x-a-gal检测双杂交

@秦发296:用Gal4系统做酵母双杂,显色反应用的X - a - Gal能不能用X - Gal代替? -
赫肢18156527481…… 显色反应只能用的X-a-Gal,不能用X-Gal代替.如果你来不及的话,可以用其它方法判定,在产品说明书上一般都有代替方法.

@秦发296:酵母双杂交系统到底是啥回事?有啥用 -
赫肢18156527481…… 酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 i .典型的真核生长转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating ...

@秦发296:酵母双杂交的具体过程是什么?(中文) -
赫肢18156527481…… 菌株与质粒AH109酵母菌株(MATa,trp1. 901,leu2—3,112,ura3-52,his3-200,gal4A,gal8O~X, LYS2::G地1U^s-GALlT^T^-HIS3, G U^s—GAI2T^T^- ADE2,URA3::h吐1U^s.h吐1T^T^.1acZ),YM187酵母 菌株(NATQ,um3-52,his3-200,ade2—101,trpl-...

@秦发296:为什么X - gal被半乳糖苷酶分解后有颜色?产物是什么? -
赫肢18156527481…… X-gal也称 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,X-Gal是β-半乳糖苷酶的显色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物.常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选. β-半乳糖苷酶与Xgal显色反应是通过b-半乳糖苷酶能把无色的化合物Xgal分解成半乳糖和一个深蓝色的物质5-溴-4-氯靛蓝

@秦发296:X - Gal的介绍 -
赫肢18156527481…… X-gal也称5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside或5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside,X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物.常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选.

@秦发296:许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ'基因,其编码的产物β - 半乳糖苷酶在X - gal和IPTG存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色.基因工... - 作业帮
赫肢18156527481…… [选项] A. 基因工程中,构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,能遗传给后代,并表达和发挥作用 B. 转化过程中,大肠杆菌应先用Ca2+处理,使其能够吸收周围DNA的状态 C. 菌落颜色为白色的是菌落② D. 菌落③中的目的基因是否表达,可采用的检测办法是抗原-抗体杂交

@秦发296:...处理,使其处于能吸收周围DNA的状态,这种细胞称为___细胞.(3)在相同条件下的培养基中,菌落___(填序号)颜色一定为白色的.(4)检测菌落③中... - 作业帮
赫肢18156527481…… [答案] (1)构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,能遗传给后代,并表达和发挥作用. 基因工程的操作均是... 不能表达产生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,菌落颜色为白色. (4)检测菌落③中的目的基因是否表达的第一步(...

@秦发296:loxp位点的插入会影响基因的表达吗 -
赫肢18156527481…… loxp位点的插入会影响基因的表达目的采用大肠杆菌β-半乳糖酶基因LacZ作为报告基因,建立Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶含有loxp位点的转基因小鼠.与不同组织特异性Cre小鼠杂交,获得时空性表达Tyro3、Axl的转基因小鼠,为研究其在各个组织...

@秦发296:(2012•泰州三模)许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ'基因,其编码的产物B - 半乳糖苷酶在X - gal和IPTG 存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌... - 作业帮
赫肢18156527481…… [答案] (1)基因工程的核心步骤是构建基因表达载体,目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,能遗传给后代,并表达和发挥作用... 在X-gal和IPTG 存在下,菌落颜色为白色. (5)检测目的基因是否表达产生蛋白质,可采用抗原一抗体杂交法. 故答案:(1...

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