为什么要构建双元载体系统
@胥丹1009：什么是二元载体? -
韩耍17148643971…… 我们一般构建的载体通常都是在一类实验材料中进行,当试验需要不同的实验材料时就需要双元载体来介导了,本人表述欠缺给你举个例子吧:做转基因植物是用到binary vector非常正常的,首先要拿到目的片段,这一系列的操作肯定也是在载...
@胥丹1009：双元表达载体系统的介绍 -
韩耍17148643971…… 双元表达载体系统,是一种计算机用语,用于缺失了T-DNA 区域.
@胥丹1009：为什么超双元载体系统可以使转基因植物剔除筛选标记基因 -
韩耍17148643971…… 发明公开了一种剔除筛选标记基因的植物双元表达系统,由目的基因表达载体和筛选标记基因载体组成,可用于培育安全性转基因植物.用上述载体共转化植物,转录激活因子与顺式作用元件相结合,激活筛选标记基因的表达、剔除筛选标记基因简易方便的优点,达到对转基因植物进行筛选的目的,而在后代中由于减数分裂的作用,转录激活因子与有顺式作用元件及其下游的筛选标记基因发生分离,从而获得不含有筛选标记基因的转基因植株.该剔除筛选标记基因的植物转化方法具有共转化效率高,目的基因表达载体包括启动子及其下游的转录激活因子基因,以及一个多克隆位点;筛选标记基因载体包括所述转录激活因子识别的顺式作用元件及其下游的筛选标记基因
@胥丹1009：关于双元载体我还想再问一些,,谢谢 -
韩耍17148643971…… 这是两个不同的概念.你要做农杆菌转化,必须使用Ti质粒,这种质粒中含有T-DNA,它可以携带你的目的片段进入植物体内.如常用的pCAMBIA1300系列质粒.双元载体就是含有两个抗性基因的载体,理论上说,任何载体都可以构建成双元载体,只要有两个抗性基因就行.这就不涉及哪个可以用,用哪个好的问题了.一般用来ATMT转化的载体,都含有两抗性基因,一个是用来大肠杆菌转化时用的抗性基因,如Amp,Kna等;另一个是ATMT转化后用来筛选的,如Hgromycin等.建议,你看一下相关农杆菌转化的综述,就会更清晰了.如果没有,我可以给你几篇.
@胥丹1009：请教一个双元表达载体的问题,双元表达载体系统代表农杆菌转化需要两个质粒吗?一个是含有插入位点能够插入目标基因的mini载体含有能够被转移的T - ... - 作业帮
韩耍17148643971…… [答案] 双元表达载体系统其实是一个质粒,它包含两个部分,一个部分是能够被转移的T-DNA,另一个是能够帮助T-DNA转移的Vir区.T-DNA转移区是有左右边界的,在转基因时会在左右边界处断裂,只将左右边界以内的T-DNA区域整合到植物基因组中.
@胥丹1009：为什么要构建植物载体、动物载体表达系统,而不是直接用细菌或酵母表达系统
韩耍17148643971…… 也不一定,关键看你要做什么. 比如,如果要研究蛋白的结构、蛋白与DNA及蛋白与蛋白的相互作用,就可以用细菌或酵母的表达系统.比如著名的酵母单杂交技术、酵母双杂交技术等. 但是,研究蛋白功能,特别是植物/动物蛋白的功能,很...
@胥丹1009：转入农杆菌中基因的大小怎么计算 -
韩耍17148643971…… 用含有重组质粒的农杆菌去侵染植物根部切口:选择一种特制的空质粒载体(如PBI121质粒载体)、Hind Ⅲ和BamH I 等酶切位点(以上这些构成了一个T-DNA区).我们称这段T-DNA区为目的片段,从而构建成完整的重组质粒.此时重组质粒...
@胥丹1009：载体构建的原理和应用? -
韩耍17148643971…… 载体构建原理是DNA分子杂交技术 应用比如有抗虫棉应用
@胥丹1009：酵母双杂交系统的介绍 -
韩耍17148643971…… 酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统.
@胥丹1009：为了更好研究HD1基因的亚细胞定位,我们构建了含有35s启动子:HD1 - GFP的双元载体 -
韩耍17148643971…… 这是动物还是植物细胞工程?看起来像植物,双元载体的话,质粒应该比较大,应该不是打基因枪或是原生质体了,一般是用农杆菌侵染烟草表皮瞬时转化吧.有很多protocol,我就提供一份我用过的吧:1 载体转化入农杆菌;2 工程...
韩耍17148643971…… 我们一般构建的载体通常都是在一类实验材料中进行,当试验需要不同的实验材料时就需要双元载体来介导了,本人表述欠缺给你举个例子吧:做转基因植物是用到binary vector非常正常的,首先要拿到目的片段,这一系列的操作肯定也是在载...
@胥丹1009：双元表达载体系统的介绍 -
韩耍17148643971…… 双元表达载体系统,是一种计算机用语,用于缺失了T-DNA 区域.
@胥丹1009：为什么超双元载体系统可以使转基因植物剔除筛选标记基因 -
韩耍17148643971…… 发明公开了一种剔除筛选标记基因的植物双元表达系统,由目的基因表达载体和筛选标记基因载体组成,可用于培育安全性转基因植物.用上述载体共转化植物,转录激活因子与顺式作用元件相结合,激活筛选标记基因的表达、剔除筛选标记基因简易方便的优点,达到对转基因植物进行筛选的目的,而在后代中由于减数分裂的作用,转录激活因子与有顺式作用元件及其下游的筛选标记基因发生分离,从而获得不含有筛选标记基因的转基因植株.该剔除筛选标记基因的植物转化方法具有共转化效率高,目的基因表达载体包括启动子及其下游的转录激活因子基因,以及一个多克隆位点;筛选标记基因载体包括所述转录激活因子识别的顺式作用元件及其下游的筛选标记基因
@胥丹1009：关于双元载体我还想再问一些,,谢谢 -
韩耍17148643971…… 这是两个不同的概念.你要做农杆菌转化,必须使用Ti质粒,这种质粒中含有T-DNA,它可以携带你的目的片段进入植物体内.如常用的pCAMBIA1300系列质粒.双元载体就是含有两个抗性基因的载体,理论上说,任何载体都可以构建成双元载体,只要有两个抗性基因就行.这就不涉及哪个可以用,用哪个好的问题了.一般用来ATMT转化的载体,都含有两抗性基因,一个是用来大肠杆菌转化时用的抗性基因,如Amp,Kna等;另一个是ATMT转化后用来筛选的,如Hgromycin等.建议,你看一下相关农杆菌转化的综述,就会更清晰了.如果没有,我可以给你几篇.
@胥丹1009：请教一个双元表达载体的问题,双元表达载体系统代表农杆菌转化需要两个质粒吗?一个是含有插入位点能够插入目标基因的mini载体含有能够被转移的T - ... - 作业帮
韩耍17148643971…… [答案] 双元表达载体系统其实是一个质粒,它包含两个部分,一个部分是能够被转移的T-DNA,另一个是能够帮助T-DNA转移的Vir区.T-DNA转移区是有左右边界的,在转基因时会在左右边界处断裂,只将左右边界以内的T-DNA区域整合到植物基因组中.
@胥丹1009：为什么要构建植物载体、动物载体表达系统,而不是直接用细菌或酵母表达系统
韩耍17148643971…… 也不一定,关键看你要做什么. 比如,如果要研究蛋白的结构、蛋白与DNA及蛋白与蛋白的相互作用,就可以用细菌或酵母的表达系统.比如著名的酵母单杂交技术、酵母双杂交技术等. 但是,研究蛋白功能,特别是植物/动物蛋白的功能,很...
@胥丹1009：转入农杆菌中基因的大小怎么计算 -
韩耍17148643971…… 用含有重组质粒的农杆菌去侵染植物根部切口:选择一种特制的空质粒载体(如PBI121质粒载体)、Hind Ⅲ和BamH I 等酶切位点(以上这些构成了一个T-DNA区).我们称这段T-DNA区为目的片段,从而构建成完整的重组质粒.此时重组质粒...
@胥丹1009：载体构建的原理和应用? -
韩耍17148643971…… 载体构建原理是DNA分子杂交技术 应用比如有抗虫棉应用
@胥丹1009：酵母双杂交系统的介绍 -
韩耍17148643971…… 酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统.
@胥丹1009：为了更好研究HD1基因的亚细胞定位,我们构建了含有35s启动子:HD1 - GFP的双元载体 -
韩耍17148643971…… 这是动物还是植物细胞工程?看起来像植物,双元载体的话,质粒应该比较大,应该不是打基因枪或是原生质体了,一般是用农杆菌侵染烟草表皮瞬时转化吧.有很多protocol,我就提供一份我用过的吧:1 载体转化入农杆菌;2 工程...
