actin内参抗体

@娄杰5921:如何选择合适的细胞核内参抗体?
亓谭19310811639…… Actin是细胞骨架的主要成分,具有高度保守性,在细胞中的表达相对稳定,广泛表达于真核细胞中,大小在42kDa-43kDa之间.研究发现Actin可以调控细胞收缩、调节细胞分裂、细胞器移动、花粉管顶端生长等活动,在植物的幼芽、生长组织、花基、萌发的种子和花序中均稳定表达. 选择合适的植物内参,首先考虑样本来源,植物样本需要选用植物细胞表达稳定的蛋白比如Actin或者Rubisco作为内参;其次要考虑目的蛋白的分子量大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量相差5kD以上,例如某植物目的蛋白大小在50kD左右,就可以选用Actin作为WB实验的内参;最后,从特异性、稳定性以及效价方面考虑,建议选用单克隆抗体更好一些.

@娄杰5921:western blot内参抗体actin为什么出了好几条带 -
亓谭19310811639…… 首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置

@娄杰5921:elisa需要actin对照吗 -
亓谭19310811639…… WB中会设置内参,Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白.β-actin的蛋白水平通常不会发生改变,因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照.

@娄杰5921:Western Blot都可以用beta - actin做内参吗? -
亓谭19310811639…… 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-actin 做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-actin起到几个作用: 1、如果目的蛋白检测不...

@娄杰5921:线虫的actin有多少个氨基酸 -
亓谭19310811639…… 线虫的actin有多少个氨基酸 β-Actin是PCR常用的内参,β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数.内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白.它们在各组织和细胞中的表达相对恒...

@娄杰5921:β - Actin抗体是Western Blot很好的内参指数,是啥意思?β - Actin在整个Western Blot的作用是什么?而且能不能详细介绍下Western Blot的抗体了?本人刚... - 作业帮
亓谭19310811639…… [答案] 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-Actin做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-Actin起到几个作用:1、如果目...

@娄杰5921:以actin为内参,同种细胞不同处理,蛋白会产生变化吗 -
亓谭19310811639…… 用内参照是为了评价你的各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致,通常使用一些看家蛋白,比如β-actin、GAPDH等等.这些蛋白在所有细胞中的表达量基本一致,所以用他们来作为你加样量的对照.这样western结果中你的目的蛋白经过处理后...

@娄杰5921:beta Tubulin Antibody 的亚型beta I ,beta II ,beta III Tubulin Antibody 有什么不同? -
亓谭19310811639…… Actin即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白.同时Actin在细胞分泌、吞噬、移动、胞质流动和胞质分离等过程中起重要作用.Actin在不同物种之间高度保守,以至于很难获得较好的针对actin的抗血清.Actin大致可分为六种,其中四种是不同...

@娄杰5921:我想做PCR内参选beta - actin还是GAPDH好 -
亓谭19310811639…… 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD.一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上 另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参

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