rna在4度能放3个小时吗
@周泡5990：rna粗提后在4℃溶解4小时会降解吗? -
韦涛13135712518…… 不会
@周泡5990：我想采集提rna的样品,在解剖后可以用冰冷冻一段时间再采样吗, -
韦涛13135712518…… 根据我的经验,其实RNA也没有传说中的那么容易降解,组织中RNA含量很高,即使降解也降解不了多少,就可以直接放在4度冰箱,你也可以做个实验对比看看4度存放与液氮存放所提取的RNA差距有多大.并不建议放在-20度,这个存放时间最好不要超过一个星期.如果你实在担心RNA降解,那就放在液氮中.
@周泡5990：提取RNA,用水溶解后跑胶,跑胶这段时间RNA要保存在那里啊, -
韦涛13135712518…… 几个小时放在冰上没问题!我现在正在做这个! 如果你当天还要用rna做下一步试验的话就别冻起来,冻融循环也会导致其少量降解,如果下一步提取mrna的话直接用是最好的啦!
@周泡5990：取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 -
韦涛13135712518…… 取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 细胞在离体后数分钟后开始死亡,注意是开始死亡,其实还有好多细胞存活,RNA在体内就处于不断降解的过程中,离体后速度逐渐加快,所以速冻越快越好,但是也不用过于紧张,即使放上半小时里面还有完整RNA存在,只是比例很低了,如果用于做NORTHERN肯定不行,但如果做一些不是表达效率很低的基因的RT的话还有机会的(经验之谈). 至于DEPC洗的问题,由于上述原因,只要操作迅速,其实剪子之类意义不大,毕竟细胞释放的酶应该比剪子上带的多多了,当然,洗洗也没坏处,更保险
@周泡5990：CTAB法提取RNA,氯化锂4度过夜沉淀RNA,时间过长会有什么影响? -
韦涛13135712518…… RNA容易降解,还有多糖多酚什么的杂质也容易跟着一起沉下来.做RNA最好快速,哪怕得率稍微低些也没事,但要保证质量高.一般我们做沉淀一个小时左右就行了,久了怕降解,后续试验容易出问题.
@周泡5990：提取RNA,用depc水溶解4度一般要多长时间 -
韦涛13135712518…… 溶菌酶比较稳定的,酸碱耐受性都挺好,所以直接用te溶解就可以了,配成20mg/ml的储存浓度,使用的时候终浓度1-2mg/ml就行了. tris直接用depc水配就可以了.
@周泡5990：RNA加异丙醇沉淀可以在 - 20度放多久 -
韦涛13135712518…… 理论上20分钟就可以沉淀,但是我们也做过沉淀1h和2h~~~我们也做过在4度和-80度过夜的~~~都能得到沉淀~~~但是不建议过夜~~~
@周泡5990：想要保存RNA比较久,怎么办? -
韦涛13135712518…… 如果保存时间过久,在-80度也放不了太久.你可以将你的材料保存起来,到时候再提取RNA.天根有这些样品保存的东西卖,可以将你的样品用液氮研磨后,加到这些Buffer里面保存在-80度.具体你就要自己咨询了.
@周泡5990：样品能在trizol中放多长时间 -
韦涛13135712518…… 没记错的话trizol说明书说加完trizol裂解的细胞匀浆可在室温放置数小时. 如果冷冻在-80摄氏度则我觉得几个月也没任何问题.
@周泡5990：提取RNA,用水溶解后跑胶,跑胶这段时间RNA要保存在那里啊,还有就是RNA纯化后也要跑胶,在跑胶的这段时间里,RNA要放在哪?4度, - 20度,还是 - ... - 作业帮
韦涛13135712518…… [答案] 几个小时放在冰上没问题!我现在正在做这个!如果你当天还要用rna做下一步试验的话就别冻起来,冻融循环也会导致其少量降解,如果下一步提取mrna的话直接用是最好的啦!
韦涛13135712518…… 不会
@周泡5990：我想采集提rna的样品,在解剖后可以用冰冷冻一段时间再采样吗, -
韦涛13135712518…… 根据我的经验,其实RNA也没有传说中的那么容易降解,组织中RNA含量很高,即使降解也降解不了多少,就可以直接放在4度冰箱,你也可以做个实验对比看看4度存放与液氮存放所提取的RNA差距有多大.并不建议放在-20度,这个存放时间最好不要超过一个星期.如果你实在担心RNA降解,那就放在液氮中.
@周泡5990：提取RNA,用水溶解后跑胶,跑胶这段时间RNA要保存在那里啊, -
韦涛13135712518…… 几个小时放在冰上没问题!我现在正在做这个! 如果你当天还要用rna做下一步试验的话就别冻起来,冻融循环也会导致其少量降解,如果下一步提取mrna的话直接用是最好的啦!
@周泡5990：取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 -
韦涛13135712518…… 取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 细胞在离体后数分钟后开始死亡,注意是开始死亡,其实还有好多细胞存活,RNA在体内就处于不断降解的过程中,离体后速度逐渐加快,所以速冻越快越好,但是也不用过于紧张,即使放上半小时里面还有完整RNA存在,只是比例很低了,如果用于做NORTHERN肯定不行,但如果做一些不是表达效率很低的基因的RT的话还有机会的(经验之谈). 至于DEPC洗的问题,由于上述原因,只要操作迅速,其实剪子之类意义不大,毕竟细胞释放的酶应该比剪子上带的多多了,当然,洗洗也没坏处,更保险
@周泡5990：CTAB法提取RNA,氯化锂4度过夜沉淀RNA,时间过长会有什么影响? -
韦涛13135712518…… RNA容易降解,还有多糖多酚什么的杂质也容易跟着一起沉下来.做RNA最好快速,哪怕得率稍微低些也没事,但要保证质量高.一般我们做沉淀一个小时左右就行了,久了怕降解,后续试验容易出问题.
@周泡5990：提取RNA,用depc水溶解4度一般要多长时间 -
韦涛13135712518…… 溶菌酶比较稳定的,酸碱耐受性都挺好,所以直接用te溶解就可以了,配成20mg/ml的储存浓度,使用的时候终浓度1-2mg/ml就行了. tris直接用depc水配就可以了.
@周泡5990：RNA加异丙醇沉淀可以在 - 20度放多久 -
韦涛13135712518…… 理论上20分钟就可以沉淀,但是我们也做过沉淀1h和2h~~~我们也做过在4度和-80度过夜的~~~都能得到沉淀~~~但是不建议过夜~~~
@周泡5990：想要保存RNA比较久,怎么办? -
韦涛13135712518…… 如果保存时间过久,在-80度也放不了太久.你可以将你的材料保存起来,到时候再提取RNA.天根有这些样品保存的东西卖,可以将你的样品用液氮研磨后,加到这些Buffer里面保存在-80度.具体你就要自己咨询了.
@周泡5990：样品能在trizol中放多长时间 -
韦涛13135712518…… 没记错的话trizol说明书说加完trizol裂解的细胞匀浆可在室温放置数小时. 如果冷冻在-80摄氏度则我觉得几个月也没任何问题.
@周泡5990：提取RNA,用水溶解后跑胶,跑胶这段时间RNA要保存在那里啊,还有就是RNA纯化后也要跑胶,在跑胶的这段时间里,RNA要放在哪?4度, - 20度,还是 - ... - 作业帮
韦涛13135712518…… [答案] 几个小时放在冰上没问题!我现在正在做这个!如果你当天还要用rna做下一步试验的话就别冻起来,冻融循环也会导致其少量降解,如果下一步提取mrna的话直接用是最好的啦!
