rna在室温下多久会降解
@燕睿4554：取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 -
池冰18139868960…… 取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 细胞在离体后数分钟后开始死亡,注意是开始死亡,其实还有好多细胞存活,RNA在体内就处于不断降解的过程中,离体后速度逐渐加快,所以速冻越快越好,但是也不用过于紧张,即使放上半小时里面还有完整RNA存在,只是比例很低了,如果用于做NORTHERN肯定不行,但如果做一些不是表达效率很低的基因的RT的话还有机会的(经验之谈). 至于DEPC洗的问题,由于上述原因,只要操作迅速,其实剪子之类意义不大,毕竟细胞释放的酶应该比剪子上带的多多了,当然,洗洗也没坏处,更保险
@燕睿4554：提取出来的microRNA可以在 - 80°C条件下储存多久不会降解,并且还可以继续RT - pcr -
池冰18139868960…… 你是提了总RNA 然后想检测miRNA么 如果是已经用DEPC水溶了 那三周就差不多了 不超过一个月 不然就不准了
@燕睿4554：在各种RNA中,哪个半衰期最短 -
池冰18139868960…… 常见的三种RNA中,半衰期最短的是mRNA,对于真核生物来说,玩成了翻译后mRNA就降解了,而对于原核生物来说则更快,原核生物中很多mRNA几乎是边翻译边降解的.对于tRNA和rRNA来说,这两种RNA是相对比较稳定的,tRNA在完成肽链合成后,又会和新的对应氨基酸结合去合成新的肽链,而rRNA与核糖体蛋白结合形成比较稳定的核糖体结构,一般来说存在会更加长.当然,对于某些小分子RNA来说,可能有些会比mRNA半衰期更短,但一般情况下不考虑,因为小分子RNA参与的功能太多,你不能统一的概括其半衰期.
@燕睿4554：提取RNA的血清如何冻存 -
池冰18139868960…… 、组织样品采集 1. 首先准备好用于包装样品的铝箔或冷冻保存管,并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表多处写明样品编号. 2. 准确切除所需组织. 3. 离体新鲜组织,立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型. 4. 在RNase-free ...
@燕睿4554：动物RNA的提取 -
池冰18139868960…… RNA的提取 一、准备试剂: 氯仿,异丙醇,75℅乙醇,无RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制). 二、操作步骤: 1. 匀浆处理: a. 组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理....
@燕睿4554：rna粗提后在4℃溶解4小时会降解吗? -
池冰18139868960…… 不会
@燕睿4554：rna提取怎么室温干燥 -
池冰18139868960…… rna提取怎么室温干燥RNA提取步骤及注意事项(仅供参考):实验步骤如下:1.取50—100mg的组织,加入1ml Trizol试剂,用匀浆器打匀(Trizol先放于冰上).2.将匀浆室温放置5min.3.加入200μl氯仿,剧烈震荡混匀30s,冰上静置3min.4....
@燕睿4554：我想采集提rna的样品,在解剖后可以用冰冷冻一段时间再采样吗, -
池冰18139868960…… 根据我的经验,其实RNA也没有传说中的那么容易降解,组织中RNA含量很高,即使降解也降解不了多少,就可以直接放在4度冰箱,你也可以做个实验对比看看4度存放与液氮存放所提取的RNA差距有多大.并不建议放在-20度,这个存放时间最好不要超过一个星期.如果你实在担心RNA降解,那就放在液氮中.
@燕睿4554：小鼠组织室温放过夜,蛋白和rna都降解了吗 -
池冰18139868960…… 小鼠组织室温放过夜,蛋白和rna都降解了 提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液.一般是1:1进行配制.用的裂解液我们是RIPA. 将组织用液氮研磨碎了,然后按量加入裂解液,细胞量在10七次方左右是100微升.冰浴裂解20分钟(间断摇动).然后4摄氏度离心12000rpm,15分钟. 胰腺组织含多种类型的细胞,要想提取胰岛A细胞的RNA,首先就必须将胰岛A细胞从胰腺组织的细胞群中分离出来,可以用流式细胞分选或磁珠分选等. 获得高纯度的胰岛A细胞后,再用TRIZOL或RNA提取试剂盒等将其RNA提取出来就行了.
@燕睿4554：提DNA的时候发现有很多RNA,怎样才能除去这些RNA -
池冰18139868960…… 你看一下溶液的PH值是不是没调好,可能PH值小了吧,核酸的水解性质是:RNA对酸不敏感但遇碱水解,DNA遇碱不水解但遇酸水解.当然前提是你要确定没往里误加DNases(脱氧核糖核酸酶)把DNA给水解了. 要除去这些RNA,往里加RNases把RNA水解掉就可以了啊.
池冰18139868960…… 取出的标本放在冰上2小时rna会降解吗 细胞在离体后数分钟后开始死亡,注意是开始死亡,其实还有好多细胞存活,RNA在体内就处于不断降解的过程中,离体后速度逐渐加快,所以速冻越快越好,但是也不用过于紧张,即使放上半小时里面还有完整RNA存在,只是比例很低了,如果用于做NORTHERN肯定不行,但如果做一些不是表达效率很低的基因的RT的话还有机会的(经验之谈). 至于DEPC洗的问题,由于上述原因,只要操作迅速,其实剪子之类意义不大,毕竟细胞释放的酶应该比剪子上带的多多了,当然,洗洗也没坏处,更保险
@燕睿4554：提取出来的microRNA可以在 - 80°C条件下储存多久不会降解,并且还可以继续RT - pcr -
池冰18139868960…… 你是提了总RNA 然后想检测miRNA么 如果是已经用DEPC水溶了 那三周就差不多了 不超过一个月 不然就不准了
@燕睿4554：在各种RNA中,哪个半衰期最短 -
池冰18139868960…… 常见的三种RNA中,半衰期最短的是mRNA,对于真核生物来说,玩成了翻译后mRNA就降解了,而对于原核生物来说则更快,原核生物中很多mRNA几乎是边翻译边降解的.对于tRNA和rRNA来说,这两种RNA是相对比较稳定的,tRNA在完成肽链合成后,又会和新的对应氨基酸结合去合成新的肽链,而rRNA与核糖体蛋白结合形成比较稳定的核糖体结构,一般来说存在会更加长.当然,对于某些小分子RNA来说,可能有些会比mRNA半衰期更短,但一般情况下不考虑,因为小分子RNA参与的功能太多,你不能统一的概括其半衰期.
@燕睿4554：提取RNA的血清如何冻存 -
池冰18139868960…… 、组织样品采集 1. 首先准备好用于包装样品的铝箔或冷冻保存管,并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表多处写明样品编号. 2. 准确切除所需组织. 3. 离体新鲜组织,立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型. 4. 在RNase-free ...
@燕睿4554：动物RNA的提取 -
池冰18139868960…… RNA的提取 一、准备试剂: 氯仿,异丙醇,75℅乙醇,无RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制). 二、操作步骤: 1. 匀浆处理: a. 组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理....
@燕睿4554：rna粗提后在4℃溶解4小时会降解吗? -
池冰18139868960…… 不会
@燕睿4554：rna提取怎么室温干燥 -
池冰18139868960…… rna提取怎么室温干燥RNA提取步骤及注意事项(仅供参考):实验步骤如下:1.取50—100mg的组织,加入1ml Trizol试剂,用匀浆器打匀(Trizol先放于冰上).2.将匀浆室温放置5min.3.加入200μl氯仿,剧烈震荡混匀30s,冰上静置3min.4....
@燕睿4554：我想采集提rna的样品,在解剖后可以用冰冷冻一段时间再采样吗, -
池冰18139868960…… 根据我的经验,其实RNA也没有传说中的那么容易降解,组织中RNA含量很高,即使降解也降解不了多少,就可以直接放在4度冰箱,你也可以做个实验对比看看4度存放与液氮存放所提取的RNA差距有多大.并不建议放在-20度,这个存放时间最好不要超过一个星期.如果你实在担心RNA降解,那就放在液氮中.
@燕睿4554：小鼠组织室温放过夜,蛋白和rna都降解了吗 -
池冰18139868960…… 小鼠组织室温放过夜,蛋白和rna都降解了 提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液.一般是1:1进行配制.用的裂解液我们是RIPA. 将组织用液氮研磨碎了,然后按量加入裂解液,细胞量在10七次方左右是100微升.冰浴裂解20分钟(间断摇动).然后4摄氏度离心12000rpm,15分钟. 胰腺组织含多种类型的细胞,要想提取胰岛A细胞的RNA,首先就必须将胰岛A细胞从胰腺组织的细胞群中分离出来,可以用流式细胞分选或磁珠分选等. 获得高纯度的胰岛A细胞后,再用TRIZOL或RNA提取试剂盒等将其RNA提取出来就行了.
@燕睿4554：提DNA的时候发现有很多RNA,怎样才能除去这些RNA -
池冰18139868960…… 你看一下溶液的PH值是不是没调好,可能PH值小了吧,核酸的水解性质是:RNA对酸不敏感但遇碱水解,DNA遇碱不水解但遇酸水解.当然前提是你要确定没往里误加DNases(脱氧核糖核酸酶)把DNA给水解了. 要除去这些RNA,往里加RNases把RNA水解掉就可以了啊.
