内参蛋白百科
@酆肿4021：westernblotting中内参的作用是什么希望大家可以讲解
习生15635115590…… 嗯,同意楼上的说法,内参一般都是选用细胞内表达稳定,表达量比较高的蛋白,比如一些骨架蛋白.这些蛋白一般认为不会因为实验处理,细胞状态不同而在总蛋白中的含量有大的起伏.有内参的话,你的目的蛋白的表达的比较才有意义,否则的话,你说某一组的目标蛋白表达升高了,怎么排除你上样上多了的原因.
@酆肿4021：什么是内参抗体?购买内参抗体需要注意什么?
习生15635115590…… 要用内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Proteins),它们在各组织和细胞中的表达相...
@酆肿4021：western blot等生物学试验中的内参是什么意思? - 作业帮
习生15635115590…… [答案] western blot用来检测蛋白表达的变化,而检测表达变化的前提就是,你每个孔跑得总蛋白量是相同的,如果上样量都不同,还怎么检测不同组间目的蛋白量的区别,这样内参就可以作为检测蛋白上样量是否相同的标准.内参一般选那...
@酆肿4021：如何选择合适的细胞核内参抗体?
习生15635115590…… Actin是细胞骨架的主要成分,具有高度保守性,在细胞中的表达相对稳定,广泛表达于真核细胞中,大小在42kDa-43kDa之间.研究发现Actin可以调控细胞收缩、调节细胞分裂、细胞器移动、花粉管顶端生长等活动,在植物的幼芽、生长组织、花基、萌发的种子和花序中均稳定表达. 选择合适的植物内参,首先考虑样本来源,植物样本需要选用植物细胞表达稳定的蛋白比如Actin或者Rubisco作为内参;其次要考虑目的蛋白的分子量大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量相差5kD以上,例如某植物目的蛋白大小在50kD左右,就可以选用Actin作为WB实验的内参;最后,从特异性、稳定性以及效价方面考虑,建议选用单克隆抗体更好一些.
@酆肿4021：qRT - PCR中内参是什么?
习生15635115590…… 内参基因也称为管家基因.理论上,其表达一直都很恒定,很少受外界影响.这种基因的表达也称之为组成性表达.
@酆肿4021：麻烦大神详细分析一下这个western blot图 -
习生15635115590…… vector那一列是对照,Flag-那一列是样品.随着时间的变化,在对照和样品间蛋白表达量的变化.其中alpha-tublin是内参,表示在样品和对照间,其他无关蛋白的量并不随着时间点不同产生变化,所以如果有不同,就是由于时间造成的.
@酆肿4021：western blot实验中为什么要检测内参的表达量,急急急!!! -
习生15635115590…… 用来做实验中不同样品间比对的基础.实验设计中某种指标或者因子在实验处理前后的变化是基于处理等量细胞数基础上进行对比.内参在组织与细胞中的表达量恒定,通过测定内参表达量,可以以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差.
@酆肿4021：请问怎么看蛋白的大小就是做蛋白电泳的时候内参蛋白的大小怎么看呢?
习生15635115590…… 点个预染marker就看到了
@酆肿4021：bcr - el4a2)阴性是什么意?BCR - ABL(el3a2,el4a2
习生15635115590…… 是BCR-ABL与ABL的比值,ABL作为的是内参,bcr-abl(P210)是慢粒中的特异性融合基因. M-bcr-abl/abl 75%一般来说是接近初发的水平,一般来说比值的上升在5倍以内认为是正常的.超过了的话,可能提示存在格列卫耐药,建议做ABL突变检测,咨询专业的医生. 点一下好评,真心的祝愿你万事如意!
@酆肿4021：康为世纪的Actin内参怎么样?有人用过么?
习生15635115590…… 可以啊,β-actin是一种持家蛋白,当然可以用作qPCR内参. 以上是对这个问题的回答,希望对您有帮助.
习生15635115590…… 嗯,同意楼上的说法,内参一般都是选用细胞内表达稳定,表达量比较高的蛋白,比如一些骨架蛋白.这些蛋白一般认为不会因为实验处理,细胞状态不同而在总蛋白中的含量有大的起伏.有内参的话,你的目的蛋白的表达的比较才有意义,否则的话,你说某一组的目标蛋白表达升高了,怎么排除你上样上多了的原因.
@酆肿4021：什么是内参抗体?购买内参抗体需要注意什么?
习生15635115590…… 要用内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Proteins),它们在各组织和细胞中的表达相...
@酆肿4021：western blot等生物学试验中的内参是什么意思? - 作业帮
习生15635115590…… [答案] western blot用来检测蛋白表达的变化,而检测表达变化的前提就是,你每个孔跑得总蛋白量是相同的,如果上样量都不同,还怎么检测不同组间目的蛋白量的区别,这样内参就可以作为检测蛋白上样量是否相同的标准.内参一般选那...
@酆肿4021：如何选择合适的细胞核内参抗体?
习生15635115590…… Actin是细胞骨架的主要成分,具有高度保守性,在细胞中的表达相对稳定,广泛表达于真核细胞中,大小在42kDa-43kDa之间.研究发现Actin可以调控细胞收缩、调节细胞分裂、细胞器移动、花粉管顶端生长等活动,在植物的幼芽、生长组织、花基、萌发的种子和花序中均稳定表达. 选择合适的植物内参,首先考虑样本来源,植物样本需要选用植物细胞表达稳定的蛋白比如Actin或者Rubisco作为内参;其次要考虑目的蛋白的分子量大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量相差5kD以上,例如某植物目的蛋白大小在50kD左右,就可以选用Actin作为WB实验的内参;最后,从特异性、稳定性以及效价方面考虑,建议选用单克隆抗体更好一些.
@酆肿4021：qRT - PCR中内参是什么?
习生15635115590…… 内参基因也称为管家基因.理论上,其表达一直都很恒定,很少受外界影响.这种基因的表达也称之为组成性表达.
@酆肿4021：麻烦大神详细分析一下这个western blot图 -
习生15635115590…… vector那一列是对照,Flag-那一列是样品.随着时间的变化,在对照和样品间蛋白表达量的变化.其中alpha-tublin是内参,表示在样品和对照间,其他无关蛋白的量并不随着时间点不同产生变化,所以如果有不同,就是由于时间造成的.
@酆肿4021：western blot实验中为什么要检测内参的表达量,急急急!!! -
习生15635115590…… 用来做实验中不同样品间比对的基础.实验设计中某种指标或者因子在实验处理前后的变化是基于处理等量细胞数基础上进行对比.内参在组织与细胞中的表达量恒定,通过测定内参表达量,可以以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差.
@酆肿4021：请问怎么看蛋白的大小就是做蛋白电泳的时候内参蛋白的大小怎么看呢?
习生15635115590…… 点个预染marker就看到了
@酆肿4021：bcr - el4a2)阴性是什么意?BCR - ABL(el3a2,el4a2
习生15635115590…… 是BCR-ABL与ABL的比值,ABL作为的是内参,bcr-abl(P210)是慢粒中的特异性融合基因. M-bcr-abl/abl 75%一般来说是接近初发的水平,一般来说比值的上升在5倍以内认为是正常的.超过了的话,可能提示存在格列卫耐药,建议做ABL突变检测,咨询专业的医生. 点一下好评,真心的祝愿你万事如意!
@酆肿4021：康为世纪的Actin内参怎么样?有人用过么?
习生15635115590…… 可以啊,β-actin是一种持家蛋白,当然可以用作qPCR内参. 以上是对这个问题的回答,希望对您有帮助.
