5loading+buffer稀释
@桓浅446：电泳时loading buffer和样品DNA比例多少?实验室常用6x的,为毛有人用1:5,有人1:1呢?请大神解答,3Q~ -
尉建18930753499…… 这玩意,说白了就是溴酚蓝做一个参照,你不加都一样的能够跑出条带来,我从来都是1:10加的,没问题.所谓6X就是稀释6倍使用,你如果严格的话按1:5加.
@桓浅446：5*loading buffer和6*loading buffer 都可以用检测dna吗? -
尉建18930753499…… Loading buffer就是帮你把DNA沉到加样孔里,同时提供电泳时的色素指示,所以5X还是6X没什么关系,即使是用于蛋白的Loading buffer也满足这个需求.
@桓浅446：求助蛋白电泳1*loading buffer -
尉建18930753499…… 蛋白电泳1*loading buffer可以配制出来,但是却很难在实际使用的时候用上 比如说蛋白电泳5*loading buffer,在使用的时候也就是1个体积的loading buffer要加上4个体积的蛋白样品.这样最后的蛋白电泳loading buffer就被稀释到1*loading buffer 如果说1*loading buffer就是说1体积的loading buffer要加上0体积的蛋白样品,这样的loading buffer配制出来也没办法用.所以说蛋白电泳1*loading buffer是指应用时的情况,而不是配制的浓度
@桓浅446：SDS - PAGE 5Xloading buffer 配制过程,注意,问的不是配方,高手进 -
尉建18930753499…… 我想说以下几点: 1.SDS-PAGE loading buffer一般配成2X 的,5X loading buffer确实过于粘稠,且SDS在低温下难溶于水,这就导致你配的buffer“摇都摇不动”了 2.不知你为何要配那么多loading buffer(况且是5X的),这些东西都是用量很...
@桓浅446：DNA琼脂糖凝胶电泳的loading buffer作用是? -
尉建18930753499…… 作用:使DNA粘度增大,不要再点样中被漂离凝胶; 加入的指示剂 可指示前沿. 1*的浓度 是个经验.浓度太大,可能产生 DNA和buffer中物质难以分开,拖带;指示剂前沿太宽等 适当增加浓度 没问题,但没必要.
@桓浅446：哪位有6*Loading Buffer配方 -
尉建18930753499…… 蛋白质的SDS-PAGE一般只会配成5*的loading buffer DNA的会配成10*的 5*Loading Buffer 250mM Tris-HCl(pH6.8) 10%(W/V)SDS 0.5%(W/V)BPB 50%(V/V)甘油 5%(W/V)β-巯基乙醇 10*Loading buffer 30mM EDTA 50%(v/v) Glycerol 0.25%(w/v) X...
@桓浅446：蛋白电泳时直接使用4*loading buffer煮蛋白,有没有什么问题? -
尉建18930753499…… 按照比例加入,必然不会出现问题.loading buffer的主要成分是SDS,甘油,溴酚蓝,TRIS,其中甘油的作用是使样品沉到点样孔中而不漂浮起来,SDS是结合蛋白质,使所有蛋白质所带电荷性质一样,但不同分子量的蛋白结合的SDS数量是不一样的.溴酚蓝是指示剂,可以用来观察大概的电泳过程,因为它在不同浓度的胶中泳动的速率不一样,从而也可以看做是一个蛋白样品,这样就可以直观的大概了解蛋白泳动到了哪个位置,但是只能看一个大概
@桓浅446：DNA琼脂糖凝胶电泳的loading buffer作用是?6*的一定要稀释成1*的使用吗? - 作业帮
尉建18930753499…… [答案] 作用:使DNA粘度增大,不要再点样中被漂离凝胶; 加入的指示剂 可指示前沿. 1*的浓度 是个经验.浓度太大,可能产生 DNA和buffer中物质难以分开,拖带;指示剂前沿太宽等 适当增加浓度 没问题,但没必要.
@桓浅446：rna凝胶检测上样 加多少loading buffer -
尉建18930753499…… 和琼脂糖凝胶电泳的上样缓冲液一样 6*loading buffer 或10*loading buffer
@桓浅446：电泳时,6*Loading buffer为什么会跑有两条带,分别是什么呀 -
尉建18930753499…… 跑在前面的蓝色条带是溴酚蓝,位置大约相当于300bp的DNA,后面的绿色条带是二甲苯青FF,相当于4000bp左右大小DNA的位置.
尉建18930753499…… 这玩意,说白了就是溴酚蓝做一个参照,你不加都一样的能够跑出条带来,我从来都是1:10加的,没问题.所谓6X就是稀释6倍使用,你如果严格的话按1:5加.
@桓浅446：5*loading buffer和6*loading buffer 都可以用检测dna吗? -
尉建18930753499…… Loading buffer就是帮你把DNA沉到加样孔里,同时提供电泳时的色素指示,所以5X还是6X没什么关系,即使是用于蛋白的Loading buffer也满足这个需求.
@桓浅446：求助蛋白电泳1*loading buffer -
尉建18930753499…… 蛋白电泳1*loading buffer可以配制出来,但是却很难在实际使用的时候用上 比如说蛋白电泳5*loading buffer,在使用的时候也就是1个体积的loading buffer要加上4个体积的蛋白样品.这样最后的蛋白电泳loading buffer就被稀释到1*loading buffer 如果说1*loading buffer就是说1体积的loading buffer要加上0体积的蛋白样品,这样的loading buffer配制出来也没办法用.所以说蛋白电泳1*loading buffer是指应用时的情况,而不是配制的浓度
@桓浅446：SDS - PAGE 5Xloading buffer 配制过程,注意,问的不是配方,高手进 -
尉建18930753499…… 我想说以下几点: 1.SDS-PAGE loading buffer一般配成2X 的,5X loading buffer确实过于粘稠,且SDS在低温下难溶于水,这就导致你配的buffer“摇都摇不动”了 2.不知你为何要配那么多loading buffer(况且是5X的),这些东西都是用量很...
@桓浅446：DNA琼脂糖凝胶电泳的loading buffer作用是? -
尉建18930753499…… 作用:使DNA粘度增大,不要再点样中被漂离凝胶; 加入的指示剂 可指示前沿. 1*的浓度 是个经验.浓度太大,可能产生 DNA和buffer中物质难以分开,拖带;指示剂前沿太宽等 适当增加浓度 没问题,但没必要.
@桓浅446：哪位有6*Loading Buffer配方 -
尉建18930753499…… 蛋白质的SDS-PAGE一般只会配成5*的loading buffer DNA的会配成10*的 5*Loading Buffer 250mM Tris-HCl(pH6.8) 10%(W/V)SDS 0.5%(W/V)BPB 50%(V/V)甘油 5%(W/V)β-巯基乙醇 10*Loading buffer 30mM EDTA 50%(v/v) Glycerol 0.25%(w/v) X...
@桓浅446：蛋白电泳时直接使用4*loading buffer煮蛋白,有没有什么问题? -
尉建18930753499…… 按照比例加入,必然不会出现问题.loading buffer的主要成分是SDS,甘油,溴酚蓝,TRIS,其中甘油的作用是使样品沉到点样孔中而不漂浮起来,SDS是结合蛋白质,使所有蛋白质所带电荷性质一样,但不同分子量的蛋白结合的SDS数量是不一样的.溴酚蓝是指示剂,可以用来观察大概的电泳过程,因为它在不同浓度的胶中泳动的速率不一样,从而也可以看做是一个蛋白样品,这样就可以直观的大概了解蛋白泳动到了哪个位置,但是只能看一个大概
@桓浅446：DNA琼脂糖凝胶电泳的loading buffer作用是?6*的一定要稀释成1*的使用吗? - 作业帮
尉建18930753499…… [答案] 作用:使DNA粘度增大,不要再点样中被漂离凝胶; 加入的指示剂 可指示前沿. 1*的浓度 是个经验.浓度太大,可能产生 DNA和buffer中物质难以分开,拖带;指示剂前沿太宽等 适当增加浓度 没问题,但没必要.
@桓浅446：rna凝胶检测上样 加多少loading buffer -
尉建18930753499…… 和琼脂糖凝胶电泳的上样缓冲液一样 6*loading buffer 或10*loading buffer
@桓浅446：电泳时,6*Loading buffer为什么会跑有两条带,分别是什么呀 -
尉建18930753499…… 跑在前面的蓝色条带是溴酚蓝,位置大约相当于300bp的DNA,后面的绿色条带是二甲苯青FF,相当于4000bp左右大小DNA的位置.
