双元载体的构建原理
@司真2695：什么是二元载体? -
巢殃19377676478…… 我们一般构建的载体通常都是在一类实验材料中进行,当试验需要不同的实验材料时就需要双元载体来介导了,本人表述欠缺给你举个例子吧:做转基因植物是用到binary vector非常正常的,首先要拿到目的片段,这一系列的操作肯定也是在载...
@司真2695：关于双元载体我还想再问一些,,谢谢 -
巢殃19377676478…… 这是两个不同的概念.你要做农杆菌转化,必须使用Ti质粒,这种质粒中含有T-DNA,它可以携带你的目的片段进入植物体内.如常用的pCAMBIA1300系列质粒.双元载体就是含有两个抗性基因的载体,理论上说,任何载体都可以构建成双元载体,只要有两个抗性基因就行.这就不涉及哪个可以用,用哪个好的问题了.一般用来ATMT转化的载体,都含有两抗性基因,一个是用来大肠杆菌转化时用的抗性基因,如Amp,Kna等;另一个是ATMT转化后用来筛选的,如Hgromycin等.建议,你看一下相关农杆菌转化的综述,就会更清晰了.如果没有,我可以给你几篇.
@司真2695：双元表达载体系统的介绍 -
巢殃19377676478…… 双元表达载体系统,是一种计算机用语,用于缺失了T-DNA 区域.
@司真2695：转入农杆菌中基因的大小怎么计算 -
巢殃19377676478…… 用含有重组质粒的农杆菌去侵染植物根部切口:选择一种特制的空质粒载体(如PBI121质粒载体)、Hind Ⅲ和BamH I 等酶切位点(以上这些构成了一个T-DNA区).我们称这段T-DNA区为目的片段,从而构建成完整的重组质粒.此时重组质粒...
@司真2695：载体构建的原理和应用? -
巢殃19377676478…… 载体构建原理是DNA分子杂交技术 应用比如有抗虫棉应用
@司真2695：农杆菌转化法的步骤 -
巢殃19377676478…… 转化:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上——进入农杆菌——导入植物细胞——目的基因整合到植物染色体的DNA上——目的基因得以稳定维持和表达1、获取目的基因:用限制性核酸内切酶切割下目的基因.2、基因表达载体的构建:将目的基因...
@司真2695：请教一个双元表达载体的问题,双元表达载体系统代表农杆菌转化需要两个质粒吗? -
巢殃19377676478…… 双元表达载体系统其实是一个质粒,它包含两个部分,一个部分是能够被转移的T-DNA,另一个是能够帮助T-DNA转移的Vir区.T-DNA转移区是有左右边界的,在转基因时会在左右边界处断裂,只将左右边界以内的T-DNA区域整合到植物基因组中.
@司真2695：在dna水平上分析基因一级结构,拷贝数变化及在染色体上位置可以采用哪些方法 -
巢殃19377676478…… 鉴定转基因植物的第一步就是要确定被转基因已经稳定的整合到了染色体上.第二步任务就是评估有多少个转基因拷贝,以及每个转基因的表达水平如何.一般经过上游表达载体的设计构建以及下游转化体系的建立、转化品系的筛选鉴定等一系...
@司真2695：什么是构建载体? -
巢殃19377676478…… 基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心.将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程.如果以质粒作为运载体,首先要用一定的限制酶切割质粒,使...
@司真2695：如何构建一个基因的过表达载体 -
巢殃19377676478…… 当拿到一个基因的DNA片段后,就需要把它导入一个载体,一方面长期保存.另一方面也需要以载体为媒介将基因导入受体细胞中.基因表达载体的构建是基因工程的核心. 常用的载体有细菌质粒,噬菌体和动植物病毒.其中质粒载体最常用...
巢殃19377676478…… 我们一般构建的载体通常都是在一类实验材料中进行,当试验需要不同的实验材料时就需要双元载体来介导了,本人表述欠缺给你举个例子吧:做转基因植物是用到binary vector非常正常的,首先要拿到目的片段,这一系列的操作肯定也是在载...
@司真2695：关于双元载体我还想再问一些,,谢谢 -
巢殃19377676478…… 这是两个不同的概念.你要做农杆菌转化,必须使用Ti质粒,这种质粒中含有T-DNA,它可以携带你的目的片段进入植物体内.如常用的pCAMBIA1300系列质粒.双元载体就是含有两个抗性基因的载体,理论上说,任何载体都可以构建成双元载体,只要有两个抗性基因就行.这就不涉及哪个可以用,用哪个好的问题了.一般用来ATMT转化的载体,都含有两抗性基因,一个是用来大肠杆菌转化时用的抗性基因,如Amp,Kna等;另一个是ATMT转化后用来筛选的,如Hgromycin等.建议,你看一下相关农杆菌转化的综述,就会更清晰了.如果没有,我可以给你几篇.
@司真2695：双元表达载体系统的介绍 -
巢殃19377676478…… 双元表达载体系统,是一种计算机用语,用于缺失了T-DNA 区域.
@司真2695：转入农杆菌中基因的大小怎么计算 -
巢殃19377676478…… 用含有重组质粒的农杆菌去侵染植物根部切口:选择一种特制的空质粒载体(如PBI121质粒载体)、Hind Ⅲ和BamH I 等酶切位点(以上这些构成了一个T-DNA区).我们称这段T-DNA区为目的片段,从而构建成完整的重组质粒.此时重组质粒...
@司真2695：载体构建的原理和应用? -
巢殃19377676478…… 载体构建原理是DNA分子杂交技术 应用比如有抗虫棉应用
@司真2695：农杆菌转化法的步骤 -
巢殃19377676478…… 转化:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上——进入农杆菌——导入植物细胞——目的基因整合到植物染色体的DNA上——目的基因得以稳定维持和表达1、获取目的基因:用限制性核酸内切酶切割下目的基因.2、基因表达载体的构建:将目的基因...
@司真2695：请教一个双元表达载体的问题,双元表达载体系统代表农杆菌转化需要两个质粒吗? -
巢殃19377676478…… 双元表达载体系统其实是一个质粒,它包含两个部分,一个部分是能够被转移的T-DNA,另一个是能够帮助T-DNA转移的Vir区.T-DNA转移区是有左右边界的,在转基因时会在左右边界处断裂,只将左右边界以内的T-DNA区域整合到植物基因组中.
@司真2695：在dna水平上分析基因一级结构,拷贝数变化及在染色体上位置可以采用哪些方法 -
巢殃19377676478…… 鉴定转基因植物的第一步就是要确定被转基因已经稳定的整合到了染色体上.第二步任务就是评估有多少个转基因拷贝,以及每个转基因的表达水平如何.一般经过上游表达载体的设计构建以及下游转化体系的建立、转化品系的筛选鉴定等一系...
@司真2695：什么是构建载体? -
巢殃19377676478…… 基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心.将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程.如果以质粒作为运载体,首先要用一定的限制酶切割质粒,使...
@司真2695：如何构建一个基因的过表达载体 -
巢殃19377676478…… 当拿到一个基因的DNA片段后,就需要把它导入一个载体,一方面长期保存.另一方面也需要以载体为媒介将基因导入受体细胞中.基因表达载体的构建是基因工程的核心. 常用的载体有细菌质粒,噬菌体和动植物病毒.其中质粒载体最常用...
