荧光定量actin内参引物
@慕备4732：求助水稻的actin 内参基因引物 -
第卓19842026557…… 在这个专利文件里面有全长,引物你自己设计吧 http://www.google.com/patents/download/5641876_Rice_actin_gene_and_promoter.pdf?id=TEApAAAAEBAJ&output=pdf&sig=ACfU3U0XOeQP4z3gDHb20ne9M2PjiV14xg&source=gbs_overview_r&cad=0
@慕备4732：mirna的荧光定量pcr可以用actin做内参吗 -
第卓19842026557…… mirna的荧光定量pcr可以用actin做内参 miRNA通过与转录本的相互作用,关闭或抑制基因的表达. 最近的研究表明它们影响了约三成的基因. miRNA在多个组织中差异表达,这就让表达图谱分析成为研究的重点. 同时,miRNA的过表达和抑...
@慕备4732：荧光定量pcr结果出现的峰有很多个,不止一个,而且内参的峰也是很多个,内参的引物有人验证过可以用,这 -
第卓19842026557…… 溶解曲线不止一个主峰1、引物设计不佳:避免二聚体和发夹结构的出现;2、引物浓度不佳:适当调整引物浓度;3、退火温度低:提高退火温度;4、镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度;5、模板中有基因组的污染:通过引物设计避免非特异扩增.
@慕备4732：miRNA荧光定量PCR结果怎么看 -
第卓19842026557…… 荧光定量我用罗氏的反应速度算是相当快的,在样本处理(提出核酸)后,放在荧光定量PCR仪器上一般需要30分钟~1小时左右.但是如果你的样本比如支原体的含量非常高,可能在没有运行结束已经可以看出结果了,但是如果说5分钟就出结果了,确实太快了点.如果是realtime做表达量,用excel的制图,将每个个体的Ct值平均数做出柱状图就可以了.如果你还做了标曲的话,就用制图中的散点图看R2值. 其实这些功能做定量PCR的时候电脑程序应该会自动分析才对. 具体情况具体分析.
@慕备4732：实时荧光定量PCR的内参选择 -
第卓19842026557…… 现在大多数实验室定量检测BCR-ABL1时都是采用ABL1做内参,这时候理论上讲本来实验室直接的数据应该有可比性的.
@慕备4732：实时荧光定量PCR中两种引物的设计有什么要求 -
第卓19842026557…… 参照以下real-time PCR引物设计原则:1.最好位于编码区5'端的300-400bp区域内,可以用DNAman,Alignment 软件看看结果.2. 产物不能形成二级结构(自由能小于58.61KJ/mol).3.引物长度一般在17-25碱基之间,上下游引物不能相差太...
@慕备4732：荧光定量PCR的内参和目的基因一定要放一起吗 -
第卓19842026557…… 荧光定量PCR的内参和目的基因一定要放一起内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因,又叫看家基因,比如常用的GAPDH, actin.或者18s rRNA也可以.如果内参表达量一致,说明你PCR的上样量一致,样本的质量也一致.如果出入很大,说明你的样本的浓度或者是质量有问题.测到的目的基因的表达量就不可靠了
@慕备4732：荧光定量pcr常用的是什么方法 -
第卓19842026557…… 荧光定量pcr常用的是什么方法 用已知浓度的DNA样本(通常是质粒)梯度稀释成一系列的样本.做实验的时候,这些标准品和待测样本加在同样一块96孔盘的不同孔内.一起做PCR.标准品的荧光强度和已知的浓度作图,可以得到一条标准曲线.而待测样本的荧光强度测出以后,就可以在标准曲线上算出样本浓度了.
@慕备4732：通过rt - pcr怎么计算沉默效率 -
第卓19842026557…… 缩短暴光时间本来就使带变暗,如果再进一步缩短暴光时间,可能其他的带也不清楚了.还是考虑电泳体系的问题: 1. 首先考虑是你的电压可能有点高,降低电压后适当延长时间可以改善. 2. 2.胶灌的如何,MARKER好象有点变形 3. 3.加样问...
第卓19842026557…… 在这个专利文件里面有全长,引物你自己设计吧 http://www.google.com/patents/download/5641876_Rice_actin_gene_and_promoter.pdf?id=TEApAAAAEBAJ&output=pdf&sig=ACfU3U0XOeQP4z3gDHb20ne9M2PjiV14xg&source=gbs_overview_r&cad=0
@慕备4732：mirna的荧光定量pcr可以用actin做内参吗 -
第卓19842026557…… mirna的荧光定量pcr可以用actin做内参 miRNA通过与转录本的相互作用,关闭或抑制基因的表达. 最近的研究表明它们影响了约三成的基因. miRNA在多个组织中差异表达,这就让表达图谱分析成为研究的重点. 同时,miRNA的过表达和抑...
@慕备4732：荧光定量pcr结果出现的峰有很多个,不止一个,而且内参的峰也是很多个,内参的引物有人验证过可以用,这 -
第卓19842026557…… 溶解曲线不止一个主峰1、引物设计不佳:避免二聚体和发夹结构的出现;2、引物浓度不佳:适当调整引物浓度;3、退火温度低:提高退火温度;4、镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度;5、模板中有基因组的污染:通过引物设计避免非特异扩增.
@慕备4732：miRNA荧光定量PCR结果怎么看 -
第卓19842026557…… 荧光定量我用罗氏的反应速度算是相当快的,在样本处理(提出核酸)后,放在荧光定量PCR仪器上一般需要30分钟~1小时左右.但是如果你的样本比如支原体的含量非常高,可能在没有运行结束已经可以看出结果了,但是如果说5分钟就出结果了,确实太快了点.如果是realtime做表达量,用excel的制图,将每个个体的Ct值平均数做出柱状图就可以了.如果你还做了标曲的话,就用制图中的散点图看R2值. 其实这些功能做定量PCR的时候电脑程序应该会自动分析才对. 具体情况具体分析.
@慕备4732：实时荧光定量PCR的内参选择 -
第卓19842026557…… 现在大多数实验室定量检测BCR-ABL1时都是采用ABL1做内参,这时候理论上讲本来实验室直接的数据应该有可比性的.
@慕备4732：实时荧光定量PCR中两种引物的设计有什么要求 -
第卓19842026557…… 参照以下real-time PCR引物设计原则:1.最好位于编码区5'端的300-400bp区域内,可以用DNAman,Alignment 软件看看结果.2. 产物不能形成二级结构(自由能小于58.61KJ/mol).3.引物长度一般在17-25碱基之间,上下游引物不能相差太...
@慕备4732：荧光定量PCR的内参和目的基因一定要放一起吗 -
第卓19842026557…… 荧光定量PCR的内参和目的基因一定要放一起内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因,又叫看家基因,比如常用的GAPDH, actin.或者18s rRNA也可以.如果内参表达量一致,说明你PCR的上样量一致,样本的质量也一致.如果出入很大,说明你的样本的浓度或者是质量有问题.测到的目的基因的表达量就不可靠了
@慕备4732：荧光定量pcr常用的是什么方法 -
第卓19842026557…… 荧光定量pcr常用的是什么方法 用已知浓度的DNA样本(通常是质粒)梯度稀释成一系列的样本.做实验的时候,这些标准品和待测样本加在同样一块96孔盘的不同孔内.一起做PCR.标准品的荧光强度和已知的浓度作图,可以得到一条标准曲线.而待测样本的荧光强度测出以后,就可以在标准曲线上算出样本浓度了.
@慕备4732：通过rt - pcr怎么计算沉默效率 -
第卓19842026557…… 缩短暴光时间本来就使带变暗,如果再进一步缩短暴光时间,可能其他的带也不清楚了.还是考虑电泳体系的问题: 1. 首先考虑是你的电压可能有点高,降低电压后适当延长时间可以改善. 2. 2.胶灌的如何,MARKER好象有点变形 3. 3.加样问...
