如何防止rna的降解
@冉鹏6423:提取组织RNA时,如何减少RNA的降解! - 作业帮
翟温13477464819…… [答案] 1:所有用到的枪头、离心管都要在0.1%的DEPC水里浸泡过夜够,灭菌烘干使用.当然这些耗材都有现成商业化的买.2:所有实验中用到水的地方都是0.1%的DEPC水(灭菌失活).3:液氮研磨,裂解时间不宜太长,需要纯化的,粗提出...
@冉鹏6423:提取基因组RNA时,怎样避免产物降解? -
翟温13477464819…… 外源RNA酶清除剂,可以搞定.喷洒台面,浸泡处理耗材,去除外源RNA酶清除剂,避免其降解.
@冉鹏6423:怎样降低RNA降解,求指点 -
翟温13477464819…… 常见的方法是超低温保存,低温操作,快速操作,在干净的环境中操作,加RNA酶抑制剂.
@冉鹏6423:提取RNA时应该注意的问题?RNA酶无处不在,RNA容易降解,怎样防止或者减少这种降解? - 作业帮
翟温13477464819…… [答案] 试剂全都用DEPC水配制 枪头用RNAse free的 离心用四度 不要说话 -80保存 不要存放太久
@冉鹏6423:在RNA提取过程中需要注意哪些方面以防止RNA的降解啊? - 作业帮
翟温13477464819…… [答案] 最好用液氮,价钱也不贵,而且研钵等也不用处理,因为液氮温度太低了,磨样时RNase根本不起作用,待加入Trizon后,也更不怕RNase了.
@冉鹏6423:解剖的时候怎么减少rna的降解 -
翟温13477464819…… 组织不要反复冻融 保持低温,不高于4度环境 保持细胞完整,不要造成细胞破碎 在细胞破碎步骤后全程保持trizol的存在 提取步骤中任何trizol不存在的时候所涉及的耗材和试剂使用rnase-free 以上
@冉鹏6423:RNA干扰实验中怎样防止RNA降解呢?
翟温13477464819…… 原本需要19~23nt的RNA序列完全互补才能发生干扰作用,而如果进入microRNA途径,只需要11~15nt互补就可以产生干扰效果,这使得siRNA可能与非靶基因结合而导致非靶基因沉默,造成脱靶
@冉鹏6423:使用TRNzol过程中如何防止RNA降解 -
翟温13477464819…… TRNzol是可即用的从细胞和组织中提取总RNA的试剂,在样品裂解或匀浆过程中,TRNzol可保持RNA完整性,同时裂解细胞,溶解细胞内含物.加入氯仿后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中.取出水相,用异丙醇可沉淀回收RNA;中间层用乙醇沉淀可回收DNA;有机相用异丙醇沉淀可回收蛋白.得到的DNA可用做标准,比较不同样品RNA得率.
@冉鹏6423:怎么解决细菌rna提取过程中 rna降解的问题 -
翟温13477464819…… RNA在实验过程中要一直考虑RNAse的影响,整个操作都要抑制RNA酶的活性,你在实验过程中应该严格执行这样的规范,比如仪器用DEPC处理,低温操作等等.
@冉鹏6423:RNA干扰实验中怎样防止RNA降解 -
翟温13477464819…… RNA干扰回复实验,主要是为了说明Off-target效应. Off-target effects(脱靶效应)最早由Dharmacon科学家Jackson和他的同事们提出(Fedorov,Y.,et al. Off-targeting By siRNA Can Induce Toxic Phenotype. RNA Accepted (2006).)他们给细胞转...
翟温13477464819…… [答案] 1:所有用到的枪头、离心管都要在0.1%的DEPC水里浸泡过夜够,灭菌烘干使用.当然这些耗材都有现成商业化的买.2:所有实验中用到水的地方都是0.1%的DEPC水(灭菌失活).3:液氮研磨,裂解时间不宜太长,需要纯化的,粗提出...
@冉鹏6423:提取基因组RNA时,怎样避免产物降解? -
翟温13477464819…… 外源RNA酶清除剂,可以搞定.喷洒台面,浸泡处理耗材,去除外源RNA酶清除剂,避免其降解.
@冉鹏6423:怎样降低RNA降解,求指点 -
翟温13477464819…… 常见的方法是超低温保存,低温操作,快速操作,在干净的环境中操作,加RNA酶抑制剂.
@冉鹏6423:提取RNA时应该注意的问题?RNA酶无处不在,RNA容易降解,怎样防止或者减少这种降解? - 作业帮
翟温13477464819…… [答案] 试剂全都用DEPC水配制 枪头用RNAse free的 离心用四度 不要说话 -80保存 不要存放太久
@冉鹏6423:在RNA提取过程中需要注意哪些方面以防止RNA的降解啊? - 作业帮
翟温13477464819…… [答案] 最好用液氮,价钱也不贵,而且研钵等也不用处理,因为液氮温度太低了,磨样时RNase根本不起作用,待加入Trizon后,也更不怕RNase了.
@冉鹏6423:解剖的时候怎么减少rna的降解 -
翟温13477464819…… 组织不要反复冻融 保持低温,不高于4度环境 保持细胞完整,不要造成细胞破碎 在细胞破碎步骤后全程保持trizol的存在 提取步骤中任何trizol不存在的时候所涉及的耗材和试剂使用rnase-free 以上
@冉鹏6423:RNA干扰实验中怎样防止RNA降解呢?
翟温13477464819…… 原本需要19~23nt的RNA序列完全互补才能发生干扰作用,而如果进入microRNA途径,只需要11~15nt互补就可以产生干扰效果,这使得siRNA可能与非靶基因结合而导致非靶基因沉默,造成脱靶
@冉鹏6423:使用TRNzol过程中如何防止RNA降解 -
翟温13477464819…… TRNzol是可即用的从细胞和组织中提取总RNA的试剂,在样品裂解或匀浆过程中,TRNzol可保持RNA完整性,同时裂解细胞,溶解细胞内含物.加入氯仿后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中.取出水相,用异丙醇可沉淀回收RNA;中间层用乙醇沉淀可回收DNA;有机相用异丙醇沉淀可回收蛋白.得到的DNA可用做标准,比较不同样品RNA得率.
@冉鹏6423:怎么解决细菌rna提取过程中 rna降解的问题 -
翟温13477464819…… RNA在实验过程中要一直考虑RNAse的影响,整个操作都要抑制RNA酶的活性,你在实验过程中应该严格执行这样的规范,比如仪器用DEPC处理,低温操作等等.
@冉鹏6423:RNA干扰实验中怎样防止RNA降解 -
翟温13477464819…… RNA干扰回复实验,主要是为了说明Off-target效应. Off-target effects(脱靶效应)最早由Dharmacon科学家Jackson和他的同事们提出(Fedorov,Y.,et al. Off-targeting By siRNA Can Induce Toxic Phenotype. RNA Accepted (2006).)他们给细胞转...