rna提取后会降解吗
@昌霍2978：如何判断提取的真核细胞rna是否有降解或者有dna和有机溶剂的污染 -
窦云18435077687…… RNA的降解可以通过跑电泳来看,完整的RNA提取出来是有三条s带的,比如真核生物的28s18s5s三条带,可以通过测OD值来看是否有DNA和其他污染
@昌霍2978：NP - 40会破坏RNA吗 -
窦云18435077687…… 不会.参考资料:RNA提取原理:通过变性剂破碎细胞或者组织,然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA,再经过沉淀,洗涤,晾干,最后溶解.但是由于RNA酶无处不在,随时可能将RNA降解,所以实验中有很多地方需要注意,稍有疏忽就会前...
@昌霍2978：为什么提取出的RNA,容易被降解,说说可能的原因 -
窦云18435077687…… 因为RNA酶无处不在....这个是主要原因
@昌霍2978：我提取DNA后发现RNA过多,就加入了RNA酶,不到一星期我的DNA有严重的降解现象,会是RNA酶的原因吗 -
窦云18435077687…… 去RNA的过程当中就有很大可能会降解DNA 这与加入RNA酶的量也是有关系的 一般情况下提出质粒后可以37度水浴半个小时 大部分RNA就会被自动降解掉了 另外附送 所有DNA接触的环境体系 必须是偏碱性的,因为DNA易被酸水解. 仅供参考 谢谢
@昌霍2978：为什么提取RNA时RNA容易降解,提取DNA时RNA却很难降解呢? -
窦云18435077687…… 因为RNA是单链的不稳定,而DNA是双螺旋结构,稳定 最主要的是你做实验的地方含有RNA酶
@昌霍2978：在提取RNA的过程中为什么在沸水浴上加热30min?RNA会被破坏吗? -
窦云18435077687…… 提取RNA的方法常用稀碱法和浓盐法.前者利用稀碱溶解细胞壁,使RNA释放出来,这种方法提取时间短,但RNA在此条件下不稳定,容易分解 后者在加热的条件下,利用高浓度的盐改变细胞膜的透性,使RNA释放出来.所以加热的条件是降低细胞膜的表明张力,破坏磷酸双酯层.帮助高浓度盐破坏细胞膜,有助于RNA的释放;还可将蛋白质变性,有助于RNA的提取分离. RNA不会变性啦,PCR反应的温度也几近于沸水温度,只是双链的变性,并没有降解,RNA之间的化学键能承受这样的温度,只是不能停留太久,因为细胞中的磷酸二酯酶和磷酸单酯酶在此温度范围比较活跃,会使RNA降解而降低提取率.
@昌霍2978：土壤RNA提取需要注意什么? -
窦云18435077687…… 一般来说从污泥、淤泥、森林土壤、河边土壤、稻田泥土、草地,、池塘泥土、竹林等土壤提取RNA比较难,因为土壤中的RNA含量少,而且RNA非常容易降解,残留的腐殖酸还会影响后续的实验.华越洋生物的超快土壤RNA提取试剂盒,提取速度快,避免了提取过程中RNA的降解;强效吸附剂可高效去除土壤样品中的各种抑制因子,如腐殖酸等.纯化的土壤RNA纯度高,可直接用于RT-PCR、Northern 杂交、cDNA合成等各种用途.
@昌霍2978：植物RNA 的提取 -
窦云18435077687…… 不会一点RNA都没有,但是这样的做法不好,放冰箱的降温速率有限,RNA会有变化.RNA最好新鲜提取,即便不能新鲜提取,也要用液氮深度冷冻一下再放-80冰箱保存.
@昌霍2978：骨组织RNA的提取注意事项,为什么提取出来的RNA降解严重 - 作业帮
窦云18435077687…… [答案] RNA提取的时候,一定要注意防止RNA酶作用. 第一点,样本处理和存放最好都放负80冰柜. 第二点,实验过程中你可以使用DEPC水泡过的枪头,离心管,保持手套干净,带好口罩,不要说话. 第三点,假如你用Trizol提取RNA,75%的乙醇也最好采...
@昌霍2978：小鼠组织室温放过夜,蛋白和rna都降解了吗 -
窦云18435077687…… 小鼠组织室温放过夜,蛋白和rna都降解了 提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液.一般是1:1进行配制.用的裂解液我们是RIPA. 将组织用液氮研磨碎了,然后按量加入裂解液,细胞量在10七次方左右是100微升.冰浴裂解20分钟(间断摇动).然后4摄氏度离心12000rpm,15分钟. 胰腺组织含多种类型的细胞,要想提取胰岛A细胞的RNA,首先就必须将胰岛A细胞从胰腺组织的细胞群中分离出来,可以用流式细胞分选或磁珠分选等. 获得高纯度的胰岛A细胞后,再用TRIZOL或RNA提取试剂盒等将其RNA提取出来就行了.
窦云18435077687…… RNA的降解可以通过跑电泳来看,完整的RNA提取出来是有三条s带的,比如真核生物的28s18s5s三条带,可以通过测OD值来看是否有DNA和其他污染
@昌霍2978：NP - 40会破坏RNA吗 -
窦云18435077687…… 不会.参考资料:RNA提取原理:通过变性剂破碎细胞或者组织,然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA,再经过沉淀,洗涤,晾干,最后溶解.但是由于RNA酶无处不在,随时可能将RNA降解,所以实验中有很多地方需要注意,稍有疏忽就会前...
@昌霍2978：为什么提取出的RNA,容易被降解,说说可能的原因 -
窦云18435077687…… 因为RNA酶无处不在....这个是主要原因
@昌霍2978：我提取DNA后发现RNA过多,就加入了RNA酶,不到一星期我的DNA有严重的降解现象,会是RNA酶的原因吗 -
窦云18435077687…… 去RNA的过程当中就有很大可能会降解DNA 这与加入RNA酶的量也是有关系的 一般情况下提出质粒后可以37度水浴半个小时 大部分RNA就会被自动降解掉了 另外附送 所有DNA接触的环境体系 必须是偏碱性的,因为DNA易被酸水解. 仅供参考 谢谢
@昌霍2978：为什么提取RNA时RNA容易降解,提取DNA时RNA却很难降解呢? -
窦云18435077687…… 因为RNA是单链的不稳定,而DNA是双螺旋结构,稳定 最主要的是你做实验的地方含有RNA酶
@昌霍2978：在提取RNA的过程中为什么在沸水浴上加热30min?RNA会被破坏吗? -
窦云18435077687…… 提取RNA的方法常用稀碱法和浓盐法.前者利用稀碱溶解细胞壁,使RNA释放出来,这种方法提取时间短,但RNA在此条件下不稳定,容易分解 后者在加热的条件下,利用高浓度的盐改变细胞膜的透性,使RNA释放出来.所以加热的条件是降低细胞膜的表明张力,破坏磷酸双酯层.帮助高浓度盐破坏细胞膜,有助于RNA的释放;还可将蛋白质变性,有助于RNA的提取分离. RNA不会变性啦,PCR反应的温度也几近于沸水温度,只是双链的变性,并没有降解,RNA之间的化学键能承受这样的温度,只是不能停留太久,因为细胞中的磷酸二酯酶和磷酸单酯酶在此温度范围比较活跃,会使RNA降解而降低提取率.
@昌霍2978：土壤RNA提取需要注意什么? -
窦云18435077687…… 一般来说从污泥、淤泥、森林土壤、河边土壤、稻田泥土、草地,、池塘泥土、竹林等土壤提取RNA比较难,因为土壤中的RNA含量少,而且RNA非常容易降解,残留的腐殖酸还会影响后续的实验.华越洋生物的超快土壤RNA提取试剂盒,提取速度快,避免了提取过程中RNA的降解;强效吸附剂可高效去除土壤样品中的各种抑制因子,如腐殖酸等.纯化的土壤RNA纯度高,可直接用于RT-PCR、Northern 杂交、cDNA合成等各种用途.
@昌霍2978：植物RNA 的提取 -
窦云18435077687…… 不会一点RNA都没有,但是这样的做法不好,放冰箱的降温速率有限,RNA会有变化.RNA最好新鲜提取,即便不能新鲜提取,也要用液氮深度冷冻一下再放-80冰箱保存.
@昌霍2978：骨组织RNA的提取注意事项,为什么提取出来的RNA降解严重 - 作业帮
窦云18435077687…… [答案] RNA提取的时候,一定要注意防止RNA酶作用. 第一点,样本处理和存放最好都放负80冰柜. 第二点,实验过程中你可以使用DEPC水泡过的枪头,离心管,保持手套干净,带好口罩,不要说话. 第三点,假如你用Trizol提取RNA,75%的乙醇也最好采...
@昌霍2978：小鼠组织室温放过夜,蛋白和rna都降解了吗 -
窦云18435077687…… 小鼠组织室温放过夜,蛋白和rna都降解了 提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液.一般是1:1进行配制.用的裂解液我们是RIPA. 将组织用液氮研磨碎了,然后按量加入裂解液,细胞量在10七次方左右是100微升.冰浴裂解20分钟(间断摇动).然后4摄氏度离心12000rpm,15分钟. 胰腺组织含多种类型的细胞,要想提取胰岛A细胞的RNA,首先就必须将胰岛A细胞从胰腺组织的细胞群中分离出来,可以用流式细胞分选或磁珠分选等. 获得高纯度的胰岛A细胞后,再用TRIZOL或RNA提取试剂盒等将其RNA提取出来就行了.
