βactin的二抗是什么
@宁饼3138：Western Blot都可以用beta - actin做内参吗? -
巢饼18538928808…… 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-actin 做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-actin起到几个作用: 1、如果目的蛋白检测不...
@宁饼3138：western blot内参抗体actin为什么出了好几条带 -
巢饼18538928808…… 首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置
@宁饼3138：什么叫酶标二抗? -
巢饼18538928808…… 我猜,是用酶标记的第二抗体.在western blotting里面,为了检测目标蛋白,加入相应的一抗,然后加入一抗的抗体,就是二抗,二抗上连接有某种酶,在体系中加入这种酶的底物产生特异的颜色反应之类的,就知道二抗连接上去了,也就证明了目标蛋白的存在…说得不太清楚,可以搜搜western blotting的具体步骤,应该指的是这个.
@宁饼3138：求助选择什么作为内参 -
巢饼18538928808…… 搞不太清楚你想说什么.内参抗体一般选择 β-actin,GAPDH.hsp90也OK.一般内参抗体都是鼠源的埃既然一抗是鼠源,二抗是接HRP的羊抗鼠就很好理解埃
@宁饼3138：western中目标抗体出现,内参出不来是为什么啊? -
巢饼18538928808…… 1. 二抗的种属没弄错吧 目的基因和内参都是什么种属来源的? 2. “动脉抽出蛋白”是什么意思? 用动脉组织制备的蛋白质样品?
@宁饼3138：关于WESTERN BLOT的内参 -
巢饼18538928808…… 肯定要加二抗啊,内参和你的目的蛋白是一样的,也是一个蛋白,只不过表达比你的目的蛋白在各个组织之间恒定许多,它是你的目的蛋白的一个参照,但是它的作用和mark还不一样,所以内参是一定要要的,否则,人家会质疑你实验的可信性. 如果你的实验动物是大鼠,打个比方一抗是兔抗鼠吧或者其他的什么抗鼠的,二抗就是什么抗兔的,比如说羊抗兔之类,一抗最好买国外的,二抗国内的就可以了
@宁饼3138：sp法中一抗、二抗指的是什么?
巢饼18538928808…… 一抗、二抗 一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体.即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体. 第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合. 第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体.主要用于检测抗体的存在. e.g.利...
@宁饼3138：“第二抗体”和“二抗”的区别是什么? -
巢饼18538928808…… 第二抗体是抗人IgG(免疫球蛋白)抗体,针对不同抗原的人IgG抗体,它们的V区不同,所以只能与相应的抗原发生特异性结合,但C区是相同的,均含r链,因此第二抗体与之结合. 二抗:二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合...
@宁饼3138：什么是β - actin 基因 -
巢饼18538928808…… Actin即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白.同时Actin在细胞分泌、吞噬、 β-Actin 移动、胞质流动和胞质分离等过程中起重要作用.
@宁饼3138：一抗 - 间接免疫荧光问题?1、一抗和二抗分别是什么2、间接免疫荧光技术是?
巢饼18538928808…… 直接法是每个抗原的抗体都要荧光标记,而且荧光标记后可能会影响抗体效价甚至失效.所以有人就发明了间接法,这样只要对相应的抗原做出相应的抗体,再用标记好的二抗结合上就行了,不用每个抗体都要荧光标记,而且对一抗的效价影响甚微. 我自己的经验是,直接法跟间接法的结果差不多,敏感性并不像猜测的那么明显,所以直接法还是比间接法有优势
巢饼18538928808…… 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-actin 做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-actin起到几个作用: 1、如果目的蛋白检测不...
@宁饼3138：western blot内参抗体actin为什么出了好几条带 -
巢饼18538928808…… 首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置
@宁饼3138：什么叫酶标二抗? -
巢饼18538928808…… 我猜,是用酶标记的第二抗体.在western blotting里面,为了检测目标蛋白,加入相应的一抗,然后加入一抗的抗体,就是二抗,二抗上连接有某种酶,在体系中加入这种酶的底物产生特异的颜色反应之类的,就知道二抗连接上去了,也就证明了目标蛋白的存在…说得不太清楚,可以搜搜western blotting的具体步骤,应该指的是这个.
@宁饼3138：求助选择什么作为内参 -
巢饼18538928808…… 搞不太清楚你想说什么.内参抗体一般选择 β-actin,GAPDH.hsp90也OK.一般内参抗体都是鼠源的埃既然一抗是鼠源,二抗是接HRP的羊抗鼠就很好理解埃
@宁饼3138：western中目标抗体出现,内参出不来是为什么啊? -
巢饼18538928808…… 1. 二抗的种属没弄错吧 目的基因和内参都是什么种属来源的? 2. “动脉抽出蛋白”是什么意思? 用动脉组织制备的蛋白质样品?
@宁饼3138：关于WESTERN BLOT的内参 -
巢饼18538928808…… 肯定要加二抗啊,内参和你的目的蛋白是一样的,也是一个蛋白,只不过表达比你的目的蛋白在各个组织之间恒定许多,它是你的目的蛋白的一个参照,但是它的作用和mark还不一样,所以内参是一定要要的,否则,人家会质疑你实验的可信性. 如果你的实验动物是大鼠,打个比方一抗是兔抗鼠吧或者其他的什么抗鼠的,二抗就是什么抗兔的,比如说羊抗兔之类,一抗最好买国外的,二抗国内的就可以了
@宁饼3138：sp法中一抗、二抗指的是什么?
巢饼18538928808…… 一抗、二抗 一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体.即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体. 第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合. 第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体.主要用于检测抗体的存在. e.g.利...
@宁饼3138：“第二抗体”和“二抗”的区别是什么? -
巢饼18538928808…… 第二抗体是抗人IgG(免疫球蛋白)抗体,针对不同抗原的人IgG抗体,它们的V区不同,所以只能与相应的抗原发生特异性结合,但C区是相同的,均含r链,因此第二抗体与之结合. 二抗:二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合...
@宁饼3138：什么是β - actin 基因 -
巢饼18538928808…… Actin即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白.同时Actin在细胞分泌、吞噬、 β-Actin 移动、胞质流动和胞质分离等过程中起重要作用.
@宁饼3138：一抗 - 间接免疫荧光问题?1、一抗和二抗分别是什么2、间接免疫荧光技术是?
巢饼18538928808…… 直接法是每个抗原的抗体都要荧光标记,而且荧光标记后可能会影响抗体效价甚至失效.所以有人就发明了间接法,这样只要对相应的抗原做出相应的抗体,再用标记好的二抗结合上就行了,不用每个抗体都要荧光标记,而且对一抗的效价影响甚微. 我自己的经验是,直接法跟间接法的结果差不多,敏感性并不像猜测的那么明显,所以直接法还是比间接法有优势
