actin内参蛋白分子量

@隗翰420:我想做PCR内参选beta - actin还是GAPDH好 -
潘侦15741105763…… 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD.一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上 另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参

@隗翰420:western blot 的内参不一致,急求助 -
潘侦15741105763…… 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候Western Blot做起来...

@隗翰420:线虫的actin有多少个氨基酸 -
潘侦15741105763…… 线虫的actin有多少个氨基酸 β-Actin是PCR常用的内参,β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数.内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白.它们在各组织和细胞中的表达相对恒...

@隗翰420:如何选择合适的细胞核内参抗体?
潘侦15741105763…… Actin是细胞骨架的主要成分,具有高度保守性,在细胞中的表达相对稳定,广泛表达于真核细胞中,大小在42kDa-43kDa之间.研究发现Actin可以调控细胞收缩、调节细胞分裂、细胞器移动、花粉管顶端生长等活动,在植物的幼芽、生长组织、花基、萌发的种子和花序中均稳定表达. 选择合适的植物内参,首先考虑样本来源,植物样本需要选用植物细胞表达稳定的蛋白比如Actin或者Rubisco作为内参;其次要考虑目的蛋白的分子量大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量相差5kD以上,例如某植物目的蛋白大小在50kD左右,就可以选用Actin作为WB实验的内参;最后,从特异性、稳定性以及效价方面考虑,建议选用单克隆抗体更好一些.

@隗翰420:以actin为内参,同种细胞不同处理,蛋白会产生变化吗 -
潘侦15741105763…… 用内参照是为了评价你的各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致,通常使用一些看家蛋白,比如β-actin、GAPDH等等.这些蛋白在所有细胞中的表达量基本一致,所以用他们来作为你加样量的对照.这样western结果中你的目的蛋白经过处理后...

@隗翰420:elisa需要actin对照吗 -
潘侦15741105763…… WB中会设置内参,Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白.β-actin的蛋白水平通常不会发生改变,因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照.

@隗翰420:什么是肌动蛋白纤维 -
潘侦15741105763…… 微丝(microfilament,MF),又称肌动蛋白纤维(actin filament),是指真核细胞中由肌动蛋白(actin)组成,直径为7nm的骨架纤维. (一)成分 肌动蛋白是微丝的结构成分,分子量为43kD.肌动蛋白单体外观呈哑铃状,其确切分子结构尚...

@隗翰420:western blot结果中的actin怎么了 -
潘侦15741105763…… 需要加beta-actin的一抗,beta-actin分子量42,如果您的蛋白也是差不多大小,那么需要上两次样品,分别做您的目的蛋白和beta-actin,当然您如果做熟练了也可以上一次样,先做目的抗体,压片后strip膜再做beta-actin.如果您的目的蛋白在其他位置,那更方便,上一次样,封闭后把膜裁开,分别加您的目的蛋白一抗和beta-actin的一抗.

@隗翰420:做western blot时怎么做beta actin -
潘侦15741105763…… 是的,β-actin 是管家基因编码的细胞骨架蛋白,表达量在细胞内相对稳定,很少受到其他因素的影响,因此常被选作实验内参

@隗翰420:14 - 3 - 3蛋白western选用什么内参 -
潘侦15741105763…… 要检测蛋白分子量是在28~33kD之间?那内参可以选用a-tubulin(56kD)或者β-actin(42kD)GAPDH(36kD)可能稍微小了的

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