6dna+loading+buffer
@杨山4950：哪位有6*Loading Buffer配方 -
宣以13290704624…… 蛋白质的SDS-PAGE一般只会配成5*的loading buffer DNA的会配成10*的 5*Loading Buffer 250mM Tris-HCl(pH6.8) 10%(W/V)SDS 0.5%(W/V)BPB 50%(V/V)甘油 5%(W/V)β-巯基乙醇 10*Loading buffer 30mM EDTA 50%(v/v) Glycerol 0.25%(w/v) X...
@杨山4950：DNA琼脂糖凝胶电泳的loading buffer作用是? -
宣以13290704624…… 作用:使DNA粘度增大,不要再点样中被漂离凝胶; 加入的指示剂 可指示前沿. 1*的浓度 是个经验.浓度太大,可能产生 DNA和buffer中物质难以分开,拖带;指示剂前沿太宽等 适当增加浓度 没问题,但没必要.
@杨山4950：为什么在DNA电泳上样是要加六倍的上样缓冲液 -
宣以13290704624…… 加的是6*的loading buffer,不是说要加6倍的缓冲液,而是说加5微升的DNA样品,需要加1微升的6*上样缓冲液,这样6*的缓冲液被稀释成1*的了,1*才是缓冲液的工作浓度. 不懂的话再追问啊
@杨山4950：电泳时loading buffer和样品DNA比例多少 -
宣以13290704624…… 主要决定loading buffer的浓度,DNA样品上样buffer(商品化或者是实验室自己配置的)主要是6X的,如果你上样DNA的体积是10ul的话,你只需要加入2ul的6X loading buffer后,混匀上样即可.
@杨山4950：DNA琼脂糖凝胶电泳的loading buffer作用是?6*的一定要稀释成1*的使用吗? - 作业帮
宣以13290704624…… [答案] 作用:使DNA粘度增大,不要再点样中被漂离凝胶; 加入的指示剂 可指示前沿. 1*的浓度 是个经验.浓度太大,可能产生 DNA和buffer中物质难以分开,拖带;指示剂前沿太宽等 适当增加浓度 没问题,但没必要.
@杨山4950：电泳时,6*Loading buffer为什么会跑有两条带,分别是什么呀 -
宣以13290704624…… 跑在前面的蓝色条带是溴酚蓝,位置大约相当于300bp的DNA,后面的绿色条带是二甲苯青FF,相当于4000bp左右大小DNA的位置.
@杨山4950：5*loading buffer和6*loading buffer 都可以用检测dna吗? -
宣以13290704624…… Loading buffer就是帮你把DNA沉到加样孔里,同时提供电泳时的色素指示,所以5X还是6X没什么关系,即使是用于蛋白的Loading buffer也满足这个需求.
@杨山4950：loading buffer会不会对DNA造成损伤 -
宣以13290704624…… loading buffer中含一种或多种染料及甘油,主要作用是使DNA沉降在点样孔中和指示电泳距离. 正常情况下,是对DNA没有影响的.电泳后的DNA分子可以纯化后进行酶切、测序、构建载体等操作而不用担心DNA分子发生突变等. 值得注意的是,如果DNA分子需要继续分析,在用紫外灯时要注意,不能照射时间过长,否则会造成DNA分子突变. 仅供参考.
@杨山4950：电泳时loading buffer和样品DNA比例多少?实验室常用6x的,为毛有人用1:5,有人1:1呢?请大神解答,3Q~ -
宣以13290704624…… 这玩意,说白了就是溴酚蓝做一个参照,你不加都一样的能够跑出条带来,我从来都是1:10加的,没问题.所谓6X就是稀释6倍使用,你如果严格的话按1:5加.
@杨山4950：western 加错了DNA的 loading buffer ,怎么办,会造成什么样的影响,跪求 谢谢 -
宣以13290704624…… 肯定会影响的,会导致蛋白不能充分电泳.蛋白buffer含SDS使蛋白带上负电荷,这样才能屏蔽电荷的影响,在SDS胶中以分子量不同做电泳.所以,导致样品中蛋白不能进行充分的电泳
宣以13290704624…… 蛋白质的SDS-PAGE一般只会配成5*的loading buffer DNA的会配成10*的 5*Loading Buffer 250mM Tris-HCl(pH6.8) 10%(W/V)SDS 0.5%(W/V)BPB 50%(V/V)甘油 5%(W/V)β-巯基乙醇 10*Loading buffer 30mM EDTA 50%(v/v) Glycerol 0.25%(w/v) X...
@杨山4950：DNA琼脂糖凝胶电泳的loading buffer作用是? -
宣以13290704624…… 作用:使DNA粘度增大,不要再点样中被漂离凝胶; 加入的指示剂 可指示前沿. 1*的浓度 是个经验.浓度太大,可能产生 DNA和buffer中物质难以分开,拖带;指示剂前沿太宽等 适当增加浓度 没问题,但没必要.
@杨山4950：为什么在DNA电泳上样是要加六倍的上样缓冲液 -
宣以13290704624…… 加的是6*的loading buffer,不是说要加6倍的缓冲液,而是说加5微升的DNA样品,需要加1微升的6*上样缓冲液,这样6*的缓冲液被稀释成1*的了,1*才是缓冲液的工作浓度. 不懂的话再追问啊
@杨山4950：电泳时loading buffer和样品DNA比例多少 -
宣以13290704624…… 主要决定loading buffer的浓度,DNA样品上样buffer(商品化或者是实验室自己配置的)主要是6X的,如果你上样DNA的体积是10ul的话,你只需要加入2ul的6X loading buffer后,混匀上样即可.
@杨山4950：DNA琼脂糖凝胶电泳的loading buffer作用是?6*的一定要稀释成1*的使用吗? - 作业帮
宣以13290704624…… [答案] 作用:使DNA粘度增大,不要再点样中被漂离凝胶; 加入的指示剂 可指示前沿. 1*的浓度 是个经验.浓度太大,可能产生 DNA和buffer中物质难以分开,拖带;指示剂前沿太宽等 适当增加浓度 没问题,但没必要.
@杨山4950：电泳时,6*Loading buffer为什么会跑有两条带,分别是什么呀 -
宣以13290704624…… 跑在前面的蓝色条带是溴酚蓝,位置大约相当于300bp的DNA,后面的绿色条带是二甲苯青FF,相当于4000bp左右大小DNA的位置.
@杨山4950：5*loading buffer和6*loading buffer 都可以用检测dna吗? -
宣以13290704624…… Loading buffer就是帮你把DNA沉到加样孔里,同时提供电泳时的色素指示,所以5X还是6X没什么关系,即使是用于蛋白的Loading buffer也满足这个需求.
@杨山4950：loading buffer会不会对DNA造成损伤 -
宣以13290704624…… loading buffer中含一种或多种染料及甘油,主要作用是使DNA沉降在点样孔中和指示电泳距离. 正常情况下,是对DNA没有影响的.电泳后的DNA分子可以纯化后进行酶切、测序、构建载体等操作而不用担心DNA分子发生突变等. 值得注意的是,如果DNA分子需要继续分析,在用紫外灯时要注意,不能照射时间过长,否则会造成DNA分子突变. 仅供参考.
@杨山4950：电泳时loading buffer和样品DNA比例多少?实验室常用6x的,为毛有人用1:5,有人1:1呢?请大神解答,3Q~ -
宣以13290704624…… 这玩意,说白了就是溴酚蓝做一个参照,你不加都一样的能够跑出条带来,我从来都是1:10加的,没问题.所谓6X就是稀释6倍使用,你如果严格的话按1:5加.
@杨山4950：western 加错了DNA的 loading buffer ,怎么办,会造成什么样的影响,跪求 谢谢 -
宣以13290704624…… 肯定会影响的,会导致蛋白不能充分电泳.蛋白buffer含SDS使蛋白带上负电荷,这样才能屏蔽电荷的影响,在SDS胶中以分子量不同做电泳.所以,导致样品中蛋白不能进行充分的电泳
