cdna室温过夜会降解吗
@燕珊926：稀释的cDNA放在4°一天要紧吗? -
盖鲁13253418414…… 不要紧的,实验室的话一般样品保存4℃、-30℃的冰箱保存.如果你想保存久点,暂时用不到的话最好放在低温的冰箱.
@燕珊926：反转录后的cDNA能保存多久? -
盖鲁13253418414…… 这要看你们实验室的保存条件是什么!一般情况下将反转录产物稀释一部分放置-20℃用于日常实验,这部分面临的就是不停的冻融,它的保存时间一般也就2个月左右吧!另一部分剩余的cDNA可以保存在-80℃,它放置几年都没有问题!希望我的解释对你有帮助!
@燕珊926：RNA反转录cDNA时忘了拿出来在PCR仪里放了30分钟会降解吗,没有4°C - 作业帮
盖鲁13253418414…… [答案] 一般新提的CDNA不会再这么短时间内讲解的,你体系没有问题的话就不会对CDNA造成影响.不放心的话提一点反映一下一看便知
@燕珊926：请教下用cDNA作为模板跑PCR相关经验? -
盖鲁13253418414…… 你的引物是设计到这个基因编码区的什么位置的? 你考虑下是不是cDNA的降解问题. 还有你试验的时候降低退火温度,不要提高.提高更扩不出来了.
@燕珊926：蛋白样品放室温过夜还能用么 -
盖鲁13253418414…… 您好,您问的是蛋白样品放室温过夜还能用么?答案是可以的,但是有一些限制.首先,室温过夜只适用于短期的应用,一般不超过24小时.其次,蛋白样品必须在室温下保持干燥,否则可能会受到潮湿环境的影响,从而影响其稳定性.此外,蛋白样品在室温下过夜时,最好不要暴露在空气中,而是放在密封容器中,以防止氧化反应.另外,在室温下过夜时,蛋白样品的pH值也应该稳定,以免影响其活性.总之,蛋白样品在室温下过夜是可以的,但是要注意上述几点,以保证蛋白样品的稳定性和活性.
@燕珊926：零下40度保存了2年的cDNA还可以用吗,会不会降解严重 -
盖鲁13253418414…… rna不纯化做反转录,cdna容易降解. 是的,得到的是全体mrna的cdna的库.然后通过pcr手段获得需要的目的片段.但是实际操作过程中,由于mrna的降解,因此一次实验不可能得到全部的cdna,因此要重复1~2次,才能保证全部mrna被反转录为cdna. 核糖核酸(缩写为rna,即ribonucleic acid),存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体.rna由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子.一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成.rna的碱基主要有4种,即a腺嘌呤、g鸟嘌呤、c胞嘧啶、u尿嘧啶,其中,u(尿嘧啶)取代了dna中的t.
@燕珊926：提RNA的时候,用DNA酶I处理完为什么要将其失活?这步可否省略? -
盖鲁13253418414…… 1 不会.只要没有RNA酶就行.2 可以.这样可以省略失活步骤.3 PCR变性时间短,可能DNA酶I变性不完全,降解是不会的.专门处理一步较稳妥.
@燕珊926：你好,请问你做PCR之后出现弥散的带,现在解决了吗,怎么解决的?我用cDNA做模板,也出现这种情况. -
盖鲁13253418414…… 我也是用cDNA做模板的,没有出现过弥散带的情况,但经常出现非特异性条带.出现弥散带的原因可能是你在做凝胶电泳时电泳液被污染或者是做的胶有问题,也可能是你的cDNA部分降解了,至于降解的原因主要是由于时间和温度.扩增完...
@燕珊926：如何提取芦荟RNA 最好是苯酚法
盖鲁13253418414…… 动植物组织mRNA提取: 一、材料 水稻叶片或小鼠肝组织. 二、设备 研钵,冷冻台式高速离心机,低温冰箱,冷冻真空干燥器,紫外检测仪,电泳仪,电泳槽. 三、试剂 1、无RNA酶灭菌水:用将高温烘烤的玻璃瓶(180℃ 2小时)装蒸馏水...
@燕珊926：takara rr037a反转录试剂盒反转录出来的是单链cDNA还是双链cDNA? -
盖鲁13253418414…… 是单链cDNA,想合成双链cDNA需要另外操作: 一、cDNA第二链的合成: 1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物-20℃冰箱中保存,待电泳检测.其余的产物合并,混匀,然后顺序加入下列试剂(promega): 20ul 10*DNA Polymerase I buffer ...
盖鲁13253418414…… 不要紧的,实验室的话一般样品保存4℃、-30℃的冰箱保存.如果你想保存久点,暂时用不到的话最好放在低温的冰箱.
@燕珊926：反转录后的cDNA能保存多久? -
盖鲁13253418414…… 这要看你们实验室的保存条件是什么!一般情况下将反转录产物稀释一部分放置-20℃用于日常实验,这部分面临的就是不停的冻融,它的保存时间一般也就2个月左右吧!另一部分剩余的cDNA可以保存在-80℃,它放置几年都没有问题!希望我的解释对你有帮助!
@燕珊926：RNA反转录cDNA时忘了拿出来在PCR仪里放了30分钟会降解吗,没有4°C - 作业帮
盖鲁13253418414…… [答案] 一般新提的CDNA不会再这么短时间内讲解的,你体系没有问题的话就不会对CDNA造成影响.不放心的话提一点反映一下一看便知
@燕珊926：请教下用cDNA作为模板跑PCR相关经验? -
盖鲁13253418414…… 你的引物是设计到这个基因编码区的什么位置的? 你考虑下是不是cDNA的降解问题. 还有你试验的时候降低退火温度,不要提高.提高更扩不出来了.
@燕珊926：蛋白样品放室温过夜还能用么 -
盖鲁13253418414…… 您好,您问的是蛋白样品放室温过夜还能用么?答案是可以的,但是有一些限制.首先,室温过夜只适用于短期的应用,一般不超过24小时.其次,蛋白样品必须在室温下保持干燥,否则可能会受到潮湿环境的影响,从而影响其稳定性.此外,蛋白样品在室温下过夜时,最好不要暴露在空气中,而是放在密封容器中,以防止氧化反应.另外,在室温下过夜时,蛋白样品的pH值也应该稳定,以免影响其活性.总之,蛋白样品在室温下过夜是可以的,但是要注意上述几点,以保证蛋白样品的稳定性和活性.
@燕珊926：零下40度保存了2年的cDNA还可以用吗,会不会降解严重 -
盖鲁13253418414…… rna不纯化做反转录,cdna容易降解. 是的,得到的是全体mrna的cdna的库.然后通过pcr手段获得需要的目的片段.但是实际操作过程中,由于mrna的降解,因此一次实验不可能得到全部的cdna,因此要重复1~2次,才能保证全部mrna被反转录为cdna. 核糖核酸(缩写为rna,即ribonucleic acid),存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体.rna由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子.一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成.rna的碱基主要有4种,即a腺嘌呤、g鸟嘌呤、c胞嘧啶、u尿嘧啶,其中,u(尿嘧啶)取代了dna中的t.
@燕珊926：提RNA的时候,用DNA酶I处理完为什么要将其失活?这步可否省略? -
盖鲁13253418414…… 1 不会.只要没有RNA酶就行.2 可以.这样可以省略失活步骤.3 PCR变性时间短,可能DNA酶I变性不完全,降解是不会的.专门处理一步较稳妥.
@燕珊926：你好,请问你做PCR之后出现弥散的带,现在解决了吗,怎么解决的?我用cDNA做模板,也出现这种情况. -
盖鲁13253418414…… 我也是用cDNA做模板的,没有出现过弥散带的情况,但经常出现非特异性条带.出现弥散带的原因可能是你在做凝胶电泳时电泳液被污染或者是做的胶有问题,也可能是你的cDNA部分降解了,至于降解的原因主要是由于时间和温度.扩增完...
@燕珊926：如何提取芦荟RNA 最好是苯酚法
盖鲁13253418414…… 动植物组织mRNA提取: 一、材料 水稻叶片或小鼠肝组织. 二、设备 研钵,冷冻台式高速离心机,低温冰箱,冷冻真空干燥器,紫外检测仪,电泳仪,电泳槽. 三、试剂 1、无RNA酶灭菌水:用将高温烘烤的玻璃瓶(180℃ 2小时)装蒸馏水...
@燕珊926：takara rr037a反转录试剂盒反转录出来的是单链cDNA还是双链cDNA? -
盖鲁13253418414…… 是单链cDNA,想合成双链cDNA需要另外操作: 一、cDNA第二链的合成: 1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物-20℃冰箱中保存,待电泳检测.其余的产物合并,混匀,然后顺序加入下列试剂(promega): 20ul 10*DNA Polymerase I buffer ...
