rna提取后4+保存多久
@蓬桦833：提取出来的microRNA可以在 - 80°C条件下储存多久不会降解,并且还可以继续RT - pcr -
墨良13864672594…… 你是提了总RNA 然后想检测miRNA么 如果是已经用DEPC水溶了 那三周就差不多了 不超过一个月 不然就不准了
@蓬桦833：取完组织后,如果不想立刻抽RNA,可以将样品放在负二十度的冰箱里面吗? -
墨良13864672594…… 可以,不过要尽快做,那样不是长久保存样本的方法.最好保存在液氮中或者用这个经验配方进行长期保存:新鲜组织(用于提取核酸)最好保存于含5...
@蓬桦833：提取RNA,用水溶解后跑胶,跑胶这段时间RNA要保存在那里啊, -
墨良13864672594…… 几个小时放在冰上没问题!我现在正在做这个! 如果你当天还要用rna做下一步试验的话就别冻起来,冻融循环也会导致其少量降解,如果下一步提取mrna的话直接用是最好的啦!
@蓬桦833：提取RNA的血清如何冻存 -
墨良13864672594…… 、组织样品采集 1. 首先准备好用于包装样品的铝箔或冷冻保存管,并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表多处写明样品编号. 2. 准确切除所需组织. 3. 离体新鲜组织,立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型. 4. 在RNase-free ...
@蓬桦833：用于提取RNA新鲜组织如何保存 -
墨良13864672594…… 市场上有一种非冰型RNA样品保存液.有些公司叫RNAwait,或者还有别的名称,你可以了解一下. 很多公司都有的. 非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)是一种在较高温度下保存动物组织及细胞RNA样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞...
@蓬桦833：我想采集提rna的样品,在解剖后可以用冰冷冻一段时间再采样吗, -
墨良13864672594…… 根据我的经验,其实RNA也没有传说中的那么容易降解,组织中RNA含量很高,即使降解也降解不了多少,就可以直接放在4度冰箱,你也可以做个实验对比看看4度存放与液氮存放所提取的RNA差距有多大.并不建议放在-20度,这个存放时间最好不要超过一个星期.如果你实在担心RNA降解,那就放在液氮中.
@蓬桦833：Trizol法提取流感病毒 RNA -
墨良13864672594…… 1、取200ul样品数+阴性对照+阳性对照加入1.5ml灭菌eppendorf管; 2、加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀; 3、13000rpm离心15min; 4、在第3步离心快结束时,另取同样多eppendorf管,加入400ul于-20℃...
@蓬桦833：很简单的一个问题,关于rna提取的...
墨良13864672594…… 我只做过液氮研磨,不太清楚你们的细胞研磨器是啥...是匀浆器?按照他给的protocol的做法是先称10mg样品,放到1.5mL ep里,再加500mL LY,再匀浆,充分混合后取上清(他没说,但我觉得可以离心),然后上DNA柱.LY中要加入beta巯基乙醇,抑制RNase,否则RNA极易降解. 我们做液氮研磨则是先取样品,研磨,研磨成粉之后称取合适的质量,然后加裂解液,充分混合后离心取上清.你看你们那里的条件选择合适的做法吧.
@蓬桦833：采集提取RNA所需样品可以用冰块吗 -
墨良13864672594…… 最好加一些试剂吧 否则降解很快的 sigma公司的RNAlater 迅速渗入新鲜组织细胞的胞浆中, 抑制RNA分子的降解. 使新鲜组织细胞中RNA的完整性在37℃下保存一天, 在25℃下保存一周, 4℃下保存一个月, 在-20℃或-80℃下长期保存.RNA病毒样品(如HCV和HIV)可在37℃保存一个月. 如果采集后的时间足够短的话 用冰块也是没有问题的 条件允许的话装一小瓶液氮过去
@蓬桦833：mRNA提取注意事项 -
墨良13864672594…… 1. 防止样本降解.液氮速冻或者RNALater保存液保存 2.防止RNA酶污染,可以加抑制剂 3.迅速操作 4.提取后尽快进行下一步实验,mRNA不宜存放于水溶液冻存.
墨良13864672594…… 你是提了总RNA 然后想检测miRNA么 如果是已经用DEPC水溶了 那三周就差不多了 不超过一个月 不然就不准了
@蓬桦833：取完组织后,如果不想立刻抽RNA,可以将样品放在负二十度的冰箱里面吗? -
墨良13864672594…… 可以,不过要尽快做,那样不是长久保存样本的方法.最好保存在液氮中或者用这个经验配方进行长期保存:新鲜组织(用于提取核酸)最好保存于含5...
@蓬桦833：提取RNA,用水溶解后跑胶,跑胶这段时间RNA要保存在那里啊, -
墨良13864672594…… 几个小时放在冰上没问题!我现在正在做这个! 如果你当天还要用rna做下一步试验的话就别冻起来,冻融循环也会导致其少量降解,如果下一步提取mrna的话直接用是最好的啦!
@蓬桦833：提取RNA的血清如何冻存 -
墨良13864672594…… 、组织样品采集 1. 首先准备好用于包装样品的铝箔或冷冻保存管,并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表多处写明样品编号. 2. 准确切除所需组织. 3. 离体新鲜组织,立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型. 4. 在RNase-free ...
@蓬桦833：用于提取RNA新鲜组织如何保存 -
墨良13864672594…… 市场上有一种非冰型RNA样品保存液.有些公司叫RNAwait,或者还有别的名称,你可以了解一下. 很多公司都有的. 非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)是一种在较高温度下保存动物组织及细胞RNA样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞...
@蓬桦833：我想采集提rna的样品,在解剖后可以用冰冷冻一段时间再采样吗, -
墨良13864672594…… 根据我的经验,其实RNA也没有传说中的那么容易降解,组织中RNA含量很高,即使降解也降解不了多少,就可以直接放在4度冰箱,你也可以做个实验对比看看4度存放与液氮存放所提取的RNA差距有多大.并不建议放在-20度,这个存放时间最好不要超过一个星期.如果你实在担心RNA降解,那就放在液氮中.
@蓬桦833：Trizol法提取流感病毒 RNA -
墨良13864672594…… 1、取200ul样品数+阴性对照+阳性对照加入1.5ml灭菌eppendorf管; 2、加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀; 3、13000rpm离心15min; 4、在第3步离心快结束时,另取同样多eppendorf管,加入400ul于-20℃...
@蓬桦833：很简单的一个问题,关于rna提取的...
墨良13864672594…… 我只做过液氮研磨,不太清楚你们的细胞研磨器是啥...是匀浆器?按照他给的protocol的做法是先称10mg样品,放到1.5mL ep里,再加500mL LY,再匀浆,充分混合后取上清(他没说,但我觉得可以离心),然后上DNA柱.LY中要加入beta巯基乙醇,抑制RNase,否则RNA极易降解. 我们做液氮研磨则是先取样品,研磨,研磨成粉之后称取合适的质量,然后加裂解液,充分混合后离心取上清.你看你们那里的条件选择合适的做法吧.
@蓬桦833：采集提取RNA所需样品可以用冰块吗 -
墨良13864672594…… 最好加一些试剂吧 否则降解很快的 sigma公司的RNAlater 迅速渗入新鲜组织细胞的胞浆中, 抑制RNA分子的降解. 使新鲜组织细胞中RNA的完整性在37℃下保存一天, 在25℃下保存一周, 4℃下保存一个月, 在-20℃或-80℃下长期保存.RNA病毒样品(如HCV和HIV)可在37℃保存一个月. 如果采集后的时间足够短的话 用冰块也是没有问题的 条件允许的话装一小瓶液氮过去
@蓬桦833：mRNA提取注意事项 -
墨良13864672594…… 1. 防止样本降解.液氮速冻或者RNALater保存液保存 2.防止RNA酶污染,可以加抑制剂 3.迅速操作 4.提取后尽快进行下一步实验,mRNA不宜存放于水溶液冻存.
