sds+loading+buffer+配方
@仉胆4343：SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳中样品为什么要加loading buffer -
竺玉19881674356…… 不加的话,你上的样,第一是没有指示作用,你不知道样品跑到哪里了,第二是上样液的密度大,可以沉在孔地下,把缓冲液挤出!
@仉胆4343：跑SDS - PAGE时,loading buffer什么时间加入好 -
竺玉19881674356…… 跑SDS PAGE时 loading buffer应该在加样前与蛋白等体积混匀,然后煮样5分钟,这样可以确保SDS和蛋白样品充分的结合.有利于SDS PAGE的进行 先单独加热变性蛋白样品后再加入loading buffer上样是错误的操作方法
@仉胆4343：SDS - PAGE 5Xloading buffer 配制过程,注意,问的不是配方,高手进 -
竺玉19881674356…… 我想说以下几点: 1.SDS-PAGE loading buffer一般配成2X 的,5X loading buffer确实过于粘稠,且SDS在低温下难溶于水,这就导致你配的buffer“摇都摇不动”了 2.不知你为何要配那么多loading buffer(况且是5X的),这些东西都是用量很...
@仉胆4343：在SDS - PAGE电泳前,蛋白质样品应该如何处理 -
竺玉19881674356…… 这个是看你的目的了,如果你要跑还原性电泳,那么样品需要用含有β-巯基乙醇的loading buffer沸煮5分钟,这样使蛋白间的二硫键在还原剂β-巯基乙醇的作用下被打开,得到的是蛋白的一级结构.而非还原的电泳就是在loading buffer中不加入还原剂β-巯基乙醇,这样的电泳比较能够真实的反应蛋白当时的情况,比如二聚体或者多聚体之类的.
@仉胆4343：western 加错了DNA的 loading buffer ,怎么办,会造成什么样的影响,跪求 谢谢 -
竺玉19881674356…… 肯定会影响的,会导致蛋白不能充分电泳.蛋白buffer含SDS使蛋白带上负电荷,这样才能屏蔽电荷的影响,在SDS胶中以分子量不同做电泳.所以,导致样品中蛋白不能进行充分的电泳
@仉胆4343：western blot 蛋白可以在加loading buffer之前煮吗 -
竺玉19881674356…… 如果是已经制好的样~加入loading之后煮样~SDS能让蛋白彻底变性为线性并溶于样品中~加loading前煮样会造成protein变性聚集沉淀~
@仉胆4343：在western blot中loading buffer的作用是什么?就是跑SDS - PAGE时在蛋白样中加入loading buffer的作用是什么? - 作业帮
竺玉19881674356…… [答案] 1、指示剂,方便观察电泳进行的程度;2、密度大,携带你的样本沉到孔的底部;3、保持蛋白线性及携带过量负电荷的状态. 除此之外,里面最重要的是还有巯基乙醇还原剂来让蛋白质充分变性,同时保护-SH基团.
@仉胆4343：SDS - PAGE时样品中都加什么 -
竺玉19881674356…… 将loading buffer与你的蛋白样品按比例混合,高温变性后,放冰上5分钟后,上样电泳. loading buffer中包含甘氨酸,Tris-Hcl,SDS,甘油,溴酚兰,β-巯基乙醇或二硫苏糖醇(DTT). 甘氨酸和Tris-Hcl用来提供正负离子;SDS是变性剂,同时屏蔽蛋白本来的电荷;β-巯基乙醇或二硫苏糖醇(DTT)为还原剂,进一步打开蛋白间亚结构.
@仉胆4343：哪位有6*Loading Buffer配方 -
竺玉19881674356…… 蛋白质的SDS-PAGE一般只会配成5*的loading buffer DNA的会配成10*的 5*Loading Buffer 250mM Tris-HCl(pH6.8) 10%(W/V)SDS 0.5%(W/V)BPB 50%(V/V)甘油 5%(W/V)β-巯基乙醇 10*Loading buffer 30mM EDTA 50%(v/v) Glycerol 0.25%(w/v) X...
@仉胆4343：sds电泳上样缓冲液如何配置
竺玉19881674356…… 5*SDS-PAGE Loading Buffer的配制(10 ml) (本方案摘自《蛋白质技术手册》汪家政、范明) 组分:Tris-HCl pH6.8(60 mM);SDS (2%);溴酚兰(0.1%);甘油(25%);β-巯基乙醇(14.4 mM) 配制过程: 1. 量取1M Tris-HCl (pH6.8) 0.6 ml;...
竺玉19881674356…… 不加的话,你上的样,第一是没有指示作用,你不知道样品跑到哪里了,第二是上样液的密度大,可以沉在孔地下,把缓冲液挤出!
@仉胆4343：跑SDS - PAGE时,loading buffer什么时间加入好 -
竺玉19881674356…… 跑SDS PAGE时 loading buffer应该在加样前与蛋白等体积混匀,然后煮样5分钟,这样可以确保SDS和蛋白样品充分的结合.有利于SDS PAGE的进行 先单独加热变性蛋白样品后再加入loading buffer上样是错误的操作方法
@仉胆4343：SDS - PAGE 5Xloading buffer 配制过程,注意,问的不是配方,高手进 -
竺玉19881674356…… 我想说以下几点: 1.SDS-PAGE loading buffer一般配成2X 的,5X loading buffer确实过于粘稠,且SDS在低温下难溶于水,这就导致你配的buffer“摇都摇不动”了 2.不知你为何要配那么多loading buffer(况且是5X的),这些东西都是用量很...
@仉胆4343：在SDS - PAGE电泳前,蛋白质样品应该如何处理 -
竺玉19881674356…… 这个是看你的目的了,如果你要跑还原性电泳,那么样品需要用含有β-巯基乙醇的loading buffer沸煮5分钟,这样使蛋白间的二硫键在还原剂β-巯基乙醇的作用下被打开,得到的是蛋白的一级结构.而非还原的电泳就是在loading buffer中不加入还原剂β-巯基乙醇,这样的电泳比较能够真实的反应蛋白当时的情况,比如二聚体或者多聚体之类的.
@仉胆4343：western 加错了DNA的 loading buffer ,怎么办,会造成什么样的影响,跪求 谢谢 -
竺玉19881674356…… 肯定会影响的,会导致蛋白不能充分电泳.蛋白buffer含SDS使蛋白带上负电荷,这样才能屏蔽电荷的影响,在SDS胶中以分子量不同做电泳.所以,导致样品中蛋白不能进行充分的电泳
@仉胆4343：western blot 蛋白可以在加loading buffer之前煮吗 -
竺玉19881674356…… 如果是已经制好的样~加入loading之后煮样~SDS能让蛋白彻底变性为线性并溶于样品中~加loading前煮样会造成protein变性聚集沉淀~
@仉胆4343：在western blot中loading buffer的作用是什么?就是跑SDS - PAGE时在蛋白样中加入loading buffer的作用是什么? - 作业帮
竺玉19881674356…… [答案] 1、指示剂,方便观察电泳进行的程度;2、密度大,携带你的样本沉到孔的底部;3、保持蛋白线性及携带过量负电荷的状态. 除此之外,里面最重要的是还有巯基乙醇还原剂来让蛋白质充分变性,同时保护-SH基团.
@仉胆4343：SDS - PAGE时样品中都加什么 -
竺玉19881674356…… 将loading buffer与你的蛋白样品按比例混合,高温变性后,放冰上5分钟后,上样电泳. loading buffer中包含甘氨酸,Tris-Hcl,SDS,甘油,溴酚兰,β-巯基乙醇或二硫苏糖醇(DTT). 甘氨酸和Tris-Hcl用来提供正负离子;SDS是变性剂,同时屏蔽蛋白本来的电荷;β-巯基乙醇或二硫苏糖醇(DTT)为还原剂,进一步打开蛋白间亚结构.
@仉胆4343：哪位有6*Loading Buffer配方 -
竺玉19881674356…… 蛋白质的SDS-PAGE一般只会配成5*的loading buffer DNA的会配成10*的 5*Loading Buffer 250mM Tris-HCl(pH6.8) 10%(W/V)SDS 0.5%(W/V)BPB 50%(V/V)甘油 5%(W/V)β-巯基乙醇 10*Loading buffer 30mM EDTA 50%(v/v) Glycerol 0.25%(w/v) X...
@仉胆4343：sds电泳上样缓冲液如何配置
竺玉19881674356…… 5*SDS-PAGE Loading Buffer的配制(10 ml) (本方案摘自《蛋白质技术手册》汪家政、范明) 组分:Tris-HCl pH6.8(60 mM);SDS (2%);溴酚兰(0.1%);甘油(25%);β-巯基乙醇(14.4 mM) 配制过程: 1. 量取1M Tris-HCl (pH6.8) 0.6 ml;...
