蛋白诱导表达原理
@桑幸2395：请教:IPTG的诱导原理是什么 -
汪虞19435813199…… 如果是做蛋白表达的话,冷诱导应该是指的低温诱导吧? 细菌37C生长到一定量,加入IPTG进行诱导表达,正常情况下应该在30C进行诱导表达.但是为了避免表达速度过快形成大量包涵体,所以选择更低温度进行诱导
@桑幸2395：IPTG诱导大肠杆菌表达目标蛋白的作用原理是什么请用中文回答. - 作业帮
汪虞19435813199…… [答案] 用乳糖操纵子作为启动子进行蛋白质表达的时候,需要诱导物进行诱导(相当于点火),但乳糖可以被细胞利用掉,所以利用IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)在结构上与乳糖的相似性也可以将基因表达启动,但它不能被细胞利用掉,从而实现持...
@桑幸2395：如何用基因工程法将人体内产生的一种蛋白质在细菌体内表达 -
汪虞19435813199…… 这个叫做“原核表达”.首先你要有原核表达用载体,然后你要有该蛋白对应的cDNA序列,以此构建原核表达融合载体,最后将构建好的载体转入如BL21类的大肠杆菌菌株内,通过IPTG的方法诱导表达就可以了.
@桑幸2395：蛋白质表达一般的条件? -
汪虞19435813199…… 一般影响表达的条件是温度,培养基PH值(一般为7.0),IPTG浓度,转速等,常用条件37度,OD600为0.5-1.0间,IPTG浓度我常用0.1mmOL/L,也可以高到1.5mmol/L.转速需要自己摸索,不要高于200r/min.不同的载体和基因都不同.并没有完全适用的万能条件.
@桑幸2395：谁能给下诱导蛋白解释??? -
汪虞19435813199…… 诱导蛋白 是在环境中有诱导物(通常是酶的底物)存在的情况下,由诱导物诱导而生成的酶.例如,大肠杆菌分解乳糖的半乳糖苷酶就属于诱导酶.又如,催化淀粉分解为糊精、麦芽糖等的α-淀粉酶也是一种诱导酶,多种微生物都能产生这种酶...
@桑幸2395：怎么提高诱导表达的目的蛋白含量 -
汪虞19435813199…… 诱导表达没有目的蛋白产生原因无非两种 一是诱导条件不适合目的蛋白的表达,可通过改变培养基,温度,诱导剂等条件重新摸索出合适的诱导条件. 二是目的蛋白的菌种有问题,可通过涂板挑选单克隆菌落重新培养,或者质粒重新转化表达菌株等方法优化菌种.
@桑幸2395：怎样将一个基因表达成蛋白质?给一个基因,要你去表达成蛋白,并分离蛋白.这些实验的具体步骤和基本原理是怎样的啊, - 作业帮
汪虞19435813199…… [答案] 我有一个方法是利用基因工程的,不知道是不是房主需要的. 1.首先利用PCR进行基因扩增 2.将基因转移至表现载体上 3.将基因转移到大肠杆菌(或其他可用细胞内)的细胞中 4.培养,选择所要得菌株 5.诱导蛋白质表现 6.打破细胞并分离细胞中的所...
@桑幸2395：为什么做蛋白结构的都用大肠杆菌表达蛋白 -
汪虞19435813199…… 因为做蛋白结构的蛋白需要非常高的浓度,至少要10mg/ml以上,这样就需要很大的蛋白量.而目前的表达系统中,只有原核表达系统也就是大肠杆菌大量表达蛋白时成本最低.所以一般做蛋白结构的都用大肠杆菌来表达蛋白.
@桑幸2395：为什么使用iptg诱导蛋白表达 -
汪虞19435813199…… E.coli 的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷 酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节基因I.I基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状...
@桑幸2395：为什么prs315载体表达蛋白需要半乳糖诱导 -
汪虞19435813199…… 为什么prs315载体表达蛋白需要半乳糖诱导 诱导蛋白 是在环境中有诱导物(通常是酶的底物)存在的情况下,由诱导物诱导而生成的酶.例如,大肠杆菌分解乳糖的半乳糖苷酶就属于诱导酶.又如,催化淀粉分解为糊精、麦芽糖等的α-淀粉酶也是...
汪虞19435813199…… 如果是做蛋白表达的话,冷诱导应该是指的低温诱导吧? 细菌37C生长到一定量,加入IPTG进行诱导表达,正常情况下应该在30C进行诱导表达.但是为了避免表达速度过快形成大量包涵体,所以选择更低温度进行诱导
@桑幸2395：IPTG诱导大肠杆菌表达目标蛋白的作用原理是什么请用中文回答. - 作业帮
汪虞19435813199…… [答案] 用乳糖操纵子作为启动子进行蛋白质表达的时候,需要诱导物进行诱导(相当于点火),但乳糖可以被细胞利用掉,所以利用IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)在结构上与乳糖的相似性也可以将基因表达启动,但它不能被细胞利用掉,从而实现持...
@桑幸2395：如何用基因工程法将人体内产生的一种蛋白质在细菌体内表达 -
汪虞19435813199…… 这个叫做“原核表达”.首先你要有原核表达用载体,然后你要有该蛋白对应的cDNA序列,以此构建原核表达融合载体,最后将构建好的载体转入如BL21类的大肠杆菌菌株内,通过IPTG的方法诱导表达就可以了.
@桑幸2395：蛋白质表达一般的条件? -
汪虞19435813199…… 一般影响表达的条件是温度,培养基PH值(一般为7.0),IPTG浓度,转速等,常用条件37度,OD600为0.5-1.0间,IPTG浓度我常用0.1mmOL/L,也可以高到1.5mmol/L.转速需要自己摸索,不要高于200r/min.不同的载体和基因都不同.并没有完全适用的万能条件.
@桑幸2395：谁能给下诱导蛋白解释??? -
汪虞19435813199…… 诱导蛋白 是在环境中有诱导物(通常是酶的底物)存在的情况下,由诱导物诱导而生成的酶.例如,大肠杆菌分解乳糖的半乳糖苷酶就属于诱导酶.又如,催化淀粉分解为糊精、麦芽糖等的α-淀粉酶也是一种诱导酶,多种微生物都能产生这种酶...
@桑幸2395：怎么提高诱导表达的目的蛋白含量 -
汪虞19435813199…… 诱导表达没有目的蛋白产生原因无非两种 一是诱导条件不适合目的蛋白的表达,可通过改变培养基,温度,诱导剂等条件重新摸索出合适的诱导条件. 二是目的蛋白的菌种有问题,可通过涂板挑选单克隆菌落重新培养,或者质粒重新转化表达菌株等方法优化菌种.
@桑幸2395：怎样将一个基因表达成蛋白质?给一个基因,要你去表达成蛋白,并分离蛋白.这些实验的具体步骤和基本原理是怎样的啊, - 作业帮
汪虞19435813199…… [答案] 我有一个方法是利用基因工程的,不知道是不是房主需要的. 1.首先利用PCR进行基因扩增 2.将基因转移至表现载体上 3.将基因转移到大肠杆菌(或其他可用细胞内)的细胞中 4.培养,选择所要得菌株 5.诱导蛋白质表现 6.打破细胞并分离细胞中的所...
@桑幸2395：为什么做蛋白结构的都用大肠杆菌表达蛋白 -
汪虞19435813199…… 因为做蛋白结构的蛋白需要非常高的浓度,至少要10mg/ml以上,这样就需要很大的蛋白量.而目前的表达系统中,只有原核表达系统也就是大肠杆菌大量表达蛋白时成本最低.所以一般做蛋白结构的都用大肠杆菌来表达蛋白.
@桑幸2395：为什么使用iptg诱导蛋白表达 -
汪虞19435813199…… E.coli 的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷 酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节基因I.I基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状...
@桑幸2395：为什么prs315载体表达蛋白需要半乳糖诱导 -
汪虞19435813199…… 为什么prs315载体表达蛋白需要半乳糖诱导 诱导蛋白 是在环境中有诱导物(通常是酶的底物)存在的情况下,由诱导物诱导而生成的酶.例如,大肠杆菌分解乳糖的半乳糖苷酶就属于诱导酶.又如,催化淀粉分解为糊精、麦芽糖等的α-淀粉酶也是...
