5x上样缓冲液稀释用什么稀
@贝赖6005：5*上样缓冲液 5倍浓缩 还是 5倍稀释呀?SDS - PAGE 中就用的是5*loading buffer~ - 作业帮
宁寒19584027055…… [答案] 既不是浓缩,也不是稀释,而是用5倍的“上面所用的缓冲液”进行淋洗.
@贝赖6005：5*非还原样品缓冲液怎样稀释成2*非还原样品缓冲液 -
宁寒19584027055…… 4*和5*的上样缓冲液的区别就是加样的比例不一样. 4*上样缓冲液使用方法: 1、按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用.如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释. 2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变...
@贝赖6005：DNA电泳上样缓冲液怎么配 -
宁寒19584027055…… 50*TAE Buffer 配制方法: 1.称量氨基丁三醇 242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L烧杯中; 2.向烧杯中加入约600ml去离子水,充分搅拌均匀; 3.加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解; 4.用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存. 使用时稀释50倍 即1*TAE Buffer 10*TBE Buffer配制方法: 1.称量氨基丁三醇 108g,Na2EDTA.2H2O 7.44g,硼酸55g 于1L烧杯中; 2.加入约700ml去离子水,搅拌均匀; 3.用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存. 使用时稀释10倍 即1*TBE Buffer
@贝赖6005：PT - PCR操作流程 -
宁寒19584027055…… 是RT-PCR啊. 一、实验器具与材料: 1、移液枪:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl 2、吸头:1ml、200μl、20μl 3、匀浆管:5ml 4、吸头台:放置1ml吸头的一个,放置20μl吸头的一个 5、EP管:1.5ml、0.2ml、100μl 6、试剂瓶:2个60ml的棕色...
@贝赖6005：求做western blot时提取贴壁细胞总蛋白详细的protocol -
宁寒19584027055…… 我个人经验,也以六孔板为例:1、移除旧培养液2、每孔加PBS1ml,漂洗1到2次3、每孔加蛋白裂解液100ul(蛋白裂解液不易加多,多了会稀释蛋白浓度)4、然后用细胞刮棒来回刮除细胞,用枪头吸出液体至干净的EP管(操作最好在冰上,...
@贝赖6005：为什么在DNA电泳上样是要加六倍的上样缓冲液 -
宁寒19584027055…… 加的是6*的loading buffer,不是说要加6倍的缓冲液,而是说加5微升的DNA样品,需要加1微升的6*上样缓冲液,这样6*的缓冲液被稀释成1*的了,1*才是缓冲液的工作浓度. 不懂的话再追问啊
@贝赖6005：如何配溴酚蓝指示剂 -
宁寒19584027055…… 1%的溴酚蓝 将托盘天平上称取1g溴酚蓝定溶于100ml无水乙醇中,转移入滴瓶中,贴标签备用. 0.05%的溴酚蓝 配western blot用的2*SDS上样缓冲液需要用到0.1%的溴酚蓝,2-DE中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液.实际上,溴酚蓝在水中的...
@贝赖6005：怎样配置缓冲液 -
宁寒19584027055…… pH标准溶液甲(pH4.00825) 称取先110~130干燥2~3h邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)10.12g溶于水并容量瓶稀释至1L.般仪器校准使用缓冲液校保管室买(比较准确)已经配置要溶解定容即
@贝赖6005：垂直式蛋白质电泳的操作步骤? -
宁寒19584027055…… 实验试剂和器材 1.材料: 低分子量标准蛋白试剂盒: 低分子量标准蛋白: 兔磷酸化酶B MW=97,400 牛血清白蛋白 MW=66,200 兔肌动蛋白 MW=43,000 牛碳酸酐酶 MW=31,000 胰蛋白酶抑制剂 MW=20,100 鸡蛋清溶菌酶 MW=14,400 开封后溶...
宁寒19584027055…… [答案] 既不是浓缩,也不是稀释,而是用5倍的“上面所用的缓冲液”进行淋洗.
@贝赖6005：5*非还原样品缓冲液怎样稀释成2*非还原样品缓冲液 -
宁寒19584027055…… 4*和5*的上样缓冲液的区别就是加样的比例不一样. 4*上样缓冲液使用方法: 1、按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用.如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释. 2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变...
@贝赖6005：DNA电泳上样缓冲液怎么配 -
宁寒19584027055…… 50*TAE Buffer 配制方法: 1.称量氨基丁三醇 242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L烧杯中; 2.向烧杯中加入约600ml去离子水,充分搅拌均匀; 3.加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解; 4.用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存. 使用时稀释50倍 即1*TAE Buffer 10*TBE Buffer配制方法: 1.称量氨基丁三醇 108g,Na2EDTA.2H2O 7.44g,硼酸55g 于1L烧杯中; 2.加入约700ml去离子水,搅拌均匀; 3.用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存. 使用时稀释10倍 即1*TBE Buffer
@贝赖6005：PT - PCR操作流程 -
宁寒19584027055…… 是RT-PCR啊. 一、实验器具与材料: 1、移液枪:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl 2、吸头:1ml、200μl、20μl 3、匀浆管:5ml 4、吸头台:放置1ml吸头的一个,放置20μl吸头的一个 5、EP管:1.5ml、0.2ml、100μl 6、试剂瓶:2个60ml的棕色...
@贝赖6005：求做western blot时提取贴壁细胞总蛋白详细的protocol -
宁寒19584027055…… 我个人经验,也以六孔板为例:1、移除旧培养液2、每孔加PBS1ml,漂洗1到2次3、每孔加蛋白裂解液100ul(蛋白裂解液不易加多,多了会稀释蛋白浓度)4、然后用细胞刮棒来回刮除细胞,用枪头吸出液体至干净的EP管(操作最好在冰上,...
@贝赖6005：为什么在DNA电泳上样是要加六倍的上样缓冲液 -
宁寒19584027055…… 加的是6*的loading buffer,不是说要加6倍的缓冲液,而是说加5微升的DNA样品,需要加1微升的6*上样缓冲液,这样6*的缓冲液被稀释成1*的了,1*才是缓冲液的工作浓度. 不懂的话再追问啊
@贝赖6005：如何配溴酚蓝指示剂 -
宁寒19584027055…… 1%的溴酚蓝 将托盘天平上称取1g溴酚蓝定溶于100ml无水乙醇中,转移入滴瓶中,贴标签备用. 0.05%的溴酚蓝 配western blot用的2*SDS上样缓冲液需要用到0.1%的溴酚蓝,2-DE中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液.实际上,溴酚蓝在水中的...
@贝赖6005：怎样配置缓冲液 -
宁寒19584027055…… pH标准溶液甲(pH4.00825) 称取先110~130干燥2~3h邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)10.12g溶于水并容量瓶稀释至1L.般仪器校准使用缓冲液校保管室买(比较准确)已经配置要溶解定容即
@贝赖6005：垂直式蛋白质电泳的操作步骤? -
宁寒19584027055…… 实验试剂和器材 1.材料: 低分子量标准蛋白试剂盒: 低分子量标准蛋白: 兔磷酸化酶B MW=97,400 牛血清白蛋白 MW=66,200 兔肌动蛋白 MW=43,000 牛碳酸酐酶 MW=31,000 胰蛋白酶抑制剂 MW=20,100 鸡蛋清溶菌酶 MW=14,400 开封后溶...
