rna放室温几分钟会降解吗
@李健3588：rna提取怎么室温干燥 -
耿枝19423478997…… rna提取怎么室温干燥RNA提取步骤及注意事项(仅供参考):实验步骤如下:1.取50—100mg的组织,加入1ml Trizol试剂,用匀浆器打匀(Trizol先放于冰上).2.将匀浆室温放置5min.3.加入200μl氯仿,剧烈震荡混匀30s,冰上静置3min.4....
@李健3588：为什么提RNA时样品匀浆后室温放置5分钟 -
耿枝19423478997…… 你是使用Trizol法提取RNA吗?匀浆后,室温静置5分钟,可以使样品的核酸、蛋白质混合物得到充分的裂解.
@李健3588：提DNA的时候发现有很多RNA,怎样才能除去这些RNA -
耿枝19423478997…… 你看一下溶液的PH值是不是没调好,可能PH值小了吧,核酸的水解性质是:RNA对酸不敏感但遇碱水解,DNA遇碱不水解但遇酸水解.当然前提是你要确定没往里误加DNases(脱氧核糖核酸酶)把DNA给水解了. 要除去这些RNA,往里加RNases把RNA水解掉就可以了啊.
@李健3588：为什么提RNA时样品匀浆后室温放置5分钟 - 作业帮
耿枝19423478997…… [答案] 你是使用Trizol法提取RNA吗?匀浆后,室温静置5分钟,可以使样品的核酸、蛋白质混合物得到充分的裂解.
@李健3588：TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项? -
耿枝19423478997…… 三、Trizol法提取法(这是提禽流感病毒的步骤,供参考) Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.1、取鸡胚尿囊液,加入5-10倍体积Trizol液,混匀;2、室温放置5分钟,然后以每1ml Trizol液加...
@李健3588：呵呵,提取RNA过程? - 作业帮
耿枝19423478997…… [答案] 现在常用的是Trizol法. 提前将研钵、研棒、剪刀、镊子等用锡箔纸包好200度烘烤6小时,与实验前放到冰箱中预冷.枪头、... 整个处理过程必须带手套(最好带口罩),否则环境中的RNA酶会降解RNA. 1、取鲜样或者在-80度保存样品,液氮研磨样品...
@李健3588：怎么提取RNA? -
耿枝19423478997…… 我们实验室用的是TRIZOL试剂盒,原理就是先组织匀浆,然后将RNA与蛋白质等分离,这个用的是戊二醇,然后再用柱子加各种溶剂,各种12000r/min离心,多次离心之后,经过洗涤干燥,再溶于DEPC水就可以冷藏了. 整个实验中要注意尽量避免实验材料与空气接触,以免被RNA酶降解其中的RNA,要知道RNA酶可是无处不在啊,还有DEPC是有毒的(一般分子实验所用的都多多少少有毒...),所以要小心~
@李健3588：我想采集提rna的样品,在解剖后可以用冰冷冻一段时间再采样吗, -
耿枝19423478997…… 根据我的经验,其实RNA也没有传说中的那么容易降解,组织中RNA含量很高,即使降解也降解不了多少,就可以直接放在4度冰箱,你也可以做个实验对比看看4度存放与液氮存放所提取的RNA差距有多大.并不建议放在-20度,这个存放时间最好不要超过一个星期.如果你实在担心RNA降解,那就放在液氮中.
@李健3588：取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 -
耿枝19423478997…… 取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 细胞在离体后数分钟后开始死亡,注意是开始死亡,其实还有好多细胞存活,RNA在体内就处于不断降解的过程中,离体后速度逐渐加快,所以速冻越快越好,但是也不用过于紧张,即使放上半小时里面还有完整RNA存在,只是比例很低了,如果用于做NORTHERN肯定不行,但如果做一些不是表达效率很低的基因的RT的话还有机会的(经验之谈). 至于DEPC洗的问题,由于上述原因,只要操作迅速,其实剪子之类意义不大,毕竟细胞释放的酶应该比剪子上带的多多了,当然,洗洗也没坏处,更保险
@李健3588：细菌于 - 20度保存会影响rna提取吗? -
耿枝19423478997…… 细菌低温会裂解,释放的RNA酶虽在-20低温,依然会在一定程度上降解RNA;最好放置在-80度冰箱或者液氮.现有RNA litter产品,可以保存RNA样品.要求比较高的话,收集的样品应尽快提取RNA,不要放置保存.
耿枝19423478997…… rna提取怎么室温干燥RNA提取步骤及注意事项(仅供参考):实验步骤如下:1.取50—100mg的组织,加入1ml Trizol试剂,用匀浆器打匀(Trizol先放于冰上).2.将匀浆室温放置5min.3.加入200μl氯仿,剧烈震荡混匀30s,冰上静置3min.4....
@李健3588：为什么提RNA时样品匀浆后室温放置5分钟 -
耿枝19423478997…… 你是使用Trizol法提取RNA吗?匀浆后,室温静置5分钟,可以使样品的核酸、蛋白质混合物得到充分的裂解.
@李健3588：提DNA的时候发现有很多RNA,怎样才能除去这些RNA -
耿枝19423478997…… 你看一下溶液的PH值是不是没调好,可能PH值小了吧,核酸的水解性质是:RNA对酸不敏感但遇碱水解,DNA遇碱不水解但遇酸水解.当然前提是你要确定没往里误加DNases(脱氧核糖核酸酶)把DNA给水解了. 要除去这些RNA,往里加RNases把RNA水解掉就可以了啊.
@李健3588：为什么提RNA时样品匀浆后室温放置5分钟 - 作业帮
耿枝19423478997…… [答案] 你是使用Trizol法提取RNA吗?匀浆后,室温静置5分钟,可以使样品的核酸、蛋白质混合物得到充分的裂解.
@李健3588：TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项? -
耿枝19423478997…… 三、Trizol法提取法(这是提禽流感病毒的步骤,供参考) Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.1、取鸡胚尿囊液,加入5-10倍体积Trizol液,混匀;2、室温放置5分钟,然后以每1ml Trizol液加...
@李健3588：呵呵,提取RNA过程? - 作业帮
耿枝19423478997…… [答案] 现在常用的是Trizol法. 提前将研钵、研棒、剪刀、镊子等用锡箔纸包好200度烘烤6小时,与实验前放到冰箱中预冷.枪头、... 整个处理过程必须带手套(最好带口罩),否则环境中的RNA酶会降解RNA. 1、取鲜样或者在-80度保存样品,液氮研磨样品...
@李健3588：怎么提取RNA? -
耿枝19423478997…… 我们实验室用的是TRIZOL试剂盒,原理就是先组织匀浆,然后将RNA与蛋白质等分离,这个用的是戊二醇,然后再用柱子加各种溶剂,各种12000r/min离心,多次离心之后,经过洗涤干燥,再溶于DEPC水就可以冷藏了. 整个实验中要注意尽量避免实验材料与空气接触,以免被RNA酶降解其中的RNA,要知道RNA酶可是无处不在啊,还有DEPC是有毒的(一般分子实验所用的都多多少少有毒...),所以要小心~
@李健3588：我想采集提rna的样品,在解剖后可以用冰冷冻一段时间再采样吗, -
耿枝19423478997…… 根据我的经验,其实RNA也没有传说中的那么容易降解,组织中RNA含量很高,即使降解也降解不了多少,就可以直接放在4度冰箱,你也可以做个实验对比看看4度存放与液氮存放所提取的RNA差距有多大.并不建议放在-20度,这个存放时间最好不要超过一个星期.如果你实在担心RNA降解,那就放在液氮中.
@李健3588：取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 -
耿枝19423478997…… 取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 细胞在离体后数分钟后开始死亡,注意是开始死亡,其实还有好多细胞存活,RNA在体内就处于不断降解的过程中,离体后速度逐渐加快,所以速冻越快越好,但是也不用过于紧张,即使放上半小时里面还有完整RNA存在,只是比例很低了,如果用于做NORTHERN肯定不行,但如果做一些不是表达效率很低的基因的RT的话还有机会的(经验之谈). 至于DEPC洗的问题,由于上述原因,只要操作迅速,其实剪子之类意义不大,毕竟细胞释放的酶应该比剪子上带的多多了,当然,洗洗也没坏处,更保险
@李健3588：细菌于 - 20度保存会影响rna提取吗? -
耿枝19423478997…… 细菌低温会裂解,释放的RNA酶虽在-20低温,依然会在一定程度上降解RNA;最好放置在-80度冰箱或者液氮.现有RNA litter产品,可以保存RNA样品.要求比较高的话,收集的样品应尽快提取RNA,不要放置保存.
