β+actin受热
@龙黄5109：请教F - actin和β -
卫湛15034526530…… G-actin和β-actin是同一种基因的蛋白质异形体.G-actin聚合组成F-actin.F-actin通常出现在肌肉中,而β-actin与F-actin最大的区别就在于β-actin是不被用在肌肉中的.虽然它们都被用于细胞能动性.
@龙黄5109：Western Blot都可以用beta - actin做内参吗? -
卫湛15034526530…… 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-actin 做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-actin起到几个作用: 1、如果目的蛋白检测不...
@龙黄5109：我想做PCR内参选beta - actin还是GAPDH好 -
卫湛15034526530…… 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD.一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上 另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参
@龙黄5109：什么是β - actin 基因 -
卫湛15034526530…… Actin即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白.同时Actin在细胞分泌、吞噬、 β-Actin 移动、胞质流动和胞质分离等过程中起重要作用.
@龙黄5109：β - action基因是什么 -
卫湛15034526530…… β-Actin是横纹肌肌纤维中的一种主要蛋白质成分,也是肌肉细丝及细胞骨架微丝的主要成分.具有收缩功能,分布广泛. http://baike.baidu.com/view/4083940.htm β-Actin基因就是编码这种蛋白的基因.
@龙黄5109：western blot内参抗体actin为什么出了好几条带 -
卫湛15034526530…… 首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置
@龙黄5109：western blot结果中的actin怎么了 -
卫湛15034526530…… 需要加beta-actin的一抗,beta-actin分子量42,如果您的蛋白也是差不多大小,那么需要上两次样品,分别做您的目的蛋白和beta-actin,当然您如果做熟练了也可以上一次样,先做目的抗体,压片后strip膜再做beta-actin.如果您的目的蛋白在其他位置,那更方便,上一次样,封闭后把膜裁开,分别加您的目的蛋白一抗和beta-actin的一抗.
@龙黄5109：以actin为内参,同种细胞不同处理,蛋白会产生变化吗 -
卫湛15034526530…… 用内参照是为了评价你的各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致,通常使用一些看家蛋白,比如β-actin、GAPDH等等.这些蛋白在所有细胞中的表达量基本一致,所以用他们来作为你加样量的对照.这样western结果中你的目的蛋白经过处理后...
@龙黄5109：做western blot时怎么做beta actin -
卫湛15034526530…… 是的,β-actin 是管家基因编码的细胞骨架蛋白,表达量在细胞内相对稳定,很少受到其他因素的影响,因此常被选作实验内参
@龙黄5109：【求助】为什么做PCR要做β -
卫湛15034526530…… β-actin是什么意思?为什么叫β-actin内参?在做PCR或者荧光定量PCR时为什么要做β-actin内参对照?如果没有做内参结果就不可靠吗?即使跑胶的效果很好.谢谢各位师兄师姐的指教β-actin即β肌动蛋白,是actin家族的一员,在维持细胞结构,细胞内运动,细胞分裂等细胞生理活动方面发挥着重要的作用,它是管家基因中的一种.管家基因 (house-keeping genes):是指所有细胞中均要. 表达的一类基因,其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的.例如β-actin、GAPDH等.在进行半定量PCR时,选择管家基因可以通过计算目的基因和内参的比值,得到基因表达的相对浓度.
卫湛15034526530…… G-actin和β-actin是同一种基因的蛋白质异形体.G-actin聚合组成F-actin.F-actin通常出现在肌肉中,而β-actin与F-actin最大的区别就在于β-actin是不被用在肌肉中的.虽然它们都被用于细胞能动性.
@龙黄5109：Western Blot都可以用beta - actin做内参吗? -
卫湛15034526530…… 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-actin 做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-actin起到几个作用: 1、如果目的蛋白检测不...
@龙黄5109：我想做PCR内参选beta - actin还是GAPDH好 -
卫湛15034526530…… 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD.一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上 另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参
@龙黄5109：什么是β - actin 基因 -
卫湛15034526530…… Actin即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白.同时Actin在细胞分泌、吞噬、 β-Actin 移动、胞质流动和胞质分离等过程中起重要作用.
@龙黄5109：β - action基因是什么 -
卫湛15034526530…… β-Actin是横纹肌肌纤维中的一种主要蛋白质成分,也是肌肉细丝及细胞骨架微丝的主要成分.具有收缩功能,分布广泛. http://baike.baidu.com/view/4083940.htm β-Actin基因就是编码这种蛋白的基因.
@龙黄5109：western blot内参抗体actin为什么出了好几条带 -
卫湛15034526530…… 首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置
@龙黄5109：western blot结果中的actin怎么了 -
卫湛15034526530…… 需要加beta-actin的一抗,beta-actin分子量42,如果您的蛋白也是差不多大小,那么需要上两次样品,分别做您的目的蛋白和beta-actin,当然您如果做熟练了也可以上一次样,先做目的抗体,压片后strip膜再做beta-actin.如果您的目的蛋白在其他位置,那更方便,上一次样,封闭后把膜裁开,分别加您的目的蛋白一抗和beta-actin的一抗.
@龙黄5109：以actin为内参,同种细胞不同处理,蛋白会产生变化吗 -
卫湛15034526530…… 用内参照是为了评价你的各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致,通常使用一些看家蛋白,比如β-actin、GAPDH等等.这些蛋白在所有细胞中的表达量基本一致,所以用他们来作为你加样量的对照.这样western结果中你的目的蛋白经过处理后...
@龙黄5109：做western blot时怎么做beta actin -
卫湛15034526530…… 是的,β-actin 是管家基因编码的细胞骨架蛋白,表达量在细胞内相对稳定,很少受到其他因素的影响,因此常被选作实验内参
@龙黄5109：【求助】为什么做PCR要做β -
卫湛15034526530…… β-actin是什么意思?为什么叫β-actin内参?在做PCR或者荧光定量PCR时为什么要做β-actin内参对照?如果没有做内参结果就不可靠吗?即使跑胶的效果很好.谢谢各位师兄师姐的指教β-actin即β肌动蛋白,是actin家族的一员,在维持细胞结构,细胞内运动,细胞分裂等细胞生理活动方面发挥着重要的作用,它是管家基因中的一种.管家基因 (house-keeping genes):是指所有细胞中均要. 表达的一类基因,其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的.例如β-actin、GAPDH等.在进行半定量PCR时,选择管家基因可以通过计算目的基因和内参的比值,得到基因表达的相对浓度.
