westernblot的β+actin
@冯俩185：Western Blot都可以用beta - actin做内参吗? -
亢厕17375351207…… 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-actin 做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-actin起到几个作用: 1、如果目的蛋白检测不...
@冯俩185：做western blot时怎么做beta actin -
亢厕17375351207…… 是的,β-actin 是管家基因编码的细胞骨架蛋白,表达量在细胞内相对稳定,很少受到其他因素的影响,因此常被选作实验内参
@冯俩185：β - Actin抗体是Western Blot很好的内参指数,是啥意思?β - Actin在整个Western Blot的作用是什么?而且能不能详细介绍下Western Blot的抗体了?本人刚... - 作业帮
亢厕17375351207…… [答案] 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-Actin做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-Actin起到几个作用:1、如果目...
@冯俩185：什么是Westernblot? -
亢厕17375351207…… Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测. 一、原理 与Southern或Northern杂交方法类似,但...
@冯俩185：western blot内参抗体actin为什么出了好几条带 -
亢厕17375351207…… 首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置
@冯俩185：western blot的抗体怎么选择? -
亢厕17375351207…… 做原核表达蛋白western一个要注意的问题就是上样的蛋白不能太大,最好在100ng以下.以防止因为蛋白量太大引起非特异性信号.
@冯俩185：western blot 的marker是怎么定的 -
亢厕17375351207…… 电泳后会显示一个条带,这个散开的条带可以: 1 在SDS-PAGE中监测蛋白的迁移; 2 确认转膜效率; 3 根据marker的条带估计分子量; 4 确定目的蛋白位置.
@冯俩185：western blot 的内参不一致,急求助 -
亢厕17375351207…… 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候Western Blot做起来...
@冯俩185：关于western blot抗体的稀释western blot抗体用什么稀释? - 作业帮
亢厕17375351207…… [答案] 试剂公司有一抗和二抗稀释液买,这个比较好,可以反复用几次(用完4度保存).我们做的时候(其它一些人也是这样),有时用TBST,效果也可以.
@冯俩185：核蛋白的western blot 是能用B - action 作为内参吗 -
亢厕17375351207…… 核蛋白的western blot一般是不能用B-action作为内参的 因为beta-action是质内参,细胞核里没有的.核内参可以用Lamin B或者histone,前者分子量比较大,后者分子量比较小,看具体核蛋白的大小来选择.
亢厕17375351207…… 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-actin 做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-actin起到几个作用: 1、如果目的蛋白检测不...
@冯俩185：做western blot时怎么做beta actin -
亢厕17375351207…… 是的,β-actin 是管家基因编码的细胞骨架蛋白,表达量在细胞内相对稳定,很少受到其他因素的影响,因此常被选作实验内参
@冯俩185：β - Actin抗体是Western Blot很好的内参指数,是啥意思?β - Actin在整个Western Blot的作用是什么?而且能不能详细介绍下Western Blot的抗体了?本人刚... - 作业帮
亢厕17375351207…… [答案] 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-Actin做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-Actin起到几个作用:1、如果目...
@冯俩185：什么是Westernblot? -
亢厕17375351207…… Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测. 一、原理 与Southern或Northern杂交方法类似,但...
@冯俩185：western blot内参抗体actin为什么出了好几条带 -
亢厕17375351207…… 首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置
@冯俩185：western blot的抗体怎么选择? -
亢厕17375351207…… 做原核表达蛋白western一个要注意的问题就是上样的蛋白不能太大,最好在100ng以下.以防止因为蛋白量太大引起非特异性信号.
@冯俩185：western blot 的marker是怎么定的 -
亢厕17375351207…… 电泳后会显示一个条带,这个散开的条带可以: 1 在SDS-PAGE中监测蛋白的迁移; 2 确认转膜效率; 3 根据marker的条带估计分子量; 4 确定目的蛋白位置.
@冯俩185：western blot 的内参不一致,急求助 -
亢厕17375351207…… 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候Western Blot做起来...
@冯俩185：关于western blot抗体的稀释western blot抗体用什么稀释? - 作业帮
亢厕17375351207…… [答案] 试剂公司有一抗和二抗稀释液买,这个比较好,可以反复用几次(用完4度保存).我们做的时候(其它一些人也是这样),有时用TBST,效果也可以.
@冯俩185：核蛋白的western blot 是能用B - action 作为内参吗 -
亢厕17375351207…… 核蛋白的western blot一般是不能用B-action作为内参的 因为beta-action是质内参,细胞核里没有的.核内参可以用Lamin B或者histone,前者分子量比较大,后者分子量比较小,看具体核蛋白的大小来选择.
