小麦内参基因actin
@訾厕2910：actin启动子 ubi启动子 对转基因小麦的表达哪个更好 -
能侧15061116734…… 启动转基因植物,最好从该植物中克隆该植物本身的启动子,这样对目的基因的表达会更好,你说的这两个启动子,actin主要用于动物来源基因的启动,ubi更多的用于植物,所以我觉得ubi更适合小麦转基因表达.
@訾厕2910：western blot内参抗体actin为什么出了好几条带 -
能侧15061116734…… 首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置
@訾厕2910：什么是内参基因?常用内参基因有哪些? - 作业帮
能侧15061116734…… [答案] 这个概念一般是用在定量PCR中.定量PCR是要检测某个基因的表达,降低或者提高,但是当你得出结果以后,你并不知道是它本身的表达降低/提高了,还是你操作过程中造成的误差(比如提RNA时的损失),所以这个时候需要同时检测另外的基因...
@訾厕2910：怎样检测actin基因在不同组织的表达量高低 -
能侧15061116734…… actin一般作为内参使用,意味着它的表达水平在多数细胞中是比较一致的.如果需要比较actin的话,就需要使用其他的内参了,比如GAPDH. 具体选择什么基因作为内参,就和你选取的组织有关,最好查阅一下文献,然后多选择几个内参比较一下.
@訾厕2910：以actin为内参,同种细胞不同处理,蛋白会产生变化吗 -
能侧15061116734…… 用内参照是为了评价你的各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致,通常使用一些看家蛋白,比如β-actin、GAPDH等等.这些蛋白在所有细胞中的表达量基本一致,所以用他们来作为你加样量的对照.这样western结果中你的目的蛋白经过处理后...
@訾厕2910：内参基因在植物的各组织中表达量都一致吗
能侧15061116734…… 不一定,一般内参基因(内对照基因)选用看家基因,如Actin基因在一些物种中地上和地下部会出现微小差异.如果做基因表达分析,同一器官或组织不同基因比较,以同部位的看家基因做内对照即可,如果不同部位或器官中某一基因的表达量对比,选择看家基因时要多参考一些文献,看选取的内对照基因是否有空间表达的明显差异.
@訾厕2910：常用的内参基因及其使用范围?请大家推荐生物方面的论坛 -
能侧15061116734…… 内参即是内部参照,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物 你可以去生物帮那里了解这方面的信息,那儿技术文档、视频资源丰富,我很喜欢到那里找想要的东西,而且还有很多软件可以下载,...
@訾厕2910：康为世纪的Actin内参怎么样?有人用过么?
能侧15061116734…… 可以啊,β-actin是一种持家蛋白,当然可以用作qPCR内参. 以上是对这个问题的回答,希望对您有帮助.
@訾厕2910：急急急,,用actin基因检测反转录结果,是什么个原理?请具体点,易懂点,谢谢.. -
能侧15061116734…… actin在各个组织里是组成型表达,并且表达量相对稳定、一致. 用它检查反转录结果原因有:1.因为是组成型表达,所以无论你是什么组织RNA反转,最后的cDNA里都含有actin,如果检测到了,说明反转没有问题,如果没有检测到,说明反转出了问题; 2.因为表达量相对稳定、一致,actin也可以作为检测反转效率有没有差异的一个标准,如果actin PCR的条带相对一致,说明这一系列的模板反转效率大体一致,可以用来做RT表达量比较. PS:actin并不是唯一的检测基因,一般都是配合ub7,tublin,18sRNA等看家基因一起检测.研究表明actin的表达量有一定的组织特异性.
能侧15061116734…… 启动转基因植物,最好从该植物中克隆该植物本身的启动子,这样对目的基因的表达会更好,你说的这两个启动子,actin主要用于动物来源基因的启动,ubi更多的用于植物,所以我觉得ubi更适合小麦转基因表达.
@訾厕2910：western blot内参抗体actin为什么出了好几条带 -
能侧15061116734…… 首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置
@訾厕2910：什么是内参基因?常用内参基因有哪些? - 作业帮
能侧15061116734…… [答案] 这个概念一般是用在定量PCR中.定量PCR是要检测某个基因的表达,降低或者提高,但是当你得出结果以后,你并不知道是它本身的表达降低/提高了,还是你操作过程中造成的误差(比如提RNA时的损失),所以这个时候需要同时检测另外的基因...
@訾厕2910：怎样检测actin基因在不同组织的表达量高低 -
能侧15061116734…… actin一般作为内参使用,意味着它的表达水平在多数细胞中是比较一致的.如果需要比较actin的话,就需要使用其他的内参了,比如GAPDH. 具体选择什么基因作为内参,就和你选取的组织有关,最好查阅一下文献,然后多选择几个内参比较一下.
@訾厕2910：以actin为内参,同种细胞不同处理,蛋白会产生变化吗 -
能侧15061116734…… 用内参照是为了评价你的各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致,通常使用一些看家蛋白,比如β-actin、GAPDH等等.这些蛋白在所有细胞中的表达量基本一致,所以用他们来作为你加样量的对照.这样western结果中你的目的蛋白经过处理后...
@訾厕2910：内参基因在植物的各组织中表达量都一致吗
能侧15061116734…… 不一定,一般内参基因(内对照基因)选用看家基因,如Actin基因在一些物种中地上和地下部会出现微小差异.如果做基因表达分析,同一器官或组织不同基因比较,以同部位的看家基因做内对照即可,如果不同部位或器官中某一基因的表达量对比,选择看家基因时要多参考一些文献,看选取的内对照基因是否有空间表达的明显差异.
@訾厕2910：常用的内参基因及其使用范围?请大家推荐生物方面的论坛 -
能侧15061116734…… 内参即是内部参照,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物 你可以去生物帮那里了解这方面的信息,那儿技术文档、视频资源丰富,我很喜欢到那里找想要的东西,而且还有很多软件可以下载,...
@訾厕2910：康为世纪的Actin内参怎么样?有人用过么?
能侧15061116734…… 可以啊,β-actin是一种持家蛋白,当然可以用作qPCR内参. 以上是对这个问题的回答,希望对您有帮助.
@訾厕2910：急急急,,用actin基因检测反转录结果,是什么个原理?请具体点,易懂点,谢谢.. -
能侧15061116734…… actin在各个组织里是组成型表达,并且表达量相对稳定、一致. 用它检查反转录结果原因有:1.因为是组成型表达,所以无论你是什么组织RNA反转,最后的cDNA里都含有actin,如果检测到了,说明反转没有问题,如果没有检测到,说明反转出了问题; 2.因为表达量相对稳定、一致,actin也可以作为检测反转效率有没有差异的一个标准,如果actin PCR的条带相对一致,说明这一系列的模板反转效率大体一致,可以用来做RT表达量比较. PS:actin并不是唯一的检测基因,一般都是配合ub7,tublin,18sRNA等看家基因一起检测.研究表明actin的表达量有一定的组织特异性.
