iptg低温诱导表达的好处
@罗花3578:请教:IPTG的诱导原理是什么 -
龚岭13935518204…… 如果是做蛋白表达的话,冷诱导应该是指的低温诱导吧? 细菌37C生长到一定量,加入IPTG进行诱导表达,正常情况下应该在30C进行诱导表达.但是为了避免表达速度过快形成大量包涵体,所以选择更低温度进行诱导
@罗花3578:做低温诱导需要加iptg吗 - 作业帮
龚岭13935518204…… [答案] 需要的 低温诱导可以降低IPTG的量,比如0.1mM IPTG,延长诱导时间,比如12~16小时. 不加IPTG的话只有极个别情况下会出现泄漏表达.一般都是不表达的.
@罗花3578:BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导 -
龚岭13935518204…… BL21细胞基因组中的T7 promoter可以被IPTG诱导,诱导后其promoter下游基因产物T7 RNA polymerase表达增多,T7 RNA polymerase又可以将转入BL21细胞中的质粒目的基因转录成mRNA,进而表达为蛋白质.因此,IPTG诱导可以使BL21细胞表达更多目的蛋白.
@罗花3578:IPTG诱导大肠杆菌表达目标蛋白的作用原理是什么请用中文回答. - 作业帮
龚岭13935518204…… [答案] 用乳糖操纵子作为启动子进行蛋白质表达的时候,需要诱导物进行诱导(相当于点火),但乳糖可以被细胞利用掉,所以利用IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)在结构上与乳糖的相似性也可以将基因表达启动,但它不能被细胞利用掉,从而实现持...
@罗花3578:IPTG的作用 - 作业帮
龚岭13935518204…… [答案] 蓝白斑筛选时的诱导剂,诱导基因表达β-半乳糖苷酶,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落.
@罗花3578:低温诱导植物染色体数目的在生活中的作用还可以这样说,有什么好处 - 作业帮
龚岭13935518204…… [答案] 多倍体育种! 因为低温可以抑制纺锤丝的形成!从而不能是分裂后的染色体移向两极,从而使染色体加倍! 如:八倍体小黑麦.无籽西瓜,四倍体葡萄,四倍体番茄,等!
@罗花3578:IPTG诱导表达的作用原理是什么? -
龚岭13935518204…… Binding of the repressor-IPTG complex to the operator can be studied by using greater concentrations of the protein in the methylation protection/enhancement assay. The large amount compensates for the low affinity of the repressor-IPTG complex...
@罗花3578:低温诱导蛋白表达时用多少度合适 -
龚岭13935518204…… IPTG 浓度时0.1mM 诱导时间一般24个小时 如果是冷休克载体的话是15度诱导, 不同的宿主和载体可能略有差异 可以以上面数据为基点,做个一定范围的探索.
@罗花3578:诱导表达时IPTG加的时间太早有影响吗? -
龚岭13935518204…… 如果在菌没有进入对数期,即OD在0.4以下就加IPTG的话,对菌的生长有抑制作用.菌浓度过低,蛋白的表达量也会低,会影响到后期蛋白的检测.所以还是在菌对数期的时候加,即0.6-0.8,比较好
@罗花3578:蛋白用不用IPTG诱导表达量差不多 -
龚岭13935518204…… 不可能的 只有在特定的环境信号(加入IPTG)刺激下,目的基因才会被激活,之后才会产生大量的代谢表达产物,收集有较多表达量的菌体.如果不用IPTG的话,大部分目的蛋白是不会表达的,有少部分可能会有极少量的表达,称之为泄漏表达.所以蛋白用不用IPTG诱导表达量差很多
龚岭13935518204…… 如果是做蛋白表达的话,冷诱导应该是指的低温诱导吧? 细菌37C生长到一定量,加入IPTG进行诱导表达,正常情况下应该在30C进行诱导表达.但是为了避免表达速度过快形成大量包涵体,所以选择更低温度进行诱导
@罗花3578:做低温诱导需要加iptg吗 - 作业帮
龚岭13935518204…… [答案] 需要的 低温诱导可以降低IPTG的量,比如0.1mM IPTG,延长诱导时间,比如12~16小时. 不加IPTG的话只有极个别情况下会出现泄漏表达.一般都是不表达的.
@罗花3578:BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导 -
龚岭13935518204…… BL21细胞基因组中的T7 promoter可以被IPTG诱导,诱导后其promoter下游基因产物T7 RNA polymerase表达增多,T7 RNA polymerase又可以将转入BL21细胞中的质粒目的基因转录成mRNA,进而表达为蛋白质.因此,IPTG诱导可以使BL21细胞表达更多目的蛋白.
@罗花3578:IPTG诱导大肠杆菌表达目标蛋白的作用原理是什么请用中文回答. - 作业帮
龚岭13935518204…… [答案] 用乳糖操纵子作为启动子进行蛋白质表达的时候,需要诱导物进行诱导(相当于点火),但乳糖可以被细胞利用掉,所以利用IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)在结构上与乳糖的相似性也可以将基因表达启动,但它不能被细胞利用掉,从而实现持...
@罗花3578:IPTG的作用 - 作业帮
龚岭13935518204…… [答案] 蓝白斑筛选时的诱导剂,诱导基因表达β-半乳糖苷酶,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落.
@罗花3578:低温诱导植物染色体数目的在生活中的作用还可以这样说,有什么好处 - 作业帮
龚岭13935518204…… [答案] 多倍体育种! 因为低温可以抑制纺锤丝的形成!从而不能是分裂后的染色体移向两极,从而使染色体加倍! 如:八倍体小黑麦.无籽西瓜,四倍体葡萄,四倍体番茄,等!
@罗花3578:IPTG诱导表达的作用原理是什么? -
龚岭13935518204…… Binding of the repressor-IPTG complex to the operator can be studied by using greater concentrations of the protein in the methylation protection/enhancement assay. The large amount compensates for the low affinity of the repressor-IPTG complex...
@罗花3578:低温诱导蛋白表达时用多少度合适 -
龚岭13935518204…… IPTG 浓度时0.1mM 诱导时间一般24个小时 如果是冷休克载体的话是15度诱导, 不同的宿主和载体可能略有差异 可以以上面数据为基点,做个一定范围的探索.
@罗花3578:诱导表达时IPTG加的时间太早有影响吗? -
龚岭13935518204…… 如果在菌没有进入对数期,即OD在0.4以下就加IPTG的话,对菌的生长有抑制作用.菌浓度过低,蛋白的表达量也会低,会影响到后期蛋白的检测.所以还是在菌对数期的时候加,即0.6-0.8,比较好
@罗花3578:蛋白用不用IPTG诱导表达量差不多 -
龚岭13935518204…… 不可能的 只有在特定的环境信号(加入IPTG)刺激下,目的基因才会被激活,之后才会产生大量的代谢表达产物,收集有较多表达量的菌体.如果不用IPTG的话,大部分目的蛋白是不会表达的,有少部分可能会有极少量的表达,称之为泄漏表达.所以蛋白用不用IPTG诱导表达量差很多