bcl2蛋白wb条带kd
@骆仲4208：做wb的bax和bcl - 2的目的蛋白时会出现时间长的细胞凋亡而导致内参出不来吗 -
费胖18980573149…… α-平滑肌肌动蛋白是23kD. 1、如果是提取的总蛋白,然后做WB,用β-actin或者GAPDH做内参肯定是没有问题的,这是公认的东西. 2、如果用膜蛋白提取试剂盒提取蛋白,再用β-actin作为内参似乎不妥,因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的.WB能做出β-actin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了.然而,如果我们试验目的是用药物处理细胞,比较处理前后某种膜蛋白的表达情况,此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做内参似乎就不妥了,因为你根本不知道药物处理前后混杂了多少的胞质蛋白进来.如果没有胞质蛋白混进去的话,β-actin就是检测不到的.
@骆仲4208：请教Western blotting!我要做WB检测凋亡蛋白bcl - 2、fas、p53表达,请问能否在一张膜上加一抗时把三种蛋白的一抗都一起加?另外,做完SDS - PAGE电泳... - 作业帮
费胖18980573149…… [答案] 楼主赶着出结果吗?三步并作两步,两步毁成一步……个人强烈不建议三种ist antibody加在一起,因为这样做,三种抗体的nonspecific bands会重叠,遮盖需要分辨的蛋白.除非,你能确定这三种抗体的基质特异性非常高,否则,洗出...
@骆仲4208：琼脂糖凝胶电泳marker的作用 -
费胖18980573149…… 你好,琼脂糖凝胶电泳marker是用来做参考的,类似于标尺的作用.marker会跑出很多条带,对应带的片段长度是一定的(不同的marker,不同,可以查询);通过找到与样品平齐的带,可以间接地判定样品的片段长度.这是我个人的理解,不知道描述清楚了没.
@骆仲4208：抗凋亡蛋白bcl - 2是如何磷酸化而失去抗凋亡活性的?
费胖18980573149…… BCL-2基因是如何抑制凋亡的?一般研究提示,有以下几种可能:(1)在细胞凋亡中钙离子起着很重要的作用,细胞凋亡中的DNA消化,需要相关的钙离子依赖性核酸内切酶的参与,而BCL-2可以抑制内质网释放钙离子,使依赖于钙离子的核...
@骆仲4208：Bcl - 2与Bax是蛋白还是基因
费胖18980573149…… bcl-2和bax既可以表示基因也可以表示蛋白 两个蛋白都可以通过相应的抗体进行WB检测
@骆仲4208：bcl - 2的敏感凋亡 -
费胖18980573149…… Bcl-2可以抑制由多种细胞毒因素所引起的细胞死亡.Bcl-2的过度表达能增强所观察细胞对大多数细胞毒素的抵抗性.这一发现使人们认识到凋亡的各种信号转导途径有一个共同的通路或交汇点,而该通路或交汇点受Bcl-2调节.实验表明,Bcl-2...
@骆仲4208：我想做PCR内参选beta - actin还是GAPDH好 -
费胖18980573149…… 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD.一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上 另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参
@骆仲4208：Bcl - 2与Bax两种蛋白结构的差异是什么? -
费胖18980573149…… bcl-2基因家族及其相关蛋白bcl-2是研究最早的 与凋亡有关的基因,也是目前最受重视的调控细胞凋亡的基 因家族.按其对细胞凋亡的作用及同源结构分为3个亚家 族:(1)具有BH1-4保守结构区域,对细胞凋亡起抑制作 用,如bcl-2,Bcl-xl,Mcl-1...
@骆仲4208：BAX是什么意思? -
费胖18980573149…… BAX是与BCL-2同源的水溶性相关蛋白,是BCL-2基因家族中细胞凋亡促进基因,BAX的过度表达可拮抗BCL-2的保护效应而使细胞趋于死亡.目前多和BCL-2一起用于肿瘤的研究[1]. 中文名 BCL2-Associated X的蛋白质 外文名 BAX BAX属于...
@骆仲4208：请问生物化学KD是什么意思,经常看到一些文献中写到＂65KD抗原＂,＂250KD蛋白＂等 这些都是什么意思呢? -
费胖18980573149…… KD是千道尔顿. 道尔顿是一种质量单位,又叫相对原子质量单位. 65KD抗原,就是说这种抗原的相对分子质量是65000 250KD蛋白质,就是说这种蛋白质的相对分子质量是250000 准确的说,千道尔顿的符号应该是kD,k是小写,表示“千”
费胖18980573149…… α-平滑肌肌动蛋白是23kD. 1、如果是提取的总蛋白,然后做WB,用β-actin或者GAPDH做内参肯定是没有问题的,这是公认的东西. 2、如果用膜蛋白提取试剂盒提取蛋白,再用β-actin作为内参似乎不妥,因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的.WB能做出β-actin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了.然而,如果我们试验目的是用药物处理细胞,比较处理前后某种膜蛋白的表达情况,此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做内参似乎就不妥了,因为你根本不知道药物处理前后混杂了多少的胞质蛋白进来.如果没有胞质蛋白混进去的话,β-actin就是检测不到的.
@骆仲4208：请教Western blotting!我要做WB检测凋亡蛋白bcl - 2、fas、p53表达,请问能否在一张膜上加一抗时把三种蛋白的一抗都一起加?另外,做完SDS - PAGE电泳... - 作业帮
费胖18980573149…… [答案] 楼主赶着出结果吗?三步并作两步,两步毁成一步……个人强烈不建议三种ist antibody加在一起,因为这样做,三种抗体的nonspecific bands会重叠,遮盖需要分辨的蛋白.除非,你能确定这三种抗体的基质特异性非常高,否则,洗出...
@骆仲4208：琼脂糖凝胶电泳marker的作用 -
费胖18980573149…… 你好,琼脂糖凝胶电泳marker是用来做参考的,类似于标尺的作用.marker会跑出很多条带,对应带的片段长度是一定的(不同的marker,不同,可以查询);通过找到与样品平齐的带,可以间接地判定样品的片段长度.这是我个人的理解,不知道描述清楚了没.
@骆仲4208：抗凋亡蛋白bcl - 2是如何磷酸化而失去抗凋亡活性的?
费胖18980573149…… BCL-2基因是如何抑制凋亡的?一般研究提示,有以下几种可能:(1)在细胞凋亡中钙离子起着很重要的作用,细胞凋亡中的DNA消化,需要相关的钙离子依赖性核酸内切酶的参与,而BCL-2可以抑制内质网释放钙离子,使依赖于钙离子的核...
@骆仲4208：Bcl - 2与Bax是蛋白还是基因
费胖18980573149…… bcl-2和bax既可以表示基因也可以表示蛋白 两个蛋白都可以通过相应的抗体进行WB检测
@骆仲4208：bcl - 2的敏感凋亡 -
费胖18980573149…… Bcl-2可以抑制由多种细胞毒因素所引起的细胞死亡.Bcl-2的过度表达能增强所观察细胞对大多数细胞毒素的抵抗性.这一发现使人们认识到凋亡的各种信号转导途径有一个共同的通路或交汇点,而该通路或交汇点受Bcl-2调节.实验表明,Bcl-2...
@骆仲4208：我想做PCR内参选beta - actin还是GAPDH好 -
费胖18980573149…… 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD.一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上 另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参
@骆仲4208：Bcl - 2与Bax两种蛋白结构的差异是什么? -
费胖18980573149…… bcl-2基因家族及其相关蛋白bcl-2是研究最早的 与凋亡有关的基因,也是目前最受重视的调控细胞凋亡的基 因家族.按其对细胞凋亡的作用及同源结构分为3个亚家 族:(1)具有BH1-4保守结构区域,对细胞凋亡起抑制作 用,如bcl-2,Bcl-xl,Mcl-1...
@骆仲4208：BAX是什么意思? -
费胖18980573149…… BAX是与BCL-2同源的水溶性相关蛋白,是BCL-2基因家族中细胞凋亡促进基因,BAX的过度表达可拮抗BCL-2的保护效应而使细胞趋于死亡.目前多和BCL-2一起用于肿瘤的研究[1]. 中文名 BCL2-Associated X的蛋白质 外文名 BAX BAX属于...
@骆仲4208：请问生物化学KD是什么意思,经常看到一些文献中写到＂65KD抗原＂,＂250KD蛋白＂等 这些都是什么意思呢? -
费胖18980573149…… KD是千道尔顿. 道尔顿是一种质量单位,又叫相对原子质量单位. 65KD抗原,就是说这种抗原的相对分子质量是65000 250KD蛋白质,就是说这种蛋白质的相对分子质量是250000 准确的说,千道尔顿的符号应该是kD,k是小写,表示“千”
