5x蛋白上样缓冲液配方
@卓珊5658：蛋白变性上样缓冲5x和6x的区别 -
莫定14755597143…… 蛋白变性上样缓冲5x和6x的区别就是配方量不一样,使用的时候加入的量不一样.5x加入后稀释5倍到1x,6x加入后稀释6倍到1x这样
@卓珊5658：4*和5*的上样缓冲液区别 -
莫定14755597143…… 4*和5*的上样缓冲液的区别就是加样的比例不一样. 4*上样缓冲液使用方法: 1、按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用.如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释. 2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变...
@卓珊5658：求做western blot时提取贴壁细胞总蛋白详细的protocol -
莫定14755597143…… 我个人经验,也以六孔板为例:1、移除旧培养液2、每孔加PBS1ml,漂洗1到2次3、每孔加蛋白裂解液100ul(蛋白裂解液不易加多,多了会稀释蛋白浓度)4、然后用细胞刮棒来回刮除细胞,用枪头吸出液体至干净的EP管(操作最好在冰上,...
@卓珊5658：5%的SDS - PAGE电泳浓缩胶怎么配?各组分的体积是按照什么分?
莫定14755597143…… (主要分为浓缩胶和分离胶,配方可自己上网查下)(2...使用5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以减小上样体积,...电泳时电泳液可以使用碧云天生产的SDS-PAGE电泳液
@卓珊5658：SDS - PAGE 5Xloading buffer 配制过程,注意,问的不是配方,高手进 -
莫定14755597143…… 我想说以下几点: 1.SDS-PAGE loading buffer一般配成2X 的,5X loading buffer确实过于粘稠,且SDS在低温下难溶于水,这就导致你配的buffer“摇都摇不动”了 2.不知你为何要配那么多loading buffer(况且是5X的),这些东西都是用量很...
@卓珊5658：急急急 tris - 甘氨酸缓冲液怎么配? -
莫定14755597143…… 蛋白质(western)电泳用的缓冲液嘛? 10*电缓:30.3gTris-base,188g甘氨酸,10gSDS,用蒸馏水溶解至1000ml
@卓珊5658：急急!!关于sds - pega电泳 样品处理 -
莫定14755597143…… SDS-PAGE, 不是sds-pega…… 对于SDS-PAGE中的样品蛋白没有太大的要求,只需要其能够充分溶解或者悬浮在液体中即可.也就是说,你的蛋白应该是可溶的,或者是被你用振荡、超声、或者移液枪的吹吸打散了的.不需要用特定的溶液溶解,但是上样前需要加入1/5倍样品体积的5X载样液(Loading Buffer,62.5mMol/L Tris-HCl 8.0,2% SDS,25%甘油,0.01%溴酚蓝)并沸水加热3min左右,经12,000rpm*1min离心,取上清上样.
@卓珊5658：5*SDS - PAGE蛋白上样缓冲液之前需要细胞裂解液吗 -
莫定14755597143…… 其主要成份为SDS有含DTT的,也有含巯基还原剂的,看你个人需求. 4*蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用,溴酚蓝.其主要成份为SDS,DTT,β-巯基乙醇,溴酚蓝,缓冲盐溶液等. 4*蛋白上样缓冲液(含DTT)适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用
@卓珊5658：垂直式蛋白质电泳的操作步骤? -
莫定14755597143…… 实验试剂和器材 1.材料: 低分子量标准蛋白试剂盒: 低分子量标准蛋白: 兔磷酸化酶B MW=97,400 牛血清白蛋白 MW=66,200 兔肌动蛋白 MW=43,000 牛碳酸酐酶 MW=31,000 胰蛋白酶抑制剂 MW=20,100 鸡蛋清溶菌酶 MW=14,400 开封后溶...
莫定14755597143…… 蛋白变性上样缓冲5x和6x的区别就是配方量不一样,使用的时候加入的量不一样.5x加入后稀释5倍到1x,6x加入后稀释6倍到1x这样
@卓珊5658：4*和5*的上样缓冲液区别 -
莫定14755597143…… 4*和5*的上样缓冲液的区别就是加样的比例不一样. 4*上样缓冲液使用方法: 1、按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用.如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释. 2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变...
@卓珊5658：求做western blot时提取贴壁细胞总蛋白详细的protocol -
莫定14755597143…… 我个人经验,也以六孔板为例:1、移除旧培养液2、每孔加PBS1ml,漂洗1到2次3、每孔加蛋白裂解液100ul(蛋白裂解液不易加多,多了会稀释蛋白浓度)4、然后用细胞刮棒来回刮除细胞,用枪头吸出液体至干净的EP管(操作最好在冰上,...
@卓珊5658：5%的SDS - PAGE电泳浓缩胶怎么配?各组分的体积是按照什么分?
莫定14755597143…… (主要分为浓缩胶和分离胶,配方可自己上网查下)(2...使用5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以减小上样体积,...电泳时电泳液可以使用碧云天生产的SDS-PAGE电泳液
@卓珊5658：SDS - PAGE 5Xloading buffer 配制过程,注意,问的不是配方,高手进 -
莫定14755597143…… 我想说以下几点: 1.SDS-PAGE loading buffer一般配成2X 的,5X loading buffer确实过于粘稠,且SDS在低温下难溶于水,这就导致你配的buffer“摇都摇不动”了 2.不知你为何要配那么多loading buffer(况且是5X的),这些东西都是用量很...
@卓珊5658：急急急 tris - 甘氨酸缓冲液怎么配? -
莫定14755597143…… 蛋白质(western)电泳用的缓冲液嘛? 10*电缓:30.3gTris-base,188g甘氨酸,10gSDS,用蒸馏水溶解至1000ml
@卓珊5658：急急!!关于sds - pega电泳 样品处理 -
莫定14755597143…… SDS-PAGE, 不是sds-pega…… 对于SDS-PAGE中的样品蛋白没有太大的要求,只需要其能够充分溶解或者悬浮在液体中即可.也就是说,你的蛋白应该是可溶的,或者是被你用振荡、超声、或者移液枪的吹吸打散了的.不需要用特定的溶液溶解,但是上样前需要加入1/5倍样品体积的5X载样液(Loading Buffer,62.5mMol/L Tris-HCl 8.0,2% SDS,25%甘油,0.01%溴酚蓝)并沸水加热3min左右,经12,000rpm*1min离心,取上清上样.
@卓珊5658：5*SDS - PAGE蛋白上样缓冲液之前需要细胞裂解液吗 -
莫定14755597143…… 其主要成份为SDS有含DTT的,也有含巯基还原剂的,看你个人需求. 4*蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用,溴酚蓝.其主要成份为SDS,DTT,β-巯基乙醇,溴酚蓝,缓冲盐溶液等. 4*蛋白上样缓冲液(含DTT)适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用
@卓珊5658：垂直式蛋白质电泳的操作步骤? -
莫定14755597143…… 实验试剂和器材 1.材料: 低分子量标准蛋白试剂盒: 低分子量标准蛋白: 兔磷酸化酶B MW=97,400 牛血清白蛋白 MW=66,200 兔肌动蛋白 MW=43,000 牛碳酸酐酶 MW=31,000 胰蛋白酶抑制剂 MW=20,100 鸡蛋清溶菌酶 MW=14,400 开封后溶...
