western+blot图怎么看
@游疯1779：请教各位 western blot 的柱状图是怎么做出来的呢 -
魏哈19153099408…… 用Graphpad 绘图
@游疯1779：请教高手如何处理western blot 照片 -
魏哈19153099408…… 处理western blot 照片和其他照片没什么不一样 主要就是要把一些过深的背景去除掉,仅仅保留条带就可以了(千万不要伪造条带,学术造假很容易被查出来的) photoshop中有图像选项,其下拉菜单中有调整选项,由该选项可以拉出数个选项,其中一项是曲线,会出现一个对话框,该对话框的下部有三个并排的图标,分别表示将图像背景加深、适中、及变浅.将鼠标点击一下变浅的图标,再到图像的空白区域点一下就行了
@游疯1779：western blot 步骤是什么? -
魏哈19153099408…… 简单的说的话,可以大致分为8点:1. 收集蛋白样品2. 电泳3.转膜4.封闭5.一抗孵育 6.二抗孵育7.蛋白检测8.膜的重复利用,希望可以帮到你哦,你可以到网上找找啊
@游疯1779：用photoshop怎么分析western blot -
魏哈19153099408…… ps中用色阶调整局部颜色,只需要先选中需要调节的部分,再使用色阶命令即可,方法如下:选中需要调整的部分(下图需要把背景调亮,选中鸟以外的部分)ctrl+l调出色阶命令,调整如下参数.(调整时图片会实时变化,便于参考)调整好参数点确定,最终效果如下,除鸟以外,其它地方变亮了很多.
@游疯1779：western blot显色方法有哪几种 -
魏哈19153099408…… 有很多种显示方法,其中HRP、化学发光检测(ECL、SuperSignal)居多,DAB显色很少见.主要分为两大类,分别介绍如下:化学发光Chemiluminescent:随着各大厂家努力开发研制灵敏度更高的发光底物,化学发光法的灵敏度已经达到pg级别,甚至还有 Femto级别的,灵敏度超过了同位素;底物显色Colormetirc/Chromogen:直接显色而操作简便且成本低.最为大家熟悉当数辣根过氧化物酶HRP(Horseradish Peroxidase,属于过氧化物酶POD类)和碱性磷酸酶AP(Alkaline Phosphatase):荧光标记显色:义翘大多WB抗体检测方式,见下图
@游疯1779：western blot如何分析结果?
魏哈19153099408…… 用ImageJ或者别的什么图像处理软件计算每个条带的灰度或者白度,有的曝光软件自己就带这个功能,以此来半定量蛋白的表达水平,然后相互之间做比较
@游疯1779：western blot的具体步骤? -
魏哈19153099408…… (PS 楼主可以百度嘛,网上关于WB的实验太多了) Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测. 一...
@游疯1779：Westernblot法的显色方法有几种? -
魏哈19153099408…… Westernblot法(即蛋白质印迹法)是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中时常会用到的一种实验方法.通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息.(如:伯乐生命的印迹膜上总蛋白检测).Westernblot法显色的方法只要有四种,分别是放射自显影、底物化学发光ECL、底物荧光ECF与底物DAB呈色.
@游疯1779：如何处理western blot的图片的背景 -
魏哈19153099408…… 可以试试在冰箱敷二抗,即和一抗一样四度过夜,效果很好.
@游疯1779：western blot 怎么消除背景? -
魏哈19153099408…… 1.用10%BSA或者10%全血清封闭.2.孵育完抗体后要反复洗膜,多洗几次.3.选择特异性高地抗体.4.保持膜的湿润,涂显色底物时尽量涂均匀.如果你用的底物很灵敏,要少加.
魏哈19153099408…… 用Graphpad 绘图
@游疯1779：请教高手如何处理western blot 照片 -
魏哈19153099408…… 处理western blot 照片和其他照片没什么不一样 主要就是要把一些过深的背景去除掉,仅仅保留条带就可以了(千万不要伪造条带,学术造假很容易被查出来的) photoshop中有图像选项,其下拉菜单中有调整选项,由该选项可以拉出数个选项,其中一项是曲线,会出现一个对话框,该对话框的下部有三个并排的图标,分别表示将图像背景加深、适中、及变浅.将鼠标点击一下变浅的图标,再到图像的空白区域点一下就行了
@游疯1779：western blot 步骤是什么? -
魏哈19153099408…… 简单的说的话,可以大致分为8点:1. 收集蛋白样品2. 电泳3.转膜4.封闭5.一抗孵育 6.二抗孵育7.蛋白检测8.膜的重复利用,希望可以帮到你哦,你可以到网上找找啊
@游疯1779：用photoshop怎么分析western blot -
魏哈19153099408…… ps中用色阶调整局部颜色,只需要先选中需要调节的部分,再使用色阶命令即可,方法如下:选中需要调整的部分(下图需要把背景调亮,选中鸟以外的部分)ctrl+l调出色阶命令,调整如下参数.(调整时图片会实时变化,便于参考)调整好参数点确定,最终效果如下,除鸟以外,其它地方变亮了很多.
@游疯1779：western blot显色方法有哪几种 -
魏哈19153099408…… 有很多种显示方法,其中HRP、化学发光检测(ECL、SuperSignal)居多,DAB显色很少见.主要分为两大类,分别介绍如下:化学发光Chemiluminescent:随着各大厂家努力开发研制灵敏度更高的发光底物,化学发光法的灵敏度已经达到pg级别,甚至还有 Femto级别的,灵敏度超过了同位素;底物显色Colormetirc/Chromogen:直接显色而操作简便且成本低.最为大家熟悉当数辣根过氧化物酶HRP(Horseradish Peroxidase,属于过氧化物酶POD类)和碱性磷酸酶AP(Alkaline Phosphatase):荧光标记显色:义翘大多WB抗体检测方式,见下图
@游疯1779：western blot如何分析结果?
魏哈19153099408…… 用ImageJ或者别的什么图像处理软件计算每个条带的灰度或者白度,有的曝光软件自己就带这个功能,以此来半定量蛋白的表达水平,然后相互之间做比较
@游疯1779：western blot的具体步骤? -
魏哈19153099408…… (PS 楼主可以百度嘛,网上关于WB的实验太多了) Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测. 一...
@游疯1779：Westernblot法的显色方法有几种? -
魏哈19153099408…… Westernblot法(即蛋白质印迹法)是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中时常会用到的一种实验方法.通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息.(如:伯乐生命的印迹膜上总蛋白检测).Westernblot法显色的方法只要有四种,分别是放射自显影、底物化学发光ECL、底物荧光ECF与底物DAB呈色.
@游疯1779：如何处理western blot的图片的背景 -
魏哈19153099408…… 可以试试在冰箱敷二抗,即和一抗一样四度过夜,效果很好.
@游疯1779：western blot 怎么消除背景? -
魏哈19153099408…… 1.用10%BSA或者10%全血清封闭.2.孵育完抗体后要反复洗膜,多洗几次.3.选择特异性高地抗体.4.保持膜的湿润,涂显色底物时尽量涂均匀.如果你用的底物很灵敏,要少加.
