rna放在4度多久会降解
@谷庞4756：rna粗提后在4℃溶解4小时会降解吗? -
从古19418834209…… 不会
@谷庞4756：提取RNA,用depc水溶解4度一般要多长时间 -
从古19418834209…… 溶菌酶比较稳定的,酸碱耐受性都挺好,所以直接用te溶解就可以了,配成20mg/ml的储存浓度,使用的时候终浓度1-2mg/ml就行了. tris直接用depc水配就可以了.
@谷庞4756：我想采集提rna的样品,在解剖后可以用冰冷冻一段时间再采样吗, -
从古19418834209…… 根据我的经验,其实RNA也没有传说中的那么容易降解,组织中RNA含量很高,即使降解也降解不了多少,就可以直接放在4度冰箱,你也可以做个实验对比看看4度存放与液氮存放所提取的RNA差距有多大.并不建议放在-20度,这个存放时间最好不要超过一个星期.如果你实在担心RNA降解,那就放在液氮中.
@谷庞4756：质粒DNA在4度条件下保存,会降解吗,大约多久开始降解?降解率高吗? -
从古19418834209…… 一般可以忽略它的降解,我们必须知道DNA作为遗传物质,它是十分稳定的.在4度的话更加稳定,长时间放置一年半载的肯定没问题.放到-20度的话更好.
@谷庞4756：提取RNA,用水溶解后跑胶,跑胶这段时间RNA要保存在那里啊, -
从古19418834209…… 几个小时放在冰上没问题!我现在正在做这个! 如果你当天还要用rna做下一步试验的话就别冻起来,冻融循环也会导致其少量降解,如果下一步提取mrna的话直接用是最好的啦!
@谷庞4756：取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 -
从古19418834209…… 取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 细胞在离体后数分钟后开始死亡,注意是开始死亡,其实还有好多细胞存活,RNA在体内就处于不断降解的过程中,离体后速度逐渐加快,所以速冻越快越好,但是也不用过于紧张,即使放上半小时里面还有完整RNA存在,只是比例很低了,如果用于做NORTHERN肯定不行,但如果做一些不是表达效率很低的基因的RT的话还有机会的(经验之谈). 至于DEPC洗的问题,由于上述原因,只要操作迅速,其实剪子之类意义不大,毕竟细胞释放的酶应该比剪子上带的多多了,当然,洗洗也没坏处,更保险
@谷庞4756：CTAB法提取RNA,氯化锂4度过夜沉淀RNA,时间过长会有什么影响? -
从古19418834209…… RNA容易降解,还有多糖多酚什么的杂质也容易跟着一起沉下来.做RNA最好快速,哪怕得率稍微低些也没事,但要保证质量高.一般我们做沉淀一个小时左右就行了,久了怕降解,后续试验容易出问题.
@谷庞4756：提取RNA,用水溶解后跑胶,跑胶这段时间RNA要保存在那里啊,还有就是RNA纯化后也要跑胶,在跑胶的这段时间里,RNA要放在哪?4度, - 20度,还是 - ... - 作业帮
从古19418834209…… [答案] 几个小时放在冰上没问题!我现在正在做这个!如果你当天还要用rna做下一步试验的话就别冻起来,冻融循环也会导致其少量降解,如果下一步提取mrna的话直接用是最好的啦!
@谷庞4756：RNA反转录cDNA时忘了拿出来在PCR仪里放了30分钟会降解吗,没有4°C - 作业帮
从古19418834209…… [答案] 一般新提的CDNA不会再这么短时间内讲解的,你体系没有问题的话就不会对CDNA造成影响.不放心的话提一点反映一下一看便知
@谷庞4756：RNAlong RNA长期保存液在选择上有啥窍门啊?哪家的好?
从古19418834209…… RNA性质不稳定,极易降解.溶解于无RNase 的TE 或水中的纯化RNA,即便是储存于-20 ºC也难免降解.为解决这一问题,可以将RNA 沉淀或RNA 溶液溶解于RNA 长期保存液中,可以允许RNA在4 ºC 过夜或-20 ºC 保存至少1 年而免于降解.RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的最佳选择.需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA,或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot. 目前选择这个都是北京博凌科为生物科技有限公司的
从古19418834209…… 不会
@谷庞4756：提取RNA,用depc水溶解4度一般要多长时间 -
从古19418834209…… 溶菌酶比较稳定的,酸碱耐受性都挺好,所以直接用te溶解就可以了,配成20mg/ml的储存浓度,使用的时候终浓度1-2mg/ml就行了. tris直接用depc水配就可以了.
@谷庞4756：我想采集提rna的样品,在解剖后可以用冰冷冻一段时间再采样吗, -
从古19418834209…… 根据我的经验,其实RNA也没有传说中的那么容易降解,组织中RNA含量很高,即使降解也降解不了多少,就可以直接放在4度冰箱,你也可以做个实验对比看看4度存放与液氮存放所提取的RNA差距有多大.并不建议放在-20度,这个存放时间最好不要超过一个星期.如果你实在担心RNA降解,那就放在液氮中.
@谷庞4756：质粒DNA在4度条件下保存,会降解吗,大约多久开始降解?降解率高吗? -
从古19418834209…… 一般可以忽略它的降解,我们必须知道DNA作为遗传物质,它是十分稳定的.在4度的话更加稳定,长时间放置一年半载的肯定没问题.放到-20度的话更好.
@谷庞4756：提取RNA,用水溶解后跑胶,跑胶这段时间RNA要保存在那里啊, -
从古19418834209…… 几个小时放在冰上没问题!我现在正在做这个! 如果你当天还要用rna做下一步试验的话就别冻起来,冻融循环也会导致其少量降解,如果下一步提取mrna的话直接用是最好的啦!
@谷庞4756：取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 -
从古19418834209…… 取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 细胞在离体后数分钟后开始死亡,注意是开始死亡,其实还有好多细胞存活,RNA在体内就处于不断降解的过程中,离体后速度逐渐加快,所以速冻越快越好,但是也不用过于紧张,即使放上半小时里面还有完整RNA存在,只是比例很低了,如果用于做NORTHERN肯定不行,但如果做一些不是表达效率很低的基因的RT的话还有机会的(经验之谈). 至于DEPC洗的问题,由于上述原因,只要操作迅速,其实剪子之类意义不大,毕竟细胞释放的酶应该比剪子上带的多多了,当然,洗洗也没坏处,更保险
@谷庞4756：CTAB法提取RNA,氯化锂4度过夜沉淀RNA,时间过长会有什么影响? -
从古19418834209…… RNA容易降解,还有多糖多酚什么的杂质也容易跟着一起沉下来.做RNA最好快速,哪怕得率稍微低些也没事,但要保证质量高.一般我们做沉淀一个小时左右就行了,久了怕降解,后续试验容易出问题.
@谷庞4756：提取RNA,用水溶解后跑胶,跑胶这段时间RNA要保存在那里啊,还有就是RNA纯化后也要跑胶,在跑胶的这段时间里,RNA要放在哪?4度, - 20度,还是 - ... - 作业帮
从古19418834209…… [答案] 几个小时放在冰上没问题!我现在正在做这个!如果你当天还要用rna做下一步试验的话就别冻起来,冻融循环也会导致其少量降解,如果下一步提取mrna的话直接用是最好的啦!
@谷庞4756：RNA反转录cDNA时忘了拿出来在PCR仪里放了30分钟会降解吗,没有4°C - 作业帮
从古19418834209…… [答案] 一般新提的CDNA不会再这么短时间内讲解的,你体系没有问题的话就不会对CDNA造成影响.不放心的话提一点反映一下一看便知
@谷庞4756：RNAlong RNA长期保存液在选择上有啥窍门啊?哪家的好?
从古19418834209…… RNA性质不稳定,极易降解.溶解于无RNase 的TE 或水中的纯化RNA,即便是储存于-20 ºC也难免降解.为解决这一问题,可以将RNA 沉淀或RNA 溶液溶解于RNA 长期保存液中,可以允许RNA在4 ºC 过夜或-20 ºC 保存至少1 年而免于降解.RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的最佳选择.需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA,或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot. 目前选择这个都是北京博凌科为生物科技有限公司的
