拟南芥actin内参基因
@太泊4735:做RT - PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊? -
訾秀14757119393…… 内参的选择:普通PCR内参的大小没有多大要求,但real time一般选择300bp以下 它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时,加入的浓度可能会不一致,即使用分光广度计测其浓度,也会有仪器误差.PCR时,每个标本都要做对应的内参,...
@太泊4735:怎样将拟南芥ACTIN基因分类??很急!!! -
訾秀14757119393…… 【摘要】:鉴定了覆盖拟南芥、水稻和杨树3种模式植物全基因组的20个拟南芥、18个水稻、22个杨树ACTIN蛋白基因,对其染色体定位、基因结构、基因复制等进行了综合分析.并在系统进化分析基础上,将ACTIN基因家族分为12个亚家族,...
@太泊4735:内参基因在植物的各组织中表达量都一致吗
訾秀14757119393…… 不一定,一般内参基因(内对照基因)选用看家基因,如Actin基因在一些物种中地上和地下部会出现微小差异.如果做基因表达分析,同一器官或组织不同基因比较,以同部位的看家基因做内对照即可,如果不同部位或器官中某一基因的表达量对比,选择看家基因时要多参考一些文献,看选取的内对照基因是否有空间表达的明显差异.
@太泊4735:western blot内参抗体actin为什么出了好几条带 -
訾秀14757119393…… 首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置
@太泊4735:克隆未知基因的方法有哪些? -
訾秀14757119393…… 克隆方案(以拟南芥为例)(1)建立拟南芥诱变群体.采用拟南芥的化学诱变方法进行诱变处理:将约250mg野生型拟南芥种子用乙基甲磺酸(EMS)处理,得到M2代种子,供突变体筛选使用.该方法的优点是诱变率较高,操作过程比较简单...
@太泊4735:拟南芥做定量pcr用什么做内参引物 -
訾秀14757119393…… 一些看家基因吧,我所在实验室用的是肌动蛋白基因ACT
@太泊4735:提取拟南芥抗性基因的实验步骤 -
訾秀14757119393…… (1)首先要提取拟南芥DNA,或者RNA,如果是RNA的话还需要做个反转录从而得到cDNA. (2)如果你知道这个基因的序列,你可以设计上下游引物进行PCR. (3)如果你不知道这个基因的序列,你需要知道它是抗什么的基因,在NCBI上进行blast,找到与拟南芥这个基因相似性高的序列,比对它们的保守区,在保守区设计引物,基本能扩增出你要的这个基因.
@太泊4735:拟南芥基因基因位置标示啥意思 -
訾秀14757119393…… 【基因型】必须要用字母表示,这是规定!大写字母表示显性基因,小写字母表示隐性基因. 【遗传】(Heredity) 是指经由基因的传递,使后代获得亲代的特征. 生物遗传依靠DNA复制完成. DNA复制是指以亲代DNA分子为模板合成子代DNA过...
@太泊4735:拟南芥是遗传学研究的模式植物,某突变体可用于验证相关的基因的功能.野生型拟南芥的种皮为深褐色(TT) -
訾秀14757119393…… (1)此题主要考察转录过程中终止密码子作用.终止密码子不编码氨基酸,且终止转录,现终止密码子UGA变为AGA后可编码氨基酸,序列中AGA后为CUC也可编码氨基酸,再后者UAA为终止密码子,编码结束,即改变之后比原来序列多编码两个...
訾秀14757119393…… 内参的选择:普通PCR内参的大小没有多大要求,但real time一般选择300bp以下 它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时,加入的浓度可能会不一致,即使用分光广度计测其浓度,也会有仪器误差.PCR时,每个标本都要做对应的内参,...
@太泊4735:怎样将拟南芥ACTIN基因分类??很急!!! -
訾秀14757119393…… 【摘要】:鉴定了覆盖拟南芥、水稻和杨树3种模式植物全基因组的20个拟南芥、18个水稻、22个杨树ACTIN蛋白基因,对其染色体定位、基因结构、基因复制等进行了综合分析.并在系统进化分析基础上,将ACTIN基因家族分为12个亚家族,...
@太泊4735:内参基因在植物的各组织中表达量都一致吗
訾秀14757119393…… 不一定,一般内参基因(内对照基因)选用看家基因,如Actin基因在一些物种中地上和地下部会出现微小差异.如果做基因表达分析,同一器官或组织不同基因比较,以同部位的看家基因做内对照即可,如果不同部位或器官中某一基因的表达量对比,选择看家基因时要多参考一些文献,看选取的内对照基因是否有空间表达的明显差异.
@太泊4735:western blot内参抗体actin为什么出了好几条带 -
訾秀14757119393…… 首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置
@太泊4735:克隆未知基因的方法有哪些? -
訾秀14757119393…… 克隆方案(以拟南芥为例)(1)建立拟南芥诱变群体.采用拟南芥的化学诱变方法进行诱变处理:将约250mg野生型拟南芥种子用乙基甲磺酸(EMS)处理,得到M2代种子,供突变体筛选使用.该方法的优点是诱变率较高,操作过程比较简单...
@太泊4735:拟南芥做定量pcr用什么做内参引物 -
訾秀14757119393…… 一些看家基因吧,我所在实验室用的是肌动蛋白基因ACT
@太泊4735:提取拟南芥抗性基因的实验步骤 -
訾秀14757119393…… (1)首先要提取拟南芥DNA,或者RNA,如果是RNA的话还需要做个反转录从而得到cDNA. (2)如果你知道这个基因的序列,你可以设计上下游引物进行PCR. (3)如果你不知道这个基因的序列,你需要知道它是抗什么的基因,在NCBI上进行blast,找到与拟南芥这个基因相似性高的序列,比对它们的保守区,在保守区设计引物,基本能扩增出你要的这个基因.
@太泊4735:拟南芥基因基因位置标示啥意思 -
訾秀14757119393…… 【基因型】必须要用字母表示,这是规定!大写字母表示显性基因,小写字母表示隐性基因. 【遗传】(Heredity) 是指经由基因的传递,使后代获得亲代的特征. 生物遗传依靠DNA复制完成. DNA复制是指以亲代DNA分子为模板合成子代DNA过...
@太泊4735:拟南芥是遗传学研究的模式植物,某突变体可用于验证相关的基因的功能.野生型拟南芥的种皮为深褐色(TT) -
訾秀14757119393…… (1)此题主要考察转录过程中终止密码子作用.终止密码子不编码氨基酸,且终止转录,现终止密码子UGA变为AGA后可编码氨基酸,序列中AGA后为CUC也可编码氨基酸,再后者UAA为终止密码子,编码结束,即改变之后比原来序列多编码两个...