双元载体系统详解
@从群3940：双元载体 - 搜狗百科
卓复18842963884…… 双元表达载体系统,是一种计算机用语,用于缺失了T-DNA 区域.
@从群3940：什么是二元载体? -
卓复18842963884…… 我们一般构建的载体通常都是在一类实验材料中进行,当试验需要不同的实验材料时就需要双元载体来介导了,本人表述欠缺给你举个例子吧:做转基因植物是用到binary vector非常正常的,首先要拿到目的片段,这一系列的操作肯定也是在载...
@从群3940：请教一个双元表达载体的问题,双元表达载体系统代表农杆菌转化需要两个质粒吗? -
卓复18842963884…… 双元表达载体系统其实是一个质粒,它包含两个部分,一个部分是能够被转移的T-DNA,另一个是能够帮助T-DNA转移的Vir区.T-DNA转移区是有左右边界的,在转基因时会在左右边界处断裂,只将左右边界以内的T-DNA区域整合到植物基因组中.
@从群3940：关于双元载体我还想再问一些,,谢谢 -
卓复18842963884…… 这是两个不同的概念.你要做农杆菌转化,必须使用Ti质粒,这种质粒中含有T-DNA,它可以携带你的目的片段进入植物体内.如常用的pCAMBIA1300系列质粒.双元载体就是含有两个抗性基因的载体,理论上说,任何载体都可以构建成双元载体,只要有两个抗性基因就行.这就不涉及哪个可以用,用哪个好的问题了.一般用来ATMT转化的载体,都含有两抗性基因,一个是用来大肠杆菌转化时用的抗性基因,如Amp,Kna等;另一个是ATMT转化后用来筛选的,如Hgromycin等.建议,你看一下相关农杆菌转化的综述,就会更清晰了.如果没有,我可以给你几篇.
@从群3940：为什么超双元载体系统可以使转基因植物剔除筛选标记基因 -
卓复18842963884…… 发明公开了一种剔除筛选标记基因的植物双元表达系统,由目的基因表达载体和筛选标记基因载体组成,可用于培育安全性转基因植物.用上述载体共转化植物,转录激活因子与顺式作用元件相结合,激活筛选标记基因的表达、剔除筛选标记基因简易方便的优点,达到对转基因植物进行筛选的目的,而在后代中由于减数分裂的作用,转录激活因子与有顺式作用元件及其下游的筛选标记基因发生分离,从而获得不含有筛选标记基因的转基因植株.该剔除筛选标记基因的植物转化方法具有共转化效率高,目的基因表达载体包括启动子及其下游的转录激活因子基因,以及一个多克隆位点;筛选标记基因载体包括所述转录激活因子识别的顺式作用元件及其下游的筛选标记基因
@从群3940：双元载体的定义 -
卓复18842963884…… sad asdasdad
@从群3940：中间克隆载体、中间转化载体、一元转化载体和双元转化载体分别是什么? -
卓复18842963884…… 根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)是一种能诱发植物产生肿瘤的细菌,根癌农杆菌中包含有一个诱导植物产生肿瘤的质粒(Tumor inducing plasmid),简称为Ti质粒.野生型农杆菌的Ti质粒,含有两个与致瘤有关的区域:一个是T-DNA...
@从群3940：农杆菌质粒 -
卓复18842963884…… 用PBI121的话应该是一般的双元载体系统.不知道你用的是什么农杆菌菌株,GV3101吗?农杆菌自带一个转染用的Ti质粒,但是我做的时候从没提出来过,Ti质粒应该很大的. 质粒大小不对,有两条带.不知道你做过重复没有.你如果不嫌麻烦可以重转一下农杆菌.也可以先做个酶切,看看酶切结果是不是正确.有的时候在菌里面同一个质粒的构像不一致就会跑出两条带,不过会挨得很近.酶切之后通常大小和带数就正确了.琼脂糖电泳就是这样!
卓复18842963884…… 双元表达载体系统,是一种计算机用语,用于缺失了T-DNA 区域.
@从群3940：什么是二元载体? -
卓复18842963884…… 我们一般构建的载体通常都是在一类实验材料中进行,当试验需要不同的实验材料时就需要双元载体来介导了,本人表述欠缺给你举个例子吧:做转基因植物是用到binary vector非常正常的,首先要拿到目的片段,这一系列的操作肯定也是在载...
@从群3940：请教一个双元表达载体的问题,双元表达载体系统代表农杆菌转化需要两个质粒吗? -
卓复18842963884…… 双元表达载体系统其实是一个质粒,它包含两个部分,一个部分是能够被转移的T-DNA,另一个是能够帮助T-DNA转移的Vir区.T-DNA转移区是有左右边界的,在转基因时会在左右边界处断裂,只将左右边界以内的T-DNA区域整合到植物基因组中.
@从群3940：关于双元载体我还想再问一些,,谢谢 -
卓复18842963884…… 这是两个不同的概念.你要做农杆菌转化,必须使用Ti质粒,这种质粒中含有T-DNA,它可以携带你的目的片段进入植物体内.如常用的pCAMBIA1300系列质粒.双元载体就是含有两个抗性基因的载体,理论上说,任何载体都可以构建成双元载体,只要有两个抗性基因就行.这就不涉及哪个可以用,用哪个好的问题了.一般用来ATMT转化的载体,都含有两抗性基因,一个是用来大肠杆菌转化时用的抗性基因,如Amp,Kna等;另一个是ATMT转化后用来筛选的,如Hgromycin等.建议,你看一下相关农杆菌转化的综述,就会更清晰了.如果没有,我可以给你几篇.
@从群3940：为什么超双元载体系统可以使转基因植物剔除筛选标记基因 -
卓复18842963884…… 发明公开了一种剔除筛选标记基因的植物双元表达系统,由目的基因表达载体和筛选标记基因载体组成,可用于培育安全性转基因植物.用上述载体共转化植物,转录激活因子与顺式作用元件相结合,激活筛选标记基因的表达、剔除筛选标记基因简易方便的优点,达到对转基因植物进行筛选的目的,而在后代中由于减数分裂的作用,转录激活因子与有顺式作用元件及其下游的筛选标记基因发生分离,从而获得不含有筛选标记基因的转基因植株.该剔除筛选标记基因的植物转化方法具有共转化效率高,目的基因表达载体包括启动子及其下游的转录激活因子基因,以及一个多克隆位点;筛选标记基因载体包括所述转录激活因子识别的顺式作用元件及其下游的筛选标记基因
@从群3940：双元载体的定义 -
卓复18842963884…… sad asdasdad
@从群3940：中间克隆载体、中间转化载体、一元转化载体和双元转化载体分别是什么? -
卓复18842963884…… 根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)是一种能诱发植物产生肿瘤的细菌,根癌农杆菌中包含有一个诱导植物产生肿瘤的质粒(Tumor inducing plasmid),简称为Ti质粒.野生型农杆菌的Ti质粒,含有两个与致瘤有关的区域:一个是T-DNA...
@从群3940：农杆菌质粒 -
卓复18842963884…… 用PBI121的话应该是一般的双元载体系统.不知道你用的是什么农杆菌菌株,GV3101吗?农杆菌自带一个转染用的Ti质粒,但是我做的时候从没提出来过,Ti质粒应该很大的. 质粒大小不对,有两条带.不知道你做过重复没有.你如果不嫌麻烦可以重转一下农杆菌.也可以先做个酶切,看看酶切结果是不是正确.有的时候在菌里面同一个质粒的构像不一致就会跑出两条带,不过会挨得很近.酶切之后通常大小和带数就正确了.琼脂糖电泳就是这样!
