引物3端为什么不能为a
@牟严2624：微卫星引物设计的时候有要求3'端不能是A吗?为什么, - 作业帮
钟任18389209743…… [答案] 这个在引物设计上都是不建议3'端是A,T的,因为A,T只有两个氢键,结合力不如GC强,而且做PCR,要求的就是3'端严格匹配且稳定,最好不要是连续的AT,并最好以C或G结尾,当然如果实在没法设计,最后一位怎么也不能设计到GC上,也尽量...
@牟严2624：引物设计时3'端最后一个碱基为什么不能是A -
钟任18389209743…… 引物设计时3′端不能选择A,最好选择T,是因为引物3′端错配时,不同碱基引发效率存在着很大的差异,当末位的碱基为A时,即使在错配的情况下,也能有引发链的合成,而当末位链为T时,错配的引发效率大大降低,G、C错配的引发效率介于A、T之间,所以3′端最好选择T. 它的理由只是讲如果存在错配并且引物的3'末端是A的话,使错配链延伸的几率要比末端是T/C/G时大得多,仅仅是一个几率的问题,能不能肯定的说就会比末端是T/C/G时大呢,个人觉得未必.
@牟严2624：生物问题 -
钟任18389209743…… 引物,是一小段单链DNA或RNA,作为DNA复制的起始点,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链,在引物的3′-OH上,核苷酸以二酯链形式进行合成,因此引物的3′-OH,必须是游离的.[编辑本段]...
@牟严2624：RT - PCR引物设计中3'端是A和3'端自主互补哪个更不适合 - 作业帮
钟任18389209743…… [答案] 个人意见是3'端是A 更不好 因为A=T配对 氢键不够强 不稳定
@牟严2624：同一模版DNA在进行PCR扩增时是不是需要不同的两种引物?为什么资料上说引物只要Tm值相似就行? -
钟任18389209743…… 那是一对引物, 通常所说的正向,反向. 他们的碱基不一样,当然Tm值也就不一样了.所以设计引物时尽量设计一术的Tm值,有利于选择最佳的退火温度.
@牟严2624：PCR反应的引物有何种要求? -
钟任18389209743…… PCR引物设计的11条要求 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计. DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的.在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(Alignment),各基因相同的序列就是...
@牟严2624：磷酸化基因的PCR引物怎么设计 -
钟任18389209743…… 1,PCR引物是利用碱基互补原则,通过找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列. 2,首先要找到你用来设计引物的目的基因全序列,一般NCBI、Genebank上都能找得到. 3,引物的长度一般为15-30 bp,常用的是18-27 ...
@牟严2624：引物的5端和3端在结构上有什么区别 -
钟任18389209743…… 3'端的末位碱基对Taq酶的DNA合成效率有较大影响.不同的末位碱基在错配位置导致不同的扩增效率,末位碱基为A的错配效率明显高于其他3个碱基,因此应当避免在引物得3'端使用碱基A.5'端对PCR影响不太大,因此常用来引进修为位点或标记物.如增加酶切位点等等. 另外,3'端相似性较高的序列,容易导致错配.引物3'端出现3个以上连续的剪辑,如GGG或者CCC,回事错误引发几率增加. 希望对你有帮助
@牟严2624：什么叫错配pcr -
钟任18389209743…… 列两篇相关文章的摘要,主要还是筛选抗体库.类似于进化论中的突变随机选择定向(如需要原文请提供电子邮箱): 目的 :通过突变方法提高抗TNFα单链抗体pscTNF的亲和力.方法 :以pscTNF质粒为模板 ,应用错配PCR构建突变抗体库 ...
@牟严2624：实时荧光定量PCR中两种引物的设计有什么要求 -
钟任18389209743…… 参照以下real-timePCR引物设计原则:1.最好位于编码区5'端的300-400bp区域内,可以用DNAman,Alignment软件看看结果.2.产物不能形成二级结构(自由能小于58.61KJ/mol).3.引物长度一般在17-25碱基之间,上下游引物不能相差太大.4.G...
钟任18389209743…… [答案] 这个在引物设计上都是不建议3'端是A,T的,因为A,T只有两个氢键,结合力不如GC强,而且做PCR,要求的就是3'端严格匹配且稳定,最好不要是连续的AT,并最好以C或G结尾,当然如果实在没法设计,最后一位怎么也不能设计到GC上,也尽量...
@牟严2624：引物设计时3'端最后一个碱基为什么不能是A -
钟任18389209743…… 引物设计时3′端不能选择A,最好选择T,是因为引物3′端错配时,不同碱基引发效率存在着很大的差异,当末位的碱基为A时,即使在错配的情况下,也能有引发链的合成,而当末位链为T时,错配的引发效率大大降低,G、C错配的引发效率介于A、T之间,所以3′端最好选择T. 它的理由只是讲如果存在错配并且引物的3'末端是A的话,使错配链延伸的几率要比末端是T/C/G时大得多,仅仅是一个几率的问题,能不能肯定的说就会比末端是T/C/G时大呢,个人觉得未必.
@牟严2624：生物问题 -
钟任18389209743…… 引物,是一小段单链DNA或RNA,作为DNA复制的起始点,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链,在引物的3′-OH上,核苷酸以二酯链形式进行合成,因此引物的3′-OH,必须是游离的.[编辑本段]...
@牟严2624：RT - PCR引物设计中3'端是A和3'端自主互补哪个更不适合 - 作业帮
钟任18389209743…… [答案] 个人意见是3'端是A 更不好 因为A=T配对 氢键不够强 不稳定
@牟严2624：同一模版DNA在进行PCR扩增时是不是需要不同的两种引物?为什么资料上说引物只要Tm值相似就行? -
钟任18389209743…… 那是一对引物, 通常所说的正向,反向. 他们的碱基不一样,当然Tm值也就不一样了.所以设计引物时尽量设计一术的Tm值,有利于选择最佳的退火温度.
@牟严2624：PCR反应的引物有何种要求? -
钟任18389209743…… PCR引物设计的11条要求 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计. DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的.在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(Alignment),各基因相同的序列就是...
@牟严2624：磷酸化基因的PCR引物怎么设计 -
钟任18389209743…… 1,PCR引物是利用碱基互补原则,通过找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列. 2,首先要找到你用来设计引物的目的基因全序列,一般NCBI、Genebank上都能找得到. 3,引物的长度一般为15-30 bp,常用的是18-27 ...
@牟严2624：引物的5端和3端在结构上有什么区别 -
钟任18389209743…… 3'端的末位碱基对Taq酶的DNA合成效率有较大影响.不同的末位碱基在错配位置导致不同的扩增效率,末位碱基为A的错配效率明显高于其他3个碱基,因此应当避免在引物得3'端使用碱基A.5'端对PCR影响不太大,因此常用来引进修为位点或标记物.如增加酶切位点等等. 另外,3'端相似性较高的序列,容易导致错配.引物3'端出现3个以上连续的剪辑,如GGG或者CCC,回事错误引发几率增加. 希望对你有帮助
@牟严2624：什么叫错配pcr -
钟任18389209743…… 列两篇相关文章的摘要,主要还是筛选抗体库.类似于进化论中的突变随机选择定向(如需要原文请提供电子邮箱): 目的 :通过突变方法提高抗TNFα单链抗体pscTNF的亲和力.方法 :以pscTNF质粒为模板 ,应用错配PCR构建突变抗体库 ...
@牟严2624：实时荧光定量PCR中两种引物的设计有什么要求 -
钟任18389209743…… 参照以下real-timePCR引物设计原则:1.最好位于编码区5'端的300-400bp区域内,可以用DNAman,Alignment软件看看结果.2.产物不能形成二级结构(自由能小于58.61KJ/mol).3.引物长度一般在17-25碱基之间,上下游引物不能相差太大.4.G...
