βactin稀释比例
@鲍冠674：我想做PCR内参选beta - actin还是GAPDH好 -
瞿奔13511963341…… 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD.一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上 另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参
@鲍冠674：请问各位高手,有没有用Rabbit anti - β - actin抗体来做纳米细胞标记的 -
瞿奔13511963341…… 抗体稀释常用两种表示,一种使绝对浓度,微克每毫升;一种用稀释比例.如果是IgG,原始分子分子量在150kD左右,如果是Fc片段的话,有40-80kD之间几种可能.
@鲍冠674：做western blot时怎么做beta actin -
瞿奔13511963341…… 是的,β-actin 是管家基因编码的细胞骨架蛋白,表达量在细胞内相对稳定,很少受到其他因素的影响,因此常被选作实验内参
@鲍冠674：荧光定量PCR beta actin的Ct一般是多少 -
瞿奔13511963341…… 这个要根据你的总RNA浓度 一般来说,1μg/μl的总RNA 20循环以内就到Ct了 但是不同的组织样本actin的浓度不一致的 我做过肌肉、内脏、脑组织的,差异会比较大
@鲍冠674：Western Blot都可以用beta - actin做内参吗? -
瞿奔13511963341…… 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-actin 做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-actin起到几个作用: 1、如果目的蛋白检测不...
@鲍冠674：关于western blot抗体的稀释western blot抗体用什么稀释? - 作业帮
瞿奔13511963341…… [答案] 试剂公司有一抗和二抗稀释液买,这个比较好,可以反复用几次(用完4度保存).我们做的时候(其它一些人也是这样),有时用TBST,效果也可以.
@鲍冠674：什么是β - actin 基因 -
瞿奔13511963341…… Actin即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白.同时Actin在细胞分泌、吞噬、 β-Actin 移动、胞质流动和胞质分离等过程中起重要作用.
@鲍冠674：如何正确使用多酶清洗液. -
瞿奔13511963341…… 1.请先放水,按照比例(1:270)后加酶,轻柔混匀多酶溶液. 2.预先用流动水冲洗污染器械. 3.然后多酶浸泡. 4.也可结合超声清洗. 一. 概述 【产品名称】多酶清洗液 【产品类别】医疗耗材 二. 产品功效 1.自动清洗适用于消毒机、超声波清...
@鲍冠674：weternblotting实验βactin没条带,目标蛋白条带不好,什么原因 -
瞿奔13511963341…… 原因如下: 1,可能是上样浓度太大, 2,还有可能是,转印的时候膜没有铺好, 3,或取下来的时候拖动膜了.解决方法:换换转印缓冲液,增加点甲醇的浓度. Western Blot中文一般称为蛋白质印迹.它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法.其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色.通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息.
@鲍冠674：酚酞液是怎么配比的? -
瞿奔13511963341…… 称取1.0g酚酞,溶于乙醇,用乙醇稀释至100ml. 作为定性检测试剂来说,乙醇的浓度没有严格的限制,用高浓度的乙醇只不过是为了更好的溶解酚酞,这两种均可以的,用95%就可以了!
瞿奔13511963341…… 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD.一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上 另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参
@鲍冠674：请问各位高手,有没有用Rabbit anti - β - actin抗体来做纳米细胞标记的 -
瞿奔13511963341…… 抗体稀释常用两种表示,一种使绝对浓度,微克每毫升;一种用稀释比例.如果是IgG,原始分子分子量在150kD左右,如果是Fc片段的话,有40-80kD之间几种可能.
@鲍冠674：做western blot时怎么做beta actin -
瞿奔13511963341…… 是的,β-actin 是管家基因编码的细胞骨架蛋白,表达量在细胞内相对稳定,很少受到其他因素的影响,因此常被选作实验内参
@鲍冠674：荧光定量PCR beta actin的Ct一般是多少 -
瞿奔13511963341…… 这个要根据你的总RNA浓度 一般来说,1μg/μl的总RNA 20循环以内就到Ct了 但是不同的组织样本actin的浓度不一致的 我做过肌肉、内脏、脑组织的,差异会比较大
@鲍冠674：Western Blot都可以用beta - actin做内参吗? -
瞿奔13511963341…… 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-actin 做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-actin起到几个作用: 1、如果目的蛋白检测不...
@鲍冠674：关于western blot抗体的稀释western blot抗体用什么稀释? - 作业帮
瞿奔13511963341…… [答案] 试剂公司有一抗和二抗稀释液买,这个比较好,可以反复用几次(用完4度保存).我们做的时候(其它一些人也是这样),有时用TBST,效果也可以.
@鲍冠674：什么是β - actin 基因 -
瞿奔13511963341…… Actin即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白.同时Actin在细胞分泌、吞噬、 β-Actin 移动、胞质流动和胞质分离等过程中起重要作用.
@鲍冠674：如何正确使用多酶清洗液. -
瞿奔13511963341…… 1.请先放水,按照比例(1:270)后加酶,轻柔混匀多酶溶液. 2.预先用流动水冲洗污染器械. 3.然后多酶浸泡. 4.也可结合超声清洗. 一. 概述 【产品名称】多酶清洗液 【产品类别】医疗耗材 二. 产品功效 1.自动清洗适用于消毒机、超声波清...
@鲍冠674：weternblotting实验βactin没条带,目标蛋白条带不好,什么原因 -
瞿奔13511963341…… 原因如下: 1,可能是上样浓度太大, 2,还有可能是,转印的时候膜没有铺好, 3,或取下来的时候拖动膜了.解决方法:换换转印缓冲液,增加点甲醇的浓度. Western Blot中文一般称为蛋白质印迹.它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法.其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色.通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息.
@鲍冠674：酚酞液是怎么配比的? -
瞿奔13511963341…… 称取1.0g酚酞,溶于乙醇,用乙醇稀释至100ml. 作为定性检测试剂来说,乙醇的浓度没有严格的限制,用高浓度的乙醇只不过是为了更好的溶解酚酞,这两种均可以的,用95%就可以了!
