rna放在4+会降解吗
@聂倩1937:我想采集提rna的样品,在解剖后可以用冰冷冻一段时间再采样吗, -
上房17326067382…… 根据我的经验,其实RNA也没有传说中的那么容易降解,组织中RNA含量很高,即使降解也降解不了多少,就可以直接放在4度冰箱,你也可以做个实验对比看看4度存放与液氮存放所提取的RNA差距有多大.并不建议放在-20度,这个存放时间最好不要超过一个星期.如果你实在担心RNA降解,那就放在液氮中.
@聂倩1937:rna粗提后在4℃溶解4小时会降解吗? -
上房17326067382…… 不会
@聂倩1937:RNAlong RNA长期保存液在选择上有啥窍门啊?哪家的好?
上房17326067382…… RNA性质不稳定,极易降解.溶解于无RNase 的TE 或水中的纯化RNA,即便是储存于-20 ºC也难免降解.为解决这一问题,可以将RNA 沉淀或RNA 溶液溶解于RNA 长期保存液中,可以允许RNA在4 ºC 过夜或-20 ºC 保存至少1 年而免于降解.RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的最佳选择.需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA,或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot. 目前选择这个都是北京博凌科为生物科技有限公司的
@聂倩1937:RNA反转录cDNA时忘了拿出来在PCR仪里放了30分钟会降解吗,没有4°C - 作业帮
上房17326067382…… [答案] 一般新提的CDNA不会再这么短时间内讲解的,你体系没有问题的话就不会对CDNA造成影响.不放心的话提一点反映一下一看便知
@聂倩1937:提取的DNA中含有较多的RNA,加什么可以消除 -
上房17326067382…… DNA比RNA稳定很多,一般情况下是很少导致RNA污染的,可能提取过程中低温操作的缘故; 可采用室温离心而非4度,RNA自然降解; 如果还不行的话,可在操作过程中加入1-2微升的RNase,也无需专门37度水浴,室温操作,问题自然解决.
@聂倩1937:rna电泳可能造成降解的因素 -
上房17326067382…… 电泳液里含有RNA酶;电泳液温度高导致RNA降解.但是电泳降解不会那么快,如果有明显降解的话,我可以告诉你一定不是电泳导致的
@聂倩1937:提取RNA,用水溶解后跑胶,跑胶这段时间RNA要保存在那里啊, -
上房17326067382…… 几个小时放在冰上没问题!我现在正在做这个! 如果你当天还要用rna做下一步试验的话就别冻起来,冻融循环也会导致其少量降解,如果下一步提取mrna的话直接用是最好的啦!
@聂倩1937:如何防止内源性RNA酶对RNA的降解 -
上房17326067382…… 1. 使用正确的细胞或组织储存条件在样品用液氮瞬间冻结之后,应该储存在-80°C,千万不能解冻.即使是置于含有胍盐的裂解液中作匀浆前的短暂解冻,也会导致RNA的降解和损失.瞬间冻结的组织应该首先在超低温条件下先研磨成粉,然...
@聂倩1937:求助RNA浓度的问题 -
上房17326067382…… 1、提取RNA测浓度时A260/A280大于3的原因可能是降解.2、一般对于DNA,纯净的时候比值是1.8,而对于RNA则是接近2.0.如果超过这个值,那么最有可能的就是核酸降解了,因为寡聚的核酸和核苷酸在260的吸收峰比长链核苷酸要大,所以会使比值上升.
@聂倩1937:我的总RNA降解了吗 -
上房17326067382…… 如果你还活着,你的总RNA肯定没有降解.活细胞内的RNA与蛋白质和其他大分子物质一样,也是处于不断地生成与降解之中,但总的有效量是不会变的,至少变化不大.所以,你的总RNA没有降解.
上房17326067382…… 根据我的经验,其实RNA也没有传说中的那么容易降解,组织中RNA含量很高,即使降解也降解不了多少,就可以直接放在4度冰箱,你也可以做个实验对比看看4度存放与液氮存放所提取的RNA差距有多大.并不建议放在-20度,这个存放时间最好不要超过一个星期.如果你实在担心RNA降解,那就放在液氮中.
@聂倩1937:rna粗提后在4℃溶解4小时会降解吗? -
上房17326067382…… 不会
@聂倩1937:RNAlong RNA长期保存液在选择上有啥窍门啊?哪家的好?
上房17326067382…… RNA性质不稳定,极易降解.溶解于无RNase 的TE 或水中的纯化RNA,即便是储存于-20 ºC也难免降解.为解决这一问题,可以将RNA 沉淀或RNA 溶液溶解于RNA 长期保存液中,可以允许RNA在4 ºC 过夜或-20 ºC 保存至少1 年而免于降解.RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的最佳选择.需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA,或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot. 目前选择这个都是北京博凌科为生物科技有限公司的
@聂倩1937:RNA反转录cDNA时忘了拿出来在PCR仪里放了30分钟会降解吗,没有4°C - 作业帮
上房17326067382…… [答案] 一般新提的CDNA不会再这么短时间内讲解的,你体系没有问题的话就不会对CDNA造成影响.不放心的话提一点反映一下一看便知
@聂倩1937:提取的DNA中含有较多的RNA,加什么可以消除 -
上房17326067382…… DNA比RNA稳定很多,一般情况下是很少导致RNA污染的,可能提取过程中低温操作的缘故; 可采用室温离心而非4度,RNA自然降解; 如果还不行的话,可在操作过程中加入1-2微升的RNase,也无需专门37度水浴,室温操作,问题自然解决.
@聂倩1937:rna电泳可能造成降解的因素 -
上房17326067382…… 电泳液里含有RNA酶;电泳液温度高导致RNA降解.但是电泳降解不会那么快,如果有明显降解的话,我可以告诉你一定不是电泳导致的
@聂倩1937:提取RNA,用水溶解后跑胶,跑胶这段时间RNA要保存在那里啊, -
上房17326067382…… 几个小时放在冰上没问题!我现在正在做这个! 如果你当天还要用rna做下一步试验的话就别冻起来,冻融循环也会导致其少量降解,如果下一步提取mrna的话直接用是最好的啦!
@聂倩1937:如何防止内源性RNA酶对RNA的降解 -
上房17326067382…… 1. 使用正确的细胞或组织储存条件在样品用液氮瞬间冻结之后,应该储存在-80°C,千万不能解冻.即使是置于含有胍盐的裂解液中作匀浆前的短暂解冻,也会导致RNA的降解和损失.瞬间冻结的组织应该首先在超低温条件下先研磨成粉,然...
@聂倩1937:求助RNA浓度的问题 -
上房17326067382…… 1、提取RNA测浓度时A260/A280大于3的原因可能是降解.2、一般对于DNA,纯净的时候比值是1.8,而对于RNA则是接近2.0.如果超过这个值,那么最有可能的就是核酸降解了,因为寡聚的核酸和核苷酸在260的吸收峰比长链核苷酸要大,所以会使比值上升.
@聂倩1937:我的总RNA降解了吗 -
上房17326067382…… 如果你还活着,你的总RNA肯定没有降解.活细胞内的RNA与蛋白质和其他大分子物质一样,也是处于不断地生成与降解之中,但总的有效量是不会变的,至少变化不大.所以,你的总RNA没有降解.