western+blot主要应用

@刘易3302:western blot是干什么的 -
蓝章17370057409…… Western Blot中文一般称为蛋白质印迹.它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法.其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色.通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息.

@刘易3302:western blot 步骤是什么? -
蓝章17370057409…… 简单的说的话,可以大致分为8点:1. 收集蛋白样品2. 电泳3.转膜4.封闭5.一抗孵育 6.二抗孵育7.蛋白检测8.膜的重复利用,希望可以帮到你哦,你可以到网上找找啊

@刘易3302:western blot的实验原理(详细的) -
蓝章17370057409…… Western Blot与Southern印迹杂交或Northern印迹杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗. 经过PAGE分离的蛋白质样品(跑PAGE 胶的原理你懂吧~~~),转移到固相载体(硝酸纤维素膜NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变(这个过程就是转膜). 以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分.该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达.

@刘易3302:western blot显色方法有哪几种 -
蓝章17370057409…… 有很多种显示方法,其中HRP、化学发光检测(ECL、SuperSignal)居多,DAB显色很少见.主要分为两大类,分别介绍如下:化学发光Chemiluminescent:随着各大厂家努力开发研制灵敏度更高的发光底物,化学发光法的灵敏度已经达到pg级别,甚至还有 Femto级别的,灵敏度超过了同位素;底物显色Colormetirc/Chromogen:直接显色而操作简便且成本低.最为大家熟悉当数辣根过氧化物酶HRP(Horseradish Peroxidase,属于过氧化物酶POD类)和碱性磷酸酶AP(Alkaline Phosphatase):荧光标记显色:义翘大多WB抗体检测方式,见下图

@刘易3302:为什么要用western blot -
蓝章17370057409…… 印迹法(blotting)是指将样品转移到固相载体上, 而后利用相应的探测反应来检测样品的一种方法. 1975年,Southern建立了将DNA转移到硝酸纤维素膜(NC膜)上, 并利用DNA-DNA杂交检测特定的DNA片段的方法, 随后人们用这位发现...

@刘易3302:western blot 的目的 -
蓝章17370057409…… 通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息.

@刘易3302:什么是Westernblot? -
蓝章17370057409…… Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测. 一、原理 与Southern或Northern杂交方法类似,但...

@刘易3302:Westernblot法的显色方法有几种? -
蓝章17370057409…… Westernblot法(即蛋白质印迹法)是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中时常会用到的一种实验方法.通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息.(如:伯乐生命的印迹膜上总蛋白检测).Westernblot法显色的方法只要有四种,分别是放射自显影、底物化学发光ECL、底物荧光ECF与底物DAB呈色.

@刘易3302:Western blot实验需要准备什么试剂和耗材 -
蓝章17370057409…… Western blot实验需要准备试剂和耗材主要有: 蛋白抽提试剂 BCA蛋白定量试剂盒 5*还原样品缓冲液 10*电泳缓冲液 蓝染色液 10*TBST pH8.0 湿转缓冲液 PVDF膜,0.22um孔径 染色液 PMSF 蛋白酶抑制剂 封闭液 ECL发光液 一抗抗体 二抗抗体详情请点击:https://labstime.taobao.com/

@刘易3302:我想知道Western Blot技术的应用及意义是什么 - 作业帮
蓝章17370057409…… [答案] Western Blot与Southern印迹杂交或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗.经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维...

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