防止rna降解加入什么
@申虎1754：有什么抑制剂能够抑制mrna的降解 -
俞娇13857392814…… 抑制mRNA的降解实际上就是抑制RNA酶的活性,主要的RNA酶抑制剂有以下几种 焦碳酸二乙酯,即DEPC,通过和RNA酶的上活性中心的组氨酸的咪唑环结合而使蛋白质变性. 异硫氰酸胍是目前认为是最有效的RNA酶抑制剂. 氧钒核糖核苷复合物能与RNA酶结合形式过渡类物质,抑制RNA酶的活性. RNA酶的蛋白质抑制剂(RNasin),是一种从大鼠肝或人胚盘中提取得来的酸性糖蛋白.Rnasin是RNA酶的一种非竞争性抑制剂,可以和多种RNA酶结合,使其失活. 还有像SDS、尿素、硅藻土等对RNA酶也有一定的抑制作用.
@申虎1754：提取基因组RNA时,怎样避免产物降解? -
俞娇13857392814…… 外源RNA酶清除剂,可以搞定.喷洒台面,浸泡处理耗材,去除外源RNA酶清除剂,避免其降解.
@申虎1754：怎样降低RNA降解,求指点 -
俞娇13857392814…… 常见的方法是超低温保存,低温操作,快速操作,在干净的环境中操作,加RNA酶抑制剂.
@申虎1754：提取组织RNA时,如何减少RNA的降解! - 作业帮
俞娇13857392814…… [答案] 1:所有用到的枪头、离心管都要在0.1%的DEPC水里浸泡过夜够,灭菌烘干使用.当然这些耗材都有现成商业化的买.2:所有实验中用到水的地方都是0.1%的DEPC水(灭菌失活).3:液氮研磨,裂解时间不宜太长,需要纯化的,粗提出...
@申虎1754：提取的DNA中含有较多的RNA,加什么可以消除 -
俞娇13857392814…… DNA比RNA稳定很多,一般情况下是很少导致RNA污染的,可能提取过程中低温操作的缘故; 可采用室温离心而非4度,RNA自然降解; 如果还不行的话,可在操作过程中加入1-2微升的RNase,也无需专门37度水浴,室温操作,问题自然解决.
@申虎1754：RNA干扰实验中怎样防止RNA降解呢?
俞娇13857392814…… 原本需要19~23nt的RNA序列完全互补才能发生干扰作用,而如果进入microRNA途径,只需要11~15nt互补就可以产生干扰效果,这使得siRNA可能与非靶基因结合而导致非靶基因沉默,造成脱靶
@申虎1754：在RNA提取过程中需要注意哪些方面以防止RNA的降解啊? -
俞娇13857392814…… 最好用液氮,价钱也不贵,而且研钵等也不用处理,因为液氮温度太低了,磨样时RNase根本不起作用,待加入Trizon后,也更不怕RNase了.
@申虎1754：使用TRNzol过程中如何防止RNA降解 -
俞娇13857392814…… TRNzol是可即用的从细胞和组织中提取总RNA的试剂,在样品裂解或匀浆过程中,TRNzol可保持RNA完整性,同时裂解细胞,溶解细胞内含物.加入氯仿后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中.取出水相,用异丙醇可沉淀回收RNA;中间层用乙醇沉淀可回收DNA;有机相用异丙醇沉淀可回收蛋白.得到的DNA可用做标准,比较不同样品RNA得率.
@申虎1754：如何防止核酸降解基因组DNA? -
俞娇13857392814…… 1、取培养至对数生长后期的含pBS质粒的细菌培养液250ml,4℃下5000g离心15分钟,弃上清,将离心管倒置使上清液全部流尽. 2、将细菌沉淀重新悬浮于50ml用冰预冷的STE中(此步可省略). 3、同步骤1方法离心以收集细菌细胞. 4、将...
@申虎1754：乙酸钾和SDS在提取RNA中的作用 -
俞娇13857392814…… SDS主要是破坏细胞膜,使部分蛋白变性并沉淀下来.乙酸钾主要是维持一个弱碱性的环境,防止RNA降解.
俞娇13857392814…… 抑制mRNA的降解实际上就是抑制RNA酶的活性,主要的RNA酶抑制剂有以下几种 焦碳酸二乙酯,即DEPC,通过和RNA酶的上活性中心的组氨酸的咪唑环结合而使蛋白质变性. 异硫氰酸胍是目前认为是最有效的RNA酶抑制剂. 氧钒核糖核苷复合物能与RNA酶结合形式过渡类物质,抑制RNA酶的活性. RNA酶的蛋白质抑制剂(RNasin),是一种从大鼠肝或人胚盘中提取得来的酸性糖蛋白.Rnasin是RNA酶的一种非竞争性抑制剂,可以和多种RNA酶结合,使其失活. 还有像SDS、尿素、硅藻土等对RNA酶也有一定的抑制作用.
@申虎1754：提取基因组RNA时,怎样避免产物降解? -
俞娇13857392814…… 外源RNA酶清除剂,可以搞定.喷洒台面,浸泡处理耗材,去除外源RNA酶清除剂,避免其降解.
@申虎1754：怎样降低RNA降解,求指点 -
俞娇13857392814…… 常见的方法是超低温保存,低温操作,快速操作,在干净的环境中操作,加RNA酶抑制剂.
@申虎1754：提取组织RNA时,如何减少RNA的降解! - 作业帮
俞娇13857392814…… [答案] 1:所有用到的枪头、离心管都要在0.1%的DEPC水里浸泡过夜够,灭菌烘干使用.当然这些耗材都有现成商业化的买.2:所有实验中用到水的地方都是0.1%的DEPC水(灭菌失活).3:液氮研磨,裂解时间不宜太长,需要纯化的,粗提出...
@申虎1754：提取的DNA中含有较多的RNA,加什么可以消除 -
俞娇13857392814…… DNA比RNA稳定很多,一般情况下是很少导致RNA污染的,可能提取过程中低温操作的缘故; 可采用室温离心而非4度,RNA自然降解; 如果还不行的话,可在操作过程中加入1-2微升的RNase,也无需专门37度水浴,室温操作,问题自然解决.
@申虎1754：RNA干扰实验中怎样防止RNA降解呢?
俞娇13857392814…… 原本需要19~23nt的RNA序列完全互补才能发生干扰作用,而如果进入microRNA途径,只需要11~15nt互补就可以产生干扰效果,这使得siRNA可能与非靶基因结合而导致非靶基因沉默,造成脱靶
@申虎1754：在RNA提取过程中需要注意哪些方面以防止RNA的降解啊? -
俞娇13857392814…… 最好用液氮,价钱也不贵,而且研钵等也不用处理,因为液氮温度太低了,磨样时RNase根本不起作用,待加入Trizon后,也更不怕RNase了.
@申虎1754：使用TRNzol过程中如何防止RNA降解 -
俞娇13857392814…… TRNzol是可即用的从细胞和组织中提取总RNA的试剂,在样品裂解或匀浆过程中,TRNzol可保持RNA完整性,同时裂解细胞,溶解细胞内含物.加入氯仿后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中.取出水相,用异丙醇可沉淀回收RNA;中间层用乙醇沉淀可回收DNA;有机相用异丙醇沉淀可回收蛋白.得到的DNA可用做标准,比较不同样品RNA得率.
@申虎1754：如何防止核酸降解基因组DNA? -
俞娇13857392814…… 1、取培养至对数生长后期的含pBS质粒的细菌培养液250ml,4℃下5000g离心15分钟,弃上清,将离心管倒置使上清液全部流尽. 2、将细菌沉淀重新悬浮于50ml用冰预冷的STE中(此步可省略). 3、同步骤1方法离心以收集细菌细胞. 4、将...
@申虎1754：乙酸钾和SDS在提取RNA中的作用 -
俞娇13857392814…… SDS主要是破坏细胞膜,使部分蛋白变性并沉淀下来.乙酸钾主要是维持一个弱碱性的环境,防止RNA降解.
