?看溴酚蓝位置,不要跑出胶就行.
@冀蔡5659：2xloading buffer 与 10xloadingbuffer之间的区别 -
澹桂13869857270…… 唯一区别是浓度不同:10X的浓度是2X的5倍. 10X:10倍的工作浓度;2X:2倍的工作浓度.
@冀蔡5659：2*pfu酶跑完pcr后需要加loading buffer - 作业帮
澹桂13869857270…… [答案] 看你的2XPFU是什么形式,如果是mix的形式,一般已经有染料在里面了,可以看到mix的溶液就是蓝色,这样的话,样品可以直接上样的. 但是如果你加的溶液都是透明的,完成后还是需要加loading buffer.普通自己配的loading都是5X的,就按照样...
@冀蔡5659：western blot 蛋白可以在加loading buffer之前煮吗 -
澹桂13869857270…… 如果是已经制好的样~加入loading之后煮样~SDS能让蛋白彻底变性为线性并溶于样品中~加loading前煮样会造成protein变性聚集沉淀~
@冀蔡5659：加loading buffer煮沸后有沉淀影响蛋白浓度么 -
澹桂13869857270…… 这个是看你的目的了,如果你要跑还原性电泳,那么样品需要用含有β-巯基乙醇的loading buffer沸煮5分钟,这样使蛋白间的二硫键在还原剂β-巯基乙醇的作用下被打开,得到的是蛋白的一级结构.而非还原的电泳就是在loading buffer中不加入还原剂β-巯基乙醇,这样的电泳比较能够真实的反应蛋白当时的情况,比如二聚体或者多聚体之类的.
@冀蔡5659：哪位有6*Loading Buffer配方 -
澹桂13869857270…… 蛋白质的SDS-PAGE一般只会配成5*的loading buffer DNA的会配成10*的 5*Loading Buffer 250mM Tris-HCl(pH6.8) 10%(W/V)SDS 0.5%(W/V)BPB 50%(V/V)甘油 5%(W/V)β-巯基乙醇 10*Loading buffer 30mM EDTA 50%(v/v) Glycerol 0.25%(w/v) X...
澹桂13869857270…… 主要决定loading buffer的浓度,DNA样品上样buffer(商品化或者是实验室自己配置的)主要是6X的,如果你上样DNA的体积是10ul的话,你只需要加入2ul的6X loading buffer后,混匀上样即可.
@冀蔡5659：WESTERN BLOT煮蛋白用得是几乘的loading buffer ,样品100ul, 5 乘的加多少? -
澹桂13869857270…… 一般用1乘的终浓度,那么: 1如果你最终样品溶液希望是100ul,那就是:样品+20(ul)5乘原液+80(ul)ddH2O 2如果你的样品已经有100ul,那就看你拿多大的管子来煮了.如果用2ml管子煮,最好配1ml终液,那就是:样品液(100ul)+200(ul)5乘原液+700(ul)ddH2O 总之,记住5乘原液的话是1:4的关系,即1份5乘原液+4份其他.
@冀蔡5659：rna凝胶检测上样 加多少loading buffer -
澹桂13869857270…… 和琼脂糖凝胶电泳的上样缓冲液一样 6*loading buffer 或10*loading buffer
@冀蔡5659：SDS - PAGE 5Xloading buffer 配制过程,注意,问的不是配方,高手进 -
澹桂13869857270…… 我想说以下几点: 1.SDS-PAGE loading buffer一般配成2X 的,5X loading buffer确实过于粘稠,且SDS在低温下难溶于水,这就导致你配的buffer“摇都摇不动”了 2.不知你为何要配那么多loading buffer(况且是5X的),这些东西都是用量很...
@冀蔡5659：PCR产物进行凝胶电泳电压、时间各是多少好 还有溴酚蓝的量 已知PCR产物制取2ul
澹桂13869857270…… 先说溴酚蓝,先搞搞清楚,你加的溴酚蓝,还是含有溴酚蓝的loading buffer?? loading buffer在管子上有写明用量,比如5X的loading buffer就是5μl上样量中占1μl,也就是1μl loading buffer+4μl待测PCR产物混合上样. 电压80-150V都可以用,效果也都不错,其他电压不推荐,电压太高可能熔胶,电压太低跑太慢. 时间?看溴酚蓝位置,不要跑出胶就行.
@冀蔡5659：2xloading buffer 与 10xloadingbuffer之间的区别 -
澹桂13869857270…… 唯一区别是浓度不同:10X的浓度是2X的5倍. 10X:10倍的工作浓度;2X:2倍的工作浓度.
@冀蔡5659：2*pfu酶跑完pcr后需要加loading buffer - 作业帮
澹桂13869857270…… [答案] 看你的2XPFU是什么形式,如果是mix的形式,一般已经有染料在里面了,可以看到mix的溶液就是蓝色,这样的话,样品可以直接上样的. 但是如果你加的溶液都是透明的,完成后还是需要加loading buffer.普通自己配的loading都是5X的,就按照样...
@冀蔡5659：western blot 蛋白可以在加loading buffer之前煮吗 -
澹桂13869857270…… 如果是已经制好的样~加入loading之后煮样~SDS能让蛋白彻底变性为线性并溶于样品中~加loading前煮样会造成protein变性聚集沉淀~
@冀蔡5659：加loading buffer煮沸后有沉淀影响蛋白浓度么 -
澹桂13869857270…… 这个是看你的目的了,如果你要跑还原性电泳,那么样品需要用含有β-巯基乙醇的loading buffer沸煮5分钟,这样使蛋白间的二硫键在还原剂β-巯基乙醇的作用下被打开,得到的是蛋白的一级结构.而非还原的电泳就是在loading buffer中不加入还原剂β-巯基乙醇,这样的电泳比较能够真实的反应蛋白当时的情况,比如二聚体或者多聚体之类的.
@冀蔡5659：哪位有6*Loading Buffer配方 -
澹桂13869857270…… 蛋白质的SDS-PAGE一般只会配成5*的loading buffer DNA的会配成10*的 5*Loading Buffer 250mM Tris-HCl(pH6.8) 10%(W/V)SDS 0.5%(W/V)BPB 50%(V/V)甘油 5%(W/V)β-巯基乙醇 10*Loading buffer 30mM EDTA 50%(v/v) Glycerol 0.25%(w/v) X...
